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微生物實驗室純培養在生物技術中是一個重要的操作實驗，課題涉及內容多、范圍廣，實驗難度很大。為了使學生更好地了解實驗中的許多工作，包括儀器使用、菌液稀釋、菌株移植、接種等，都要在無菌的或不被污染的條件下進行，才能保證做到純粹培養成功，筆者結合教學實際談談對本課題的教學設計。
一、教學目標確立
依據課程內容要求，確立本課題教學目標見表1。
表1
二、教學實施設計
1.制訂實驗計劃
依據課程內容要求，確立本課題教學安排見表2。
表2
2.純化大腸桿菌的原理
微生物的純培養，選用平板劃線法或稀釋涂布平板法，在牛肉膏蛋白胨培養基上操作，經培養后可分離得到單個細胞繁殖而來的、有一定形態結構的子細胞群體，即菌落。
3.準備實驗材料
本課題所用材料、儀器及藥品見表3。
表3
實驗材料 大腸桿菌 配制系列稀釋菌液
實驗儀器和設備 培養皿、試管、酒精燈、試管架、移液管、膠頭滴管、接種環、涂布器、恒溫箱、無脂棉、玻璃棒、消毒棉球、超凈工作臺 培養皿、試管、移液管、接種環、涂布器等滅菌（已滅菌備用）
實驗藥品 牛肉膏、蛋白胨培養基200ml、無菌水150ml 提前配制（滅菌備用）
4.實驗操作
（1）指導實驗操作。本課題實驗可按照下面實驗流程進行操作：
超凈工作臺倒平板、接種培養箱純化培養。
（2）接種法。一般是無菌培養基在水浴鍋加熱融化后冷卻至50℃左右倒平板。操作必須始終在酒精燈火焰旁進行，每皿倒入15ml左右并且不要將皿蓋完全打開，冷卻后的平板要倒置。
平板劃線法（圖1）：即用接種環將菌體沾在平板培養基上。微生物細胞隨畫線次數的增多而減少，將微生物單個地分離，并最終形成標準的菌落。在畫線操作時應注意：一是用接種環取菌種之前、每次畫線之前和畫線結束都要進行灼燒滅菌，灼燒后要在酒精燈附近冷卻后再操作；二是畫線時不要劃破培養基，如果采用分段畫線法操作從第二次操作應總在上一次畫線末端開始，首尾區不能相連；三是操作必須始終在酒精燈火焰旁進行。
稀釋涂布平板法（圖2）：即先將菌液用無菌水進行一系列梯度為（如10-1，10-2，10-3）稀釋液，用無菌玻璃涂棒將不同稀釋度的菌液均勻地涂布在平板上。聚集在一起的微生物將被分散成單個細胞，從而能在培養基表面形成單個的菌落。在涂布操作時應注意：一是配制系列梯度稀釋液必須用無菌水配制；二是配制系列梯度稀釋液和轉移菌液以及涂布過程等必須都在酒精燈火焰旁進行。
（3）培養操作。 將接種后的培養基和一個未接種的培養基（空白）放入37℃恒溫箱中，培養18～24h后，觀察并記錄。這期間安排學生代表或實驗小組長進行定期觀察，并做好記錄，以便及時讓其他學生觀察到自己的實驗成果。
2實驗教學準備工作幾項準則
2.1嚴格進行每個實驗項目的預實驗
預備實驗是保證實驗教學質量的前提，其目的是：檢驗實驗技術方法及操作規程是否準確無誤，所用溶液、試劑和藥品是否合格；進一步確定實驗所需時間，探索可能出現的問題并擬定解決問題的方案，根據實驗難易程度確定評分標準等[6]。另外，制片及染色技術實驗，特別是微生物的生長與培養實驗，常常出現許多意外現象或不理想的實驗結果。諸如，某種溶液和試劑失效，或某種微生物生長不好等等。因此，每個實驗項目都應當提前預做一次，確保實驗結果準確、無誤，以保證實驗教學質量。
2.2認真做好實驗教學前期準備工作
實驗教學的前期準備工作，除嚴格進行預實驗外，尚需認真檢查顯微鏡和儀器設備、玻璃器皿及溶液、試劑等，以及實驗桌凳的完好狀態。2.2.1顯微鏡的檢查要點實驗課前認真檢查：普通光學顯微鏡機械部分的鏡臂、物鏡轉換器、載物臺、標本夾、粗細調節器，以及光學系統的目鏡、物鏡和聚光鏡的完好情況，尤其是要仔細檢查調節器的靈敏度和油鏡的清晰度。2.2.2實驗用儀器設備完整性的檢查實驗課前應當認真檢查儀器設備的完整性。在實驗教學過程中最忌諱出現缺東少西，以及儀器設備和物品質量不合要求的現象[7]。每堂實驗課所需的所有物品，都應當備足有余，所用儀器設備都要保持運轉良好。實驗用儀器及物品完整性檢查工作是相當繁瑣的，工作量也很大。舉例說明，微生物學實驗課的前3個實驗項目，即光學顯微鏡的使用與革蘭氏染色法、細菌運動性及其莢膜觀察、酵母菌的死活鑒別，以及放線菌、霉菌制片與細菌計數，所用的滴瓶總計200多個，需要逐個地進行嚴格檢查：膠頭是否漏氣，瓶中的試劑是否失效、夠用，滴芯是否能順利地取出(發現沉淀和結晶應及時清洗)，標簽變色嚴重的還要及時更換。其他儀器設備及實驗桌凳的完好狀態也都應當進行認真檢查，如逐一檢查每個實驗凳腳是否松動，并及時擰緊等。2.2.3玻璃器皿一定要洗刷干凈微生物實驗教學所用的玻璃器皿數量很大，如試管、培養皿和三角燒瓶及載玻片等數以千計。用來盛裝微生物培養基的大量試管、培養皿和三角燒瓶，有一丁點不干凈就會生長霉菌；有的如載玻片上黏附了香柏油，洗刷難度很大。所以，玻璃器皿的洗刷工作是十分重要而艱巨的。玻璃器皿的全部洗刷工作都是教師與同學們共同完成的。洗刷后的檢查工作采用對著陽光以流水沖洗的方式進行，確保每一個玻璃器皿干凈明亮。其具體安排程序如下：玻璃器皿經學生洗刷后，再由同學進行檢查，最后由教師抽樣檢查。這樣，不僅保證了玻璃器皿的干凈度，還培養了學生掌握高精度清洗器皿的基本技能及嚴謹的科學作風。
3重視并完善解決實驗課堂上出現的問題
對于在微生物實驗教學過程中經常出現的一些問題，必須認真分析原因，并及時想辦法解決。在出現的問題中，有些是屬于實驗內容及其技術方法問題，但常常碰到的是一些由于學生缺少應有的素質或經驗所造成的，都應該及時分析并適當解決之。諸如，有的顯微鏡粗鑼旋縫隙里有許多油漬，究其原因是由于同學們的手不夠清潔所造成的；為此，便要求學生在使用顯微鏡之前，一定要洗手。再如，個別同學有時將實驗用的標本片丟落在載物臺上，為了避免類似情況再次發生，便要求學生每次實驗結束后一定要清點一下標本片的數量。第三，當發現個別學生把臺微尺扔到放有載玻片的鍋里，為此便不再將其擺放到學生的座位上，而是現場把臺微尺發放給每一組同學，并講明其價格昂貴，應當細心使用，輕拿輕放，課后由課代表統一交給老師核查。第四，有的學生把雙層瓶（重層瓶）的玻璃帽和裝有結晶紫的滴蕊擰碎，為了避免類似情況再次出現，每次上課前都要把其逐一擦拭，并檢查每一個滴瓶的滴蕊是否松動。
中圖分類號：G647 文獻標志碼：A 文章編號：1674-9324（2016）38-0277-02
