時間:2023-04-01 10:32:12
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2小GIST的臨床診斷
目前,臨床上診斷小GIST的診斷手段主要包括胃鏡、結腸鏡及小腸鏡等纖維內鏡、膠囊內鏡、EUS、增強CT及氟代脫氧葡萄糖正電子發射斷層掃描(FDG-PET)等檢查。對于胃腸道黏膜下的小GIST,纖維內鏡及膠囊內鏡一般可以直視發現;但GIST多具有外生性壁外生長的特性,對于GIST壁外部位的大小難以界定,同時也難以區分GIST位于胃腸壁內亦或壁外壓迫所致。EUS可以在一定程度上彌補內鏡技術的不足,有助于明確包塊的形態特征,并進一步明確診斷[13]。然而,通過EUS或食管、胃、十二指腸鏡檢診斷GIST的準確性有待商榷[1]。對于懷疑小GIST的病人,行內鏡(條件允許應加行EUS檢查)聯合增強CT可以提高診斷準確率,對于早期診斷小GIST至關重要[7]。近年有報道,明確GIST的診斷須行超聲引導下細針穿刺[14]。但對于較易切除的小GIST,筆者不建議行穿刺活檢,因GIST質地柔軟易碎,活檢可能導致瘤體破裂,增加腫瘤細胞醫源性播散的風險。臨床上根據需要,可聯合形態學、免疫學(CD117和CD34)及基因學(KIT和PDGFRA)等多種檢查手段明確診斷?!吨改稀吠扑],對于最初懷疑為GIST的病人,應詳細詢問病史,同時根據需要,選擇適當的檢查,如增強CT(或聯合MRI)、內鏡(或聯合超聲內鏡)、FDG-PET、EUS以及生化檢測,如肝功能檢查(LFTs)、全血細胞計數等[1]。筆者建議,無論選擇何種檢查手段,均應以病人為中心,根據病人的臨床特征及個體化差異,選擇最恰當的檢查方式,以明確診斷,制定最佳的臨床對策。
3小GIST的良惡性及危險度評價
鑒定小GIST惡性潛能對指導制定臨床對策至關重要。臨床上針對小GIST常呈自限性生長、大多無臨床癥狀的特征,一般對策應為密切隨訪觀察。相比于胃,位于十二指腸和小腸的小GIST病人更易發生出血等臨床癥狀,此時須盡早干預治療。對于存在高危EUS特征的小GIST病人,其危險度較高,建議積極干預治療。Joensuu[15]對美國國立衛生研究院(NIH)危險度分級系統進行了修訂,目前,對于局限性GIST危險度評估包括腫瘤原發部位(非原發于胃的GIST較原發胃的GIST預后差)、腫瘤大小、核分裂像以及腫瘤是否發生破裂等。Miettinen等根據對1600多例GIST病人的隨訪結果得出結論,對于核分裂像<5個/50HPF的胃小間質瘤(直徑<2cm),可認為其是良性病變?!豆沧R》指出,對于任何部位的原發腫瘤,核分裂像≤5個/50HPF的小GIST(直徑≤2cm),危險度分級為極低,無術后復發風險,核分裂像為6個/50HPF~10個/50HPF的小GIST,危險度分級為中等;雖然核分裂像>5個/50HPF的小GIST病例較少,但臨床應視為可復發風險組,