隨著我國高校教育科研事業的發展，為了適應新世紀建設創新型國家的需要，高校建立了以團隊為主的科技創新模式，成立了多個獨立于本科教學實驗的科研實驗室。微生物學是生物科學的重要分支，微生物結構簡單、操作容易成為高新生物技術的理論和技術基石。許多微生物如大腸桿菌、酵母菌等作為研究的模式生物和分子生物學重要的載體宿主，已經成為各個實驗室常規培養的微生物，因此許多高校都成立了微生物科研團隊和科研實驗室。大量的老師，科研人員、研究生和參加大學生創新立項的本科生長期在一個實驗室里面進行科學研究工作。然而，科研實驗室中存在很多危害人身安全和實驗室安全的隱患，這不得不引起我們的高度重視。
教學實驗室由于實驗本身安全性高，實驗流程固定，安全防護措施完善等原因，因此發生安全事故低，教學實驗室發生事故造成學生傷亡的事件鮮有報道。與本科教學實驗室不同，科研實驗室往往具有下面幾個特點：空間有限，實驗室儀器和試劑種類多數量大，人員多且相對固定，人員在實驗室活動時間長?？蒲袑嶒炇业哪康氖菫榱丝萍紕撔?，因此往往實驗種類多，試驗新穎，實驗本身的危險系數高。由于許多新實驗的步驟和方法來自于文獻，文獻中缺乏相應的安全防護措施的描述，造成了實驗操作人員對于實驗安全本身危險性估計不足。另一方面由于長期待在相對固定的一個空間，對周圍環境熟悉，造成安全意識逐漸減弱；長期以來實驗室注重學生對實驗技能的掌握，忽視對實驗室安全的教育問題，也是造成安全隱患的主要原因。
近年來多起高校實驗室安全事故大多都是來自科研實驗室：2009年德國女科學家在實驗過程中被含有埃博拉病毒的注射器刺到，疑似感染埃博拉病毒；2013年04月30日南京理工大學實驗室爆炸造成1死3傷；2015年4月5日中國礦業大學實驗室發生爆燃，造成成1死4傷；2015年12月18日清華大學實驗室發生爆炸，造成1名博士后死亡。這些事故大多都是科研實驗室管理不規范造成的，因此微生物科研實驗室安全問題的探索與研究十分重要。
一、微生物科研實驗室現狀
微生物科研實驗室不僅是科技創新平臺，還是本科生畢業設計、大學生創新立項的場所。研究生日常生活的大部分時間都在實驗室中：做實驗、看文獻、休息、組會討論等。隨著開放課題、大學生創新立項使大量本科生進入實驗室，造成大量人員在有限空間內流動，這些給實驗室安全管理帶來巨大的挑戰。人員復雜，人數眾多是微生物實驗室安全問題管理的重點。
科學研究是科研實驗室的主要任務，實驗室往往重點關注基礎知識和實驗技能的掌握，而忽視了實驗室安全教育。大多數科研實驗室并沒有對新進入實驗室的學生進行過系統、全面的安全教育培訓。學生對于實驗室存在的安全隱患缺乏了解，對于實驗中可能會發生的事故缺乏應對的措施，極易將實驗中的小事故演變成大災難。
二、微生物科研實驗室存在的安全隱患及其應對措施
1.實驗室水、火、電等的安全。
安全隱患：實驗室水、火、電等的安全是實驗室安全的重點，也是容易忽視和事故常發的環節。在微生物學實驗室經常用到高壓滅菌鍋、酒精燈、電烘箱等儀器，實驗室中還有大量易燃易爆的有機溶劑及各種壓縮氣體，如果設備和試劑擺放不當或使用不合理，極易造成危險事故。實驗室中電器設備較多，有些設備如通風櫥、搖床、培養箱、烘箱等擺放密集并且常年處于運轉狀態，實驗室常常出現插排數量大，擺放亂的情況，長期使用容易造成線路老化，產生漏電現象或者自燃造成火災。
應對措施：節約用水，經常檢查上下水是否完好；需要使用明火或者易燃易爆品的實驗要在專門的房間進行實驗，易燃易爆品需要單獨存放，注意通風和溫度；固定儀器的位置，請專業技術人員將涉及的電路進行合理設計和布排，大功率設備使用專線，減少插排的使用。安裝防漏電裝置，需要對設備和電路進行定期檢查和維護。
2.實驗試劑和藥品的安全。
安全隱患：高校微生物學實驗室的強酸、強堿、有機溶劑、核酸染料等有毒有害藥品，這些藥品大多都無色無味，且具有極高的毒性和社會危害性，如果未按照規定使用，不僅會給操作者帶來極大的危害，還會造成實驗室環境的污染，嚴重威脅實驗室師生安全。強酸強堿等腐蝕性藥品，可能會腐蝕操作者的衣服和皮膚；有些試劑易揮發，通過呼吸系統吸入后會對人體健康造成危害；核酸染料等致畸致突變類藥品，這類藥品無色無味、劑量小，不易察覺但危害大，應設置專門操作區域，禁止在非操作區域內進行相關實驗；無菌操作中常用到無水乙醇進行消毒滅菌，極易引起燃燒，造成燒傷。
應對措施：規范實驗室試劑的存放，將藥品和試劑集中存放，并對其進行編號統計，便于查找和保存。對于有毒試劑實行專人保管，嚴格使用登記使用制度。有條件的實驗室應當將藥品集中存放在單獨的房間內；試驗操作過程戴手套戴口罩，對于揮發性試驗需要在通風廚中進行；實驗中產生的廢棄物需分類后進行收集分離處理，不能隨意亂扔亂倒。
3.生物安全。
安全隱患：微生物學實驗室研究的對象是微生物，肉眼不可見但是對人身體健康有很大的影響，有些微生物是條件致病菌，在免疫力低、有開放性傷口的情況下容易感染從而加重病情；帶有抗性標記的生物材料或者其他有害材料如果不經處理就丟棄會對環境造成嚴重危害。
應對措施：實驗室需指定專門人員實驗室菌株管理和保藏工作，嚴格菌種使用登記制度。菌株是微生物實驗室最寶貴的資源，應該規范菌株保藏方法，使每個學生都能掌握微生物的菌株保藏方法，并且養成菌株保藏的習慣。定期地對菌株進行保藏，并在每個同學畢業時做好菌株的交接工作。對于實驗過程中使用過的任何生物材料在丟棄之前需要進行滅菌處理。
4.大型儀器使用安全。
安全隱患：隨著實驗室的發展，科研實驗室引進了許多分子生物學、蛋白表達純化、高壓液相色譜等先進實驗儀器，這些大型儀器是實驗室寶貴的資源和資產，也是科學研究的重要工具，儀器設備的管理水平直接反映實驗室的工作效率。這些大型儀器如果操作不當，不僅可能危害操作人員的人身安全，也會造成儀器的損壞，影響實驗的正常進行和實驗結果的可靠性。實驗室大型儀器的安全包含兩個層次：人員的安全和儀器的安全。氣相色譜儀、液相色譜儀等大型儀器，在使用過程中會使用大量揮發性有機溶劑。高速離心機、電轉儀等儀器，如果不按照操作流程操作可能會對實驗人員的身體造成損傷。
應對措施：大型儀器的管理應實行專人負責制，每個人負責三到四臺儀器。在使用前需要經過專門的培訓，通過培訓考試合格后方能上機使用。在使用過程中定期對儀器進行清洗保養和維護，以保障實驗的順利進行。
三、制定安全制度，加強安全管理
1.生活區與實驗區分開：將學生在實驗室的生活用品跟實驗用品分開，嚴禁在實驗室喝水、吃東西。學生做實驗必須穿實驗服，并嚴禁將實驗用品帶入生活區。
2.實驗區按照功能進行分區：滅菌區、無菌操作區、蛋白操作區和電泳區等。對每一部分可能涉及的有毒有害物品或存在的安全隱患進行標注，貼在該區域醒目的位置，并在提醒標語旁設置手套、口罩、護目鏡等防護用品。
3.建立安全值班制度：每天安排人員值班，值班人員最后一個離開，負責檢查實驗室的水、電、火及門窗的安全，檢查儀器是否關閉，是否處于正常運行狀態，并做好。
4.加強教育：結合發生的案例，定期對學生進行實驗室安全教育；在可能存在危險的區域標記危險警示；在實驗室醒目位置懸掛實驗室安全管理條例；對可能出現的常見危險情況進行演練，加強對滅火器使用，提升應對突發狀況的能力；學會割傷、燙傷的急救方法，在實驗室設立專門的急救箱。
四、小結
實驗室安全是微生物科研實驗室進行研究的保障，也是長期以來容易被忽視的問題。隨著實驗室人員和承擔的科研項目越來越多，實驗室儀器的種類和數量大量增加，使實驗室的安全和管理問題日益突出。安全有序的實驗環境是實驗順利進行的保證。微生物科研實驗室應該牢記始終把安全問題放在第一位，按照相關的生物安全標準和規范，建立并完善實驗室安全管理制度和規范微生物安全操作，加強對學生的安全教育，并結合本實驗室本身的情況及時對實驗室進行規范和調整，避免實驗室安全事故的發生。
參考文獻：
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中圖分類號：R197.3 文獻標識碼：A 文章編號：1672-5336（2013）16-0064-02
現今社會，在社會熱點中，微生物及其產生的各類毒素引發的污染備受關注。因此，做好微生物實驗室的質量控制對監控食品安全至關重要。本文就微生物實驗的質量控制進行探討。
1 專業人員的素質
專業技術人員在微生物檢驗過程中應當具有較豐富的專業知識和較強的分析判斷能力。同時要有良好的職業道德，有嚴謹的工作態度和高度的責任心；檢驗結果應當準確、可靠，因此加強檢驗人員質量管理教育和技術業務的培訓顯得及其必要?？啥ㄆ诮M織專業技術人員進行培訓和進修學習，促使檢驗人員對新理論、新技術、新方法及時掌握，培訓工作應作為持久的、長效的專業技術人員提高素質的重要工作內容。將定期考核納入實驗室內部管理體系，作為檢驗員檢驗能力及標準熟練程度的一個驗收程序。
2 儀器設備的控制
微生物實驗室主要檢驗用設備有：生物安全柜、冰箱、培養箱、高壓滅菌器、凈化臺、顯微鏡、蒸餾設備等。儀器設備應嚴格按照出廠提供的有關規定和方法正確使用，同時注意儀器設備的質量控制，制定相關質量管理文件，嚴格對照其中儀器設備管理程序的規定執行。
2.1 儀器的采購
購置儀器過程中，須對其技術指標、性能進行進行考察了解，并經過有效論證后方能采購。采購貴重、大型設備儀器時，供貨方應對儀器進行安裝、調試、核準。確認所有技術條件符合規定記錄驗收報結果后，即可交付使用，使用過程中須明確保管人。
2.2 儀器設備的建檔備案
對儀器設備進行建檔備案，建立儀器設備卡（應標明設備名稱、編號、型號、生產廠名稱、產地和價款、采購時間、啟用時間、出廠編號等），歸整使用說明書、 檢定/校準證書、合格證和使用維護記錄等至統一檔案盒內管理保存。
2.3 儀器設備的檢定和校準
定期對強制性檢定的儀器和設備進行校準，檢定的計量部門須具有相應的資歷，儀器檢定合格后方可使用。儀器被移動過、維修過或使用一段時間后，檢測結果會造成一定影響，這時要對儀器進行期間核查。定期按儀器自校規程對不屬于強檢的儀器進行自校，據儀器情況貼"合格”“準用”或“停用”標簽。
3 試劑、標準物質、質控物的質量控制
3.1 培養基的質控
（1）培養基的購置與保存。購置培養基時注意選擇質量和信譽好的公司，要購買質量可靠、未過期、品質優良的培養基。
微生物實驗室收到培養基后，實驗室應有培養基的收貨記錄，記錄詳單應包括生產商家培養基的名稱、接收日期、批號、有效期、包裝及其完整性。培養基在使用前，應有專人對培養基經過驗證合格，不同批次的培養基應做實驗對照。培養基一般應貯存于陰涼干燥處，避免強光直射。有特別說明的培養基須嚴格按照廠商提供的要求進行貯存和使用。
（2）培養基的使用。嚴格按照實驗操作手冊規定對培養基進行配制操作。記錄配制量與操作者、日期，并于包裝上標明使用期限，定期做質量檢查，以保證其有效性。檢驗人員應熟練掌握高壓蒸汽滅菌技術，按照相應的壓力和溫度要求對實驗用器材（培養皿、三角瓶、移液管等）及培養基等進行滅菌處理。含糖類培養基的滅菌應注意控制在允許溫度范圍內，以避免營養成分的喪失。培養基配制用水主要為蒸餾水、離子水或經處理后無干擾劑和抑制劑的水。配置用水的電阻率應300000Ω/cm（25℃的情況下）以上，重金屬含量0.05mg/L以下。培養基溶解后，應注意調節培養基的pH值符合相應要求[2]。定期檢查培養基的顏色和透明度，一旦發現異常，則舍棄不用。每批培養基均應做無菌試驗和已知菌株對照試驗，確保培養基的配制正確、消毒達到要求以及操作過程未受污染。如因原料保管不善而變質或過期的試劑應棄去。
3.2 試劑及血清制品的質量控制
（1）實驗過程中，按照要求選用不同等級試劑。試劑須按照相關要求定期更換，部分試劑要求現用現配。配好各種試劑后，填寫標簽均注明試劑名稱、配制日期、有效期、配制者及配置日期，并作好相關記錄。為確保試劑的準確可靠性，定期應做試劑性能測試，具體間隔時間視試劑的穩定性和使用頻率而定。如氧化酶試劑須每次使用前測試，靛基質試劑相對穩定可每周進行1次測試。每次配制好的染色液應當進行檢測，常用染色液（如革蘭染液）每周檢測1次，不常用染色液在每次使用前[1]。為確保試劑穩定性，選用適當的貯存方法對試劑貯存。如：氧化酶試劑一般置于棕色瓶于4℃冰箱保存。
（2）酶、抗血清等生物制品具有生物活性，應該注意其有效期，過期則舍棄不用。按說明要求進行診斷血清的使用和保存，一般要求置于4℃冰箱貯存。在操作過程中要盡快取用，暴露室溫過久則易造成其失效。操作前，尤其要注意這些生物制品的有效期和效價。一般第一次使用時，須用相應的標準菌株檢查抗血清的有效性，常規工作中每月對其進行檢測1次。如出現任何顏色的改變或混濁，即不能使用。
4 實驗室環境控制
實驗室的環境影響檢測結果的準確性。因此實驗室應當在室內光線，空氣流通，設施布局等方面應符合要求，不能對檢測結果的可靠性、有效性和準確性造成干擾，同時還要起到對工作人員的自身安全和儀器一定的保護作用。微生物檢驗應在潔凈區（包括超凈工作臺或潔凈實驗室）進行，潔凈區應有明顯標示。無菌室潔凈程度要達到標準要求，每次使用前需要紫外線燈消毒45min以上，根據標準規定的檢驗方法，定期對紫外線空氣消毒效果進行測定。微生物實驗室的空氣質量、溫濕度要每天進行監測，并做好記錄，以確保檢測結果的可靠性、有效性和準確性。
參考文獻
[1]張紅梅.衛生微生物檢驗的質量管理[J].實用預防醫學，2007，4（2）：584.
[2]陳天壽.微生物培養基的制造與應用.北京：中國農業出版社，1995.8～1431.
【中圖分類號】R9【文獻標識碼】B【文章編號】1671-8801（2012）12-0143-01
在微生物檢驗的過程中，如何避免實驗過程中的可變因素對檢測結果的影響，評估檢測結果的準確性、比較結果和具體設定的目標之間的差距，保證結果的真實、可靠和可重復性，是質量控制的主要目的。
實驗室質量控制包含三部分內容，即室內質量控制、質量保證、室間質量控制。
1微生物實驗室室內質量控制
是根據本實驗室實際情況設計的質量控制系統，僅用于對本實驗室的工作進行質量監測和評價。包括對實驗人員、實驗步驟、儀器、設備、培養基、試劑、環境設施的監控。室內質量控制是檢驗結果精確可靠的核心和依據。
實驗人員及培訓：
1.1實驗人員。由于微生物學檢驗是一種復雜的實驗，從事微生物學檢驗的技術人員，必須經過嚴格的基礎訓練和教育，包括微生物學、基礎醫學等知識的學習以及專業化的實驗技能培訓，并通過專業技術考核，合格后才能持證上崗[1]。除此之外，特別需要培養的是檢驗人員高度的責任心和嚴謹求實的科學態度。
1.2專業指導資料?，F在是信息和科技飛速發展的時代，技術更新非?？?，要想把握檢驗技術發展的脈搏，跟上知識發展的步伐，除了掌握作業指導書的內容，還必須大量閱讀專業參考書，及時汲取新知識，更新方法。
1.3質控物的要求。
1.3.1標準菌（毒）株的來源。標準菌（毒）株必須來自權威機構或認可部門[2]，如我國的衛生部藥品生物制品鑒定所菌種保藏中心、美國菌種保藏中心（ATCC）、英國國家菌種保藏中心（NCTC）等。
1.3.2標準菌（毒）株的選擇。應根據每項試驗的性質的不同和對標準菌株的生物學性狀的要求，選擇作為質量控制的標準菌株。無論是定性試驗還是定量試驗，質量控制系統要有足夠的靈敏度檢測出試驗中出現的誤差，因此質量的監測點必須設在一個敏感的位置。這個敏感點，對定性試驗，應在較弱陽性的范圍內；對于定量試驗，則應位于解釋試驗結果的決定性水平附近。
1.3.3標準菌（毒）株的管理。每個微生物實驗室應建立健全嚴格的標準菌（毒）株的管理制度[3]，包括標準菌（毒）株的保管制度、請領制度、使用制度、銷毀制度等，并在文件中明確職責，嚴防標準（毒）菌株外泄。
1.4質量控制標準。
1.4.1培養基的質量控制標準。通常以細菌能否在培養基中生長良好或能否形成典型菌落來衡量?；A培養基要求細菌不僅能夠生長，還必須發育良好并能使細菌充分表現出其典型的特征。選擇培養基在原則上應使用預期最難生長的細菌菌種，并且應少量接種（如0.5McFarlang1∶10稀釋接種0.001ml）。要求被抑制的菌種不生長或生長較弱，被選擇生長的菌種生長良好。生化培養基，用作質量控制的菌種應包括該生化反應為陽性反應和陰性反應的細菌。
1.4.2試劑和染色液的質量控制標準。試劑和染色液必須注明配制或購入的日期；按試劑要求的貯存條件貯存并在有效期內使用；對穩定性較差的試劑，必須在試驗的同時進行陽性和陰性對照試驗。
1.4.3抗血清的質量控制標準?？寡宓膩碓幢仨毧煽?，并按制造商的使用說明使用與保存。在每次使用前應觀察是否澄清透明，任何混濁與顏色改變，應視為雜菌污染，不應使用。
1.5儀器監控。
1.5.1高壓滅菌器和干熱滅菌器。新購買的滅菌器必須進行滅菌性能檢測，以后定期（每月1次）檢測。大容量滅菌器還應在不同部位放置化學指示卡以全面評價滅菌性能。滅菌效果監控使用生物指示劑嗜熱脂肪芽孢桿菌ATCC7953、12980的培養液或菌片（含菌量為5×10 6/片）。
1.5.2培養箱、冰箱、水浴箱。在每日工作開始和結束時記錄溫度，定期檢定和校正溫度計，水浴箱需要定期加水，冰箱需定期除霜。
1.5.3二氧化碳培養箱。須每天檢查箱內的CO2含量，可用淋病奈瑟氏菌或腦膜炎奈瑟氏菌等CO2依賴細菌進行生長試驗。
1.5.4厭氧罐或厭氧箱。在罐中或厭氧箱內用美藍或刃天青作為指示劑，無氧時均無色。罐中的催化劑鈀顆粒須經常置160℃1.5h重新活化。
1.5.5生物安全柜。若需更換濾網，則須由專門技術人員進行，對紫外線必須每3個月檢查1次消毒性能。
1.6環境設施的監控。環境設施（無菌間、超凈工作臺或層流潔凈室）對衛生微生物檢驗的質量影響較大，應定期監測其無菌效果，以保證其符合樣品檢測所需的環境要求。
2微生物實驗室質量控制的保證
質量保證是實驗室報告的質量得到保證的全過程，是指為達到既定的質量水準所采取的一切必要措施。在質量控制項目中設計的步驟不能只限于實驗室的技術操作步驟，收集合適的樣本，采取正確的保存方式，在規定時間內送往實驗室等都將影響檢測的質量。
3微生物實驗室室間質量控制
是由實驗室以外的組織或機構對其已達到的質量水準進行的評價。通過室間質量評價可以考察實驗室檢驗結果的準確性，并檢查和評估不同實驗室操作的差異。
3.1盲點實驗?？己私M織者可不定期將標準菌株及模擬標本混合，送到受試實驗室，進行未知樣本的質量控制，可以比較準確地反映受控實驗室的實際水平和能力。
3.2實驗室室間質量考核的作用。是對實驗室檢測水平的中和判斷，發現實驗室內質控難以發現的偏差和系統誤差，有利于誤差的糾正和消除，既提高了檢驗人員的操作水平，也增強了檢驗人員分析和解決問題的能力，是實驗室質量保證的重要工具。
4討論
疾病預防控制中心微生物實驗室應參與室內全面質量控制，并根據自身的特點設置質控物，對實驗過程中影響檢測質量的關鍵環節進行控制和監督，以發現誤差并及時改進，確保檢測結果的精確性。此外，實驗室還應定期參加實驗室間的考核和能力驗證活動，并了解本實驗室在本地區或全國實驗室中的技術地位，有利于實驗室技術水平的提高。因此一個常規實驗室，應該盡可能參加范圍更加廣泛的室間質量控制評定活動。疾病預防控制中心微生物實驗室的室間質量控制評價，還應增加對各參加考核的實驗室進行常規性的檢查，如質量控制的各種制度制定情況、執行情況，以及未知標本的盲點質量控制等內容，以使室間質量評價工作更加科學和規范。
參考文獻
伴隨社會經濟的快速發展，現代醫療技術得到顯著提高，院內感染監測成為醫學發展的重要內容。在院內領導的高度關心和重視下，院內感染監控工作從組織落實到制定嚴格管理制度，采取的措施具有多樣化，在臨床中展開必要的監測，從而使院內感染監測工作逐漸走向科學化、制度化、規范化。醫院是病患最集中的場所，各種各樣的病患每天都聚集到醫院等待治療，因此，院內環境極易受到病原微生物的感染，我院為此成立感染監測科和微生物檢測實驗室，以便適應全國各級醫院對院內感染防控與監測工作的需求。文章對在院內感染監測中微生物實驗室設立的重要性進行分析、探討，報道如下。
1按照有關規定配合院內感染監測科做好感染預防與監控工作
微生物實驗室在臨床檢驗中最主要的工作就是對引發院內感染的病原菌類型進行確定。按照《消毒管理條例》、《醫院感染管理辦法》和其它預防院內感染的實施策略，建立抗菌藥物合理使用條例，細菌檢測制度等。對各科室感染條例執行情況進行監督，和被監測科中的醫護人員定期進行討論、交流，按照監測具體數據向各監測科提出科學意見。微生物檢驗實驗室委派專業人員配合院內感染檢測工作，同時定期參加國家級院內感染培訓，和院內感染科一起監督相關條款，并將所有規定落到實處。
2監測方法與內容
2.1監測方法 在院內各病房及有關科室中都配備一名專業感染監測控制人員，每月定期進行一次檢查。同時在微生物檢驗實驗室中展開細菌監測工作，對院內消毒不合格的內容徹底清查，找到消毒不合格原因和存在的問題，不僅能防止類似事件再次出現，同時還能為院內感染監控提供可靠數據。倘若消毒不合要求，應立即重新消毒，一切合格后才能繼續使用，防止院內產生交叉感染。提高重點科室環境與日常用品的感染監測工作，包括：胃鏡科、口腔科、供應室、產房、檢驗科、外科等，以便傳染源的及早發現。按照微生物檢驗實驗室的監測結果，定期向院內感染科總結、匯報，通過分析感染病原菌，確定下一步工作重點，為今后工作制定合理計劃。
2.2監測內容 微生物檢驗實驗室的監測內容主要有以下幾點：①環境監測，包括：醫護人員的手、空氣、高壓滅菌裝置、物品表面、醫療器械等物品的細菌量，避免醫療物品、醫療器械和醫護人員的手被病原菌污染后，傳染給病患；②提高一次性醫療用品的監測管理力度，對其質量嚴格把控；加強重點科室致病菌的監測，包括：金色葡萄球菌、沙門菌屬、化膿菌等；③一旦發現細菌異?；蚴钱a生流行趨勢，應向有關科室及時通報，并向院內感染監測科匯報，采取相應措施，阻斷病原菌傳播途徑，做好預防控制工作，保護易感染人群，努力為病患建立良好醫療環境，同時提升醫護質量；④減少院內感染發病率，使用有效措施保護病患、醫護人員以及社會民眾的健康。
3提高病原菌耐藥性的監測
在微生物檢驗實驗室中鑒定分離病原菌對抗感染治療與細菌耐藥性監測具有重要意義，所以，要將質量保證制度完善，應提高與臨床治療之間的配合。在使用美國臨床檢測試驗（NCCLS）標準對藥物敏感實驗進行規范，藥物敏感實驗中使用的抗生素一定要實用、科學、經濟、合理，提高微生物檢驗實驗室在院內感染監測工作中的職能，正確評價并解讀實驗結果，及時公布院內病原菌的耐藥性，為抗生素的臨床使用提供科學依據。
4將細菌耐藥性的檢測結果定期在院內公布，同時對細菌耐藥性實施網絡管理
熟練掌握美國臨床檢測試驗（NCCLS）標準，這是判斷抗菌藥物敏感實驗結果可靠性與準確性的重要內容?，F階段，選取治療感染性疾病的抗菌藥物在大多數情況下，醫生是按照經驗選擇的，但是經驗選藥也需要流行病資料和循征醫學的支持，將細菌耐藥性的監測結果定期在院內公開，統計并分析重癥監護病房等重要科室中常見病原菌的耐藥與分布情況，對經驗選取抗生素、提升重癥感染性疾病救治成功率幫助很大。分區域并長時間建立耐藥監測網，經過研究分析，很容易得出本區域耐藥病菌發展趨勢和抗生藥物的耐藥性，有助于制定本區域抗生素藥物的使用，同時對經驗用藥具有十分重要的意義。
5結論
目前，我國臨床治療中微生物檢驗實驗室的建立和國際先進水平相比依然存在很大差距，和我國院內病原菌以及感染性疾病的耐藥性存在嚴重不相適應的現狀；并且，臨床治療有關部門以及檢驗科有關人員對微生物檢驗實驗室的日常運作、軟件與硬件建設缺少重視度。在各種不利條件下，微生物檢驗實驗室應積極幫助臨床做好院內感染性疾病的治療與診斷工作，并將其當作最主要目標執行。這樣微生物檢驗實驗室才能更好的發展，為院內感染性疾病的監測、預防、治療、控制做出更多貢獻。
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【關鍵詞】：食品微生物檢測質量控制
隨著人們生活水平的不斷提高，食品安全問題逐漸引起各國政府、公眾的重視。尤其近年來，隨著瘦肉精、三聚氰胺、毒膠囊、皮革奶等食品安全事件不斷曝光1，食品安全問題更成為社會各層面關注的焦點。食品安全問題中，微生物污染造成的食源性疾病仍是世界食品安全中最突出的問題2。微生物指標不僅可用于對終產品的衛生監督管理，而且也是食品生產、運輸和銷售等全過程衛生質量控制的監測手段3。為了提高食品的衛生質量，保證消費者飲食安全，食品微生物檢驗的方法由傳統的形態結構、血清試管凝聚試驗等逐漸發展到近年來的分子水平檢驗，并向儀器化、自動化、標準化方向發展4。但由于影響食品微生物檢測結果的因素復雜多樣，所以對食品微生物檢驗的各個環節加以合理有效的質量控制，是提高食品微生物檢驗結果，保證食品安全的有效措施。
一、 樣品采集與處理
1、 采樣
食品微生物檢驗中，樣品的采集必須具有代表性。ICMSF制定的食品微生物學分析采樣方法5，目前已在國內外被逐步推廣采用。應嚴格遵循統計學方法，根據具體情況制定相應的抽樣方案。一般應采取完整未開封的樣品，如是散裝樣品，采樣必須在無菌操作下進行。采樣的用具，應預先經滅菌處理。樣品的數量應滿足檢驗、復驗、備查的需要。每個樣品要注明其詳細信息。
2、 送樣
有質量保證的樣品是獲得正確檢驗結果的基礎。樣品應盡快送到食品微生物檢驗室（
3、 收樣和處理
樣品送達實驗室后，先判定樣品是否已經變質和是否滿足檢驗標準。瓶裝檢樣處理時可用點燃的乙醇棉球燒灼瓶口滅菌，用石碳酸紗布蓋好，再用滅菌開瓶器將蓋啟開。袋裝樣品應用75%乙醇棉球消毒袋口后進行檢驗。固態樣品用均質器以無菌操作方法處理樣品，調節均質器均質時間處理不同種類的樣品。微生物培養時要準確記錄溫度、氣體濃度等參數，使其嚴格符合檢驗程序要求6。原始記錄應及時記載，原始記錄格式要求有足夠的信息量，并具有可朔源性。
二、 實驗人員素質與能力
實驗人員的素質與能力影響到最終的檢驗結果。食品微生物學檢驗人員應：有合法的上崗資質；具有多方面的專業技術知識7；掌握微生物學的有關基礎知識；掌握并正確理解國家食品衛生微生物檢驗方法、食品的國家標準、行業標準及本企業的企業標準，熟悉標準化法的相關知識；熟悉計量學的基本知識、計量法令和法規及質量保證體系知識；熟悉食品的生產工藝；及時主動更新自己的知識。
三、 食品微生物檢驗過程
1、 檢驗方法
食品微生物檢驗必須依據現行有效的國家標準、行業標準及衛生行政部門頒布的檢驗方法進行8。對于檢驗標準的變化，一般都有約定成俗的經驗性規定。但是如何控制實際工作中“靈活性”不至于變成“非法性”，需要檢驗人員自主識別。
2、 檢驗環境
微生物檢驗室是進行食品微生物學檢驗的地方，應單獨設置，操作區與辦公區應分開，避免室間污染和實驗室感染發生。無菌室要設有套間或緩沖間，最好設有推拉門，以防止空氣振動蕩。經過培養后的培養物，經無害化處理后方可排放、洗刷。對染菌物品及廢物，應經過消毒滅菌后才可清洗或廢棄，防止污染環境8。
3、 儀器和設備
微生物檢驗室應配備充足的檢驗工作需要的儀器、設備和器材。儀器設備計量器具使用前應經計量鑒定部門鑒定合格后方可使用；儀器設備量具的量程、精確度等，要符合檢測項目的相應要求；嚴格按操作規程要求使用，并做好運行檢查及儀器維護。
4、 培養基和試劑
購置培養基和試劑時要求供應商提品質控證書。培養基和試劑使用前首先通過外觀、批號、PH值、滅菌要求、選擇性等進行初步評估，還要用陽性對照菌株做質控。按照培養基和試劑標簽說明的貯藏條件保存。不同批號的培養基和試劑不要混合使用。受潮變質的干粉培養基堅決不能使用。自配的培養基要嚴格按照配制標準進行配制和保存，保存培養基配制記錄。
5、 確證試驗
做平行樣，保證結果的可比性；設立空白對照，防止其它污染而導致的結果不準確；設計適當的質控頻率，進行質控試驗。將質控菌株與常規工作一起進行，不能為質控菌株設計單獨操作程序，更不能專人專做。當質控標準菌株的內在敏感性發生改變時要更換新的菌種。
6、 檢驗報告
檢測報告應準確、清晰、明確、客觀地反應檢驗結果，可以運用統計學知識對誤差進行處理，并參照一定的標準對食品微生物的數量和質量進行系統性的評價。檢驗報告需經有資格的審核人員核查簽字，并加蓋印章后生效。
四、 參加盲樣考核
積極參加上級業務部門下發的盲樣考核，即進行實驗室間比對和中心質量管理辦公室組織的人員比對驗證實驗。
總之，隨著社會的發展和科技進步，食品微生物檢驗技術正向高效率、高標準、高精度和高靈敏度的方向發展，特別是近年來興起的基因芯片技術及自動微生物檢測系統。與此同時，更加嚴格的質量控制方法必須伴隨檢測技術的發展而發展，從而得出盡可能準確的檢測結果，更好的為人類公共衛生、食品安全、營養健康與疾病預防等做出貢獻。
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在全國范圍內普遍存在的造成醫院感染的因素主要包括：第一，醫院抗生素的不合理使用，抗生素的使用劑量、方法、時間等都達不到標準要求，長期這樣下去，藥量不足，血藥濃度過低，雖然可以抑制體內病原菌的生長，但對于原本就存在于身體內的病原菌根本就不能徹底的將其清除。隨著時間的推移，體內的病原菌就會在人體內生長繁殖。第二，慢性消耗性疾病和癌癥病人，由于自身免疫力低下，人體的某些部位的正常菌群就有可能導致病人自身感染。第三，在醫院內很多儀器和內窺鏡的使用，消毒不嚴格也有可能導致醫院感染，增加醫院感染的機會。第四，血液透析時透析液不合格，消毒液的濃度控制不合格等這些情況都會導致醫院感染。為此微生物實驗室在醫院感染控制中的重要性主要體現在：
一、正確鑒定醫院感染中所涉及的微生物
微生物實驗室對于醫院感染控制起到了不可忽視的作用。其中最重要的一個作用：正確鑒定醫院感染中所涉及的微生物。引起醫院感染的微生物有以下幾個特點：條件致病菌；耐藥性；某些微生物能夠在體外生長繁殖。為了能夠很好的控制醫院感染，就需要微生物實驗室能夠不斷掌握更多的微生物理論知識和技術鑒定水平，正確的分離和鑒定在醫院感染中所涉及的微生物，爭取在分離過程中做到標準化，力求做到鑒定分型準確。微生物實驗室在控制醫院感染中要定時采集醫院環境標本，如病房空氣、醫療器械、消毒液、工作臺面、手術室空氣、處置室空氣等，在采集病人標本時要盡量在抗生素使用前，采集后立即送檢，不同標本的處理得當，這樣才能提高陽性檢出率，對于醫院感染起到了很好的控制作用。
二、促進安全、和諧醫院的構成
構建安全和諧醫院從根本上來說是在新形勢下保證醫院得到更穩定發展的重要前提。在對構建和諧醫院的推動作用中，必須加強微生物實驗室組織的建設力度，才能增強醫院的和諧程度。因為和諧醫院的構建離不開微生物實驗室的幫助和推動，只有微生物實驗室中的工作人員不斷的提高自己的專業水平，在工作中做好標本采集、細菌鑒定、病原菌質控等各項工作，才能從根本上控制醫院感染。另一方面，醫院的病原微生物實驗室同時也對醫護人員的良好醫德的形成起到了一定程度上的教育作用。要求醫護人員對待病人要持極端負責的態度和精益求精的精神。在工作中要自覺遵守醫院的各項有關規定和制度，要增強無菌觀念，在工作中端正自己的工作作風，堅持正確的立場。只有構建安全、和諧的醫院制度，才能在激烈的市場競爭中求得生存和穩定的發展，使醫院在社會上具有良好的名譽和聲譽，也才能從更大程度上推動醫院的不斷發展。
三、定期的反饋實驗室資料，加強對醫院感染控制的管理
醫院微生物實驗室除了能夠正確的鑒定病原菌，促進安全、和諧醫院的構成，還定期的反饋微生物實驗室資料，在一定程度上加強了醫院的感染控制管理。臨床微生物實驗室應該將實驗室在標本采集和病原菌分離、培養和鑒定的過程中所獲得的相關資料、信息等及時的送到醫院感染控制科，并加強與臨床科室間的聯系，通過這種信息之間的監測，改進醫務人員的無菌觀。并對醫院感染控制的各種危險因素采取及時有效的措施，預防醫院感染的發生。另一方面，醫院的臨床微生物實驗室在醫院控制感染管理工作中，起到了一定的加強管理的作用。因為在工作中不可否認的是有的微生物實驗室人員，輕視醫院各項規章制度，做事不負責；管理和檢查工作開展的不徹底，未能及時的發現潛在的安全隱患并及時將其消滅在萌芽中。加上種種方面的原因，一直是醫院控制感染管理工作的一大障礙。因此，醫院的微生物實驗室對于規范職能，加強醫院感染控制各部門的嚴格劃分，促使醫護人員在自己的義務和權利范圍內做好本職工作和行使職權方面起到一定的控制作用。對醫院各種感染的危險因素加強管理，促使全院醫護人員都參與到醫院感染控制的工作中來，定期召開醫院各科室主任、護士長會議，對醫院每個階段的感染控制工作的開展情況進行通報，使臨床科室在醫院感染控制工作中都能做到有的放矢。
綜上所述，醫院的臨床微生物實驗室在醫院中不僅能夠分離、培養和鑒定院內的病原菌，同時還對促進安全、和諧醫院的構成，定期的反饋實驗室資料，加強對醫院感染控制的管理等工作起到了一定的推動作用。醫院感染控制是一項長期、循序漸進、不容忽視的工作，微生物實驗室人員必須不斷提高自己的技術水平和理論素質，推動醫院的感染控制工作走向。
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中圖分類號：G48 文獻標識碼：A
Suggestions of Food Microbiology Laboratory Practice Management
FAN Jinshan， LI Jing， CAO Qingguo
（Jiangsu Polytechnic College of Agriculture and Forestry， Jurong， Jiangsu 212400）
Abstract Food microbiological testing of hygiene and safety in the protection of food particularly had a prominent role， so food microbiology laboratory management must also be standardized. From the aspects of management requirements and quality control of food microbiology laboratory， this paper elaborated several standardized management recommendations for the future of scientific management.
Key words food； food microbiology； management
在飛速發展的二十一世紀，隨著人們生活水平的提高，人們對食品已不再是僅僅滿足于飽腹，而是越來越多的強調食品的營養與衛生，因此，食品衛生安全受到了越來越多的關注，其中食品微生物檢測就是食品安全中一項必不可少的技術項目，是保證食品安全衛生的重要手段，其中食品微生物檢測指標主要包括菌落總數、大腸桿菌、致病菌、霉菌和酵母菌這五項。近年來，我國衛生部每年接到食物中毒事件的報告在兩百起左右，其中大部分是由于致病菌引起的，因此食品微生物的危害是食品質量安全的主要問題。另外，由于微生物所具有的生物學特征，食品很容易遭到微生物的污染，在很多食品加工環節中都很難控制，因此食品微生物實驗室的規范化管理尤為重要。本文就食品微生物實驗室的規范化管理談談以下幾個方面的建議。
1 食品微生物實驗室的管理要求
1.1 食品微生物工作人員的要求
工作人員應具有一定資質的微生物學知識或相近專業的知識，能勝任工作所必需的設備操作和微生物檢測技能（如無菌操作、菌落技術等），定期進行實驗室生物安全等方面的培訓，進行相關繼續教育計劃（如網絡視頻培訓）。
在操作之前，工作人員必須嚴格進行自身微生物的清潔，防止污染無菌室，這就要求工作人員必須穿無菌工作服，戴帽子、口罩，同時做好手部消毒，禁止吸煙。在操作過程中，注意不要人員過多，保持一定的關注度，這樣才能保證實驗的準確度和精確度。
1.2 食品微生物實驗室的衛生要求
實驗室定期清掃制度，按照內容分工、區域包干的形式進行衛生大掃除，每天一小掃、一周一大掃，并定期做衛生大檢查。有專人進行帶有致病微生物的消毒滅菌工作，對實驗中廢棄的培養基和器具要進行嚴格高壓蒸汽滅菌鍋，做好清洗工作，同時做好相應的記錄，最后做好相應工作總結，相關領導做好定期檢驗，驗收各項管理進程和執行情況。
食品微生物實驗室應建立微生物實驗室的滅蠅、除蟑螂和其他害蟲的防治計劃，室內安裝滅蠅燈和紫外燈等，防止因有害昆蟲而引起實驗室內細菌、病毒向外傳播的可能性。①
1.3 食品微生物實驗室的儀器管理要求
食品微生物實驗室的設備應配有溫控設施（如培養箱、冰箱等）、測量器具（如電子天平、菌落計數器等）、定容設備（如移液管、微量移液器等）、滅菌設施（如高壓蒸汽滅菌鍋、超凈工作臺等）、其他設備（如顯微鏡、離心機等）。設備的操作使用方法應明確掛墻，便于學習使用。設備應定期檢驗其運行參數，應達到規定的性能參數，并符合相關檢查指標。設備一旦出現故障不能正常使用，應立即停止使用，并立即聯系廠家維修。
所有設備都應做好設備信息登記（如設備名稱、購置時間、型號、制作廠商等）、使用情況登記表，這樣能實時監測設備的運行情況，做好設備維護工作。對于一些儀器設備在操作上有一些特殊注意的地方，可以注明相應的注意事項，便于操作和儀器的維護，如超凈工作臺旁邊溫馨提示“操作時請關閉紫外燈！”在顯微鏡上貼有“使用完油鏡注意清潔我哦！”另外設備在操作過程中應有受過培訓的工作人員在場作相應指導，以防出現故障和意外。對一些特殊的設備要做好定期檢查，比如高壓蒸汽滅菌鍋必須定期進行安全測試，超凈工作臺必須定期進行紫外線強度測試。
1.4 食品微生物實驗室管理人員的要求
管理人員作為食品微生物實驗室管理者，除了應該具備工作人員應有的素質外，還應有一定的管理能力，包括實驗室的日常使用管理、實驗室設備使用指導和定期維護、統籌食品微生物的檢測工作安排、對突發事件的處理能力等。
另外，管理人員應定期做好工作人員的相關培訓，同時做好技術更新，提高那些有關食品微生物檢測的前言技術的關注度。管理人員和工作人員只有定期做好自身知識儲備工作，提高能力、經驗等綜合素質，做好繼續受教育計劃，建立良好的“技術支持體系”，這樣才能科學、規范地做好食品微生物的管理工作，完善實驗室的工作。
2 食品微生物實驗室的質量控制
一套科學、嚴格的質量管理體系是決定實食品微生物驗室檢測結果是否準確和精確的重要因素。除了有常見的“實驗室安全制度”、“學生行為規范守則”，還必須有明確的“工作人員操作守則”、“管理人員管理守則”等。實現質量管理的方針目標，有效地開展各項質量管理活動，必須建立相應的管理體系。
第一，微生物檢測室必需單獨設立，避免污染，同時要按工作流程配有準備室、消毒室、緩沖室、無菌室、培養室、檢測室等；第二，所有涉及到食品微生物檢測的設備必須嚴格CIP體系進行徹底，器具也要用新潔爾滅等化學消毒液進行消毒；第三，無菌室作為檢測工作的關鍵環節，必需做好衛生工作，保證無衛生死角、清潔干燥、通風良好，安裝紫外燈及空氣過濾設備等；第四，進行微生物檢測的工作人員必需通過相應的專業技能培訓取得合法的上崗資質外，同時嚴格按照GB/T4789-2003進行微生物的檢測工作，熟悉標準化法的相關知識；第五，在實驗中所使用的試劑、培養基必需嚴格按照微生物檢測操作規程進行配置，有利于食品微生物檢測的規范化；②第六，做好菌種保藏工作，保管人員要求做到細心、嚴格、科學的保管，每種菌種要單獨保存以防交叉污染，特定的菌種要特定保存，同時做好相應的使用記錄、保存信息記錄，定期進行菌種篩選、保養。
3 總結
隨著中國在入WTO以后，國際食品貿易交流越發頻繁，對食品衛生安全的要求越來嚴格，進、出口食品的衛生除了要求出口食品符合我國相關標準和規定，接受國家相關進出口商品檢驗部門監督和檢驗外，還必須符合進口國家對進口食品的標準，其中對食品微生物的檢測也越來越苛刻，因此，如何進行食品微生物實驗室的規范化管理是一件尤為重要的課題。目前，國家也出臺了相關條例，在一定程度上改變了目前微生物實驗室管理方面的問題，實驗室的未來正朝著標準化、法制化、實用性和安全性軌道發展前行。在現代社會，食品安全問題受到廣泛關注，而微生物檢測的重要性尤為突出，所以對于其科學管理的水平是未來食品微生物實驗室管理人員的重中之重。
我們對常用的儀器設備制定相關的作業指導書和檢定校準計劃，特別重視對新購儀器和那些容易漂移儀器的檢定。制定儀器/設備清單，指定專人保管，每臺儀器設備上均須貼有明顯標識，其中資產標識包括編號、名稱、型號、生產廠家；狀態標識：儀器設備分別以送檢、送校、自檢、自校表示其所檢定的狀態。校驗合格則貼有綠色合格證（計量編號、校驗日期和下次校驗日期），凡校驗不合格、過期、需報修的設備儀器應貼有紅色停用證。為了保證正確使用各類儀器，做好使用和維修、保養記錄。維修后的設備/儀器重新檢定并校準證明其功能指標已恢復，做好完整的檢查記錄，方可使用。
為了做好常用儀器設備的質量控制工作，我們把實驗室內使用頻率高且需要監控的儀器設備初步分為三類：（一）培養箱（普通培養箱或CO2培養箱等）、干燥箱、高壓滅菌鍋、凈化工作臺、pH計、 冰箱，（低溫冰箱或冷柜）溫度計、紫外燈、顯微鏡、離心機、天平）；（二）小計量容器；（三）微生物測定儀器、微生物鑒定儀器、空氣采樣器、酶標儀等。
1 溫度計 實驗室必須要有工作溫度計和參照溫度計，分別做好標識。工作溫度計用于日常溫度檢查；參照溫度計用于校正工作溫度計。定期檢查溫度計的運行情況，一般半年一次。對溫度計日常檢查、校準檢查和運行檢查，都應做好相應的技術記錄。
2 培養箱 根據培養物性質及溫度要求，培養箱應分別設置（以用途和溫度分）。培養箱的溫差要求，一般顯示值與實測值相差不大于±1℃，箱體內各點溫差（內部的溫度均衡性）以及溫度波動同樣不大于±1℃。溫度監控方法：可將工作溫度計置甘油中，放入待測箱體內，觀察工作溫度計的溫度，最好每天監控1-2次，并做好記錄。
3 高壓滅菌鍋 實驗室常用生物指示菌法、化學變色紙片及高壓滅菌鍋溫度計等方法對其滅菌效果進行監測。高壓滅菌鍋要由專人按作業指導書操作，并做好每一次的使用記錄。日常工作記錄應包含以下信息：高壓滅菌的材料、開始時間、壓力/溫度、取出時間、高壓滅菌膠帶的顏色變化。在使用高壓滅菌鍋時，鍋內放置物品不宜過多，而且單位體積內的內容物（每瓶內的培養基）不能太多。同時應注意內容物不同耐受溫度。高壓后物品總的暴露時間最好不要超過45min。高壓滅菌鍋校準周期一般在半年。
4 干燥滅菌箱 日常工作記錄中應包括以下信息：開始的時間、到達滅菌溫度時的時間、取出的時間（或關閉時間）。干燥滅菌箱的溫度校準；用參考溫度計進行溫度測試，溫度要求與精確度：160±5 ℃或180 ±5 ℃。前者為滅菌2h，后者為30min。干燥滅菌箱校準時間一般為一年。
5 天平 要求放置在無振動、無氣流影響的水平臺面上，每次使用做好檢查記錄。天平作為計量儀器是列入國家強制檢定范圍的，一般1次/年進行檢定。運行檢查頻率按運行計劃或按產品（天平生產廠家）給出的標準重量單位進行對照。
6 pH計 使用前應用標準液進行校準。緩沖液使用有效期：PH4.00 有效期約1年； PH7.00 有效期約6個月；pH9.00 有效期約6個月。pH計要定期維護，電極外表要定期清洗，同時對電極敏感性進行檢測及極性恢復。
7 超凈工作臺 要求潔凈度為100級，空氣沉降30min，細菌數＜1個/皿。垂直流凈化工作臺，細菌數＜0.49個/皿.。凈化工作臺運行檢查頻次應每月一次，主要是細菌沉降檢測。凈化工作臺高效過濾膜一般為一年更換一次，并同時進行粒子與細菌沉降檢測。
8 紫外燈 檢測方法包括儀器測試法和生物測試法。前者是通過專用儀器檢測紫外燈管發射的紫外光強度。國家消毒技術規范中規定在距離照射1米處，要求強度為90。生物測試法就是采用一定的細菌培養物，經一定比例稀釋，菌量控制在200-250個/0.5ml，涂布平板在紫外燈光下照射2min，同時設置普通光源的對照組，后置37℃培養48h，計算其殺滅率。要求殺滅率達99%。
9 酶標讀數儀、洗板機 每天：核對濾光片波長，檢查洗板機管道是否通暢，是否有漏液現象；每周：清潔儀器表面，保護光學零件不沾灰塵；每月：檢查洗滌時各孔是否與相應的沖洗頭對位良好，負壓是否符合規定要求；每年：檢查、清洗濾光片，如果出現破裂或霉點則要更換。根據儀器內具有的校準程序或使用校準板，對濾光片的精密度進行校準并保留記錄。實驗過程中發現異常情況，應隨時進行處理，可根據使用情況更換必要的部件。酶標儀工作中常用陽性對照檢測其功能的正常性。
10 移液器 定期（每年至少1次）校準，發現異常情況應隨時進行校準。 標定方法包括有色溶液光譜分析法、稱量校準法、同位素計數法以及使用配套校準盒等。 校準多道移液器時，必須保證每一個加樣頭都能夠連續、準確地加樣。移液器的精密度應在廠家說明書規定的范圍內。
11 冰箱和孵育箱 每天檢查和記錄冰箱溫度，每個工作日檢查記錄孵育箱溫度，并做好記錄，使用經過計量部門校準合格的溫度計測量冰箱和孵育箱的實際溫度；根據不同規格冰箱和凍存樣品性質對溫度要求不同，調節相應的溫度。放置要求4℃保存的試劑盒的冰箱溫度應在2～8℃；用于培養的孵育箱溫度誤差應小于1℃；用于冷凍核酸和抗原檢測的血漿、淋巴細胞和病毒上清適宜在-70℃冰箱，要求冰箱溫度低于-65℃。
以上十一種儀器是我們日常工作中使用頻率較高的，對這些儀器設備的使用和管理我們積累了一些經驗，日常工作中做好儀器的運行情況和使用記錄，以便及時發現問題。這樣就更能保證檢測過程的順利進行，最終保證我們的檢測結果更科學更準確。
參考文獻
［1］ 中國實驗室國家認可委員會．實驗室認可與管理基礎基礎知識［M］．北京：中國計量出版社，2003
［2］ 國家認證認可監督管理委員會．實驗室資質認定工作指南［M］．北京：中國計量出版社，2007
中圖分類號：G642 文獻標識碼：A 文章編號：1673-9795（2013）05（a）-0119-01
微生物學本身的特性決定了它很強的實驗性，而微生物實驗也就順理成章的成為微生物學不可或缺的重要組成部分。微生物學實驗作為生物的基礎實驗課，其實驗的理論和方法對現代生物科學的每個領域都有著重要的影響。特別是對于現代生命科學、食品科學和環境科學等都有極其重要的影響。因此，要想學生對生命科學基礎知識以及生命科學的發展動態有個系統的理解，就必須做好微生物學的研究教學工作。微生物學的教學關鍵還是實驗研究，然而一個實驗室的設備先進與否，更是作為評定高?？蒲兴降闹匾w現。作為高等本科院校，高效的實驗室管理以及合理的實驗教學改革對學生創新能力的發展尤為重要。筆者就多年的教學經驗以及近些年我校對于微生物學實驗教學的改革，和對實驗室的管理做出如下總結。
1 增強實驗室管理力度，提升教學質量
我們都知道合理的管理章程可為提升教學成果，培養和提升學生自主動手及創新能力奠定良好的基礎。但是實驗室的所有程序是一個完整系統，必須從細節做起，才能達到服務于教學、有利于學生學習目的。
1.1 強化實驗室管理，更新健全各項管理制度
有條不紊的實驗室管理制度，才能創造安全有序的實驗環境，從而是實驗正常進行。具體實施如下：安排特定人員管理實驗室，且制定除院辦公室有備用鑰匙外，和實驗管理人員配帶1把，其他人一律不得攜帶，從而確保了實驗室的設備安全。水災、火災的防控是實驗室管理的基本。高校微生物實驗室也建有“實驗室安全制度”和“實驗人員職責”等制度。便捷的常規管理不但縮減了工作量，而且還降低了工作難度，使效率在逐步提升中。我們要求學生使用試劑后及時放回原處，便于本組同學或下組同學使用。避免了學生使用后隨處亂放、不能及時清理的壞習慣，使得每次實驗都能夠井然有序的進行。這樣不但確保實驗能毫無差錯地開展，而且加大了實驗室管理的安全性。
1.2 加強儀器管理，確保實驗正常進行
顯微鏡無疑是最常用的實驗儀器，如果管理不當會大大影響實驗的進程。因此，在使用前要向學生多次強調務必要安全使用，其他儀器的使用也會同樣強調，效果非常明顯。為了便于檢修，我們將所有的實驗儀器都進行了編號，并將各儀器配有使用登記本，要求使用者在使用后及時登記使用情況。然后將其掛在有相應編號的顯微鏡上，并將顯微鏡放入相應編號的儲藏柜中，這樣整個實驗室顯得特別整潔有序。學期結束前，我們對所有的顯微鏡實施徹底查看，將需要修理的進行統計，然后將結果提交到秘書辦公室，使其能夠即時得到修理，確保下學期實驗時顯微鏡能夠正常使用。
2 強化實驗教學改革，適應形勢發展需要
2.1 建立完善的考核制度
以往的生物教學實驗檢測過于看重實驗報告上的最后結果，卻疏忽了在整個過程中培養學生們的實地動手能力。這種實驗導致學生們覺得只要在最后填寫的結論是對的就可以，根本不必實際操作，這種實驗不僅失去的本身的意義，還大大地扼殺了學生參加實驗的興趣。我們該如何應對這種情況？為此我們對實驗核制度做了修改，將考核內容更改為從熟記實驗報告―― 具體操作―― 真實做出實驗報告。通過此次實驗制度的完善相信大幅度提高了學生的實驗積極性。
2.2 加強課堂整體連貫性
生物實驗課是在每學年的第一學期開課，為了使每個實驗達到預期效果。在基礎技能培訓中，我們將實驗步驟按順序分為：基礎實驗、微生物的形態觀察實驗、微生物數量的鑒定、細胞大小鑒定和微生物生理生化指標的測定。培養基的制備及高壓滅菌實驗，該實驗中制備的大量培養基可以供后續實驗使用。通過整個過程，器皿和儀器的使用方法將深入學生大腦，以及是學生對實驗基本理論得到進一步的了解，可在原理上更進一步理解每一步驟的含義，在操作上不斷領會每個細節的注意事項，這樣熟練整個操作過程，養成較好的實驗操作習性，為以后的深入研究墊下結實的基礎。
2.3 讓學生自主實施實驗
為了鍛煉學生實驗的基本功，強化學生實驗動手能力，需要對《微生物學》課程實驗進行優化。驗證性實驗，學生只能學到很多底層的操作技能，卻無法將所學內容與實踐相聯系起來。讓學生領悟課堂上所學的實驗技能，去進一步制定出新的方案，將不同的實驗技能做到綜合運用。這不光讓學生掌握了實驗理念，更鞏固了實驗技術，而且還提升了學生的積極自主操作技能。
傳統理念中，實驗前期準備都是由教師們進行，學生完全是被動學習知識，實驗課時他們只需要按照實驗步驟做下去即可。為了改變這一局面，學生都是自己著手準備實驗，自己動手的學生不但鞏固了實驗課所學內容，他們的自主動手能力也得到了大大的進步，明顯高于其他同學，保證了整節課的順利進行。學生參與準備不但減輕了實驗老師的準備工作量，還使學生親身體驗了準備實驗的煩瑣和辛苦，為他們以后做其它方面的實驗和畢業設計奠定了扎實的地基。
3 結語
總之，一節實驗課成功的進行和良好的實驗室管理是密不可分的。近幾年，通過我們堅持不懈地強化實驗室的管理與工作方法的改革，收效非常明顯。學生不但對微生物學這門看似枯燥無味的學科有了濃厚的學習興趣，而且進一步調動了教師們對微生物學理論教學和實驗教學的積極性。只要不斷強化自己，勇于創新，堅持將實驗理念和實踐相結合的原則，消除學生的散漫氣氛，實驗教學的質量必定還逐漸得到升級，教學改革也將推向縱深。
參考文獻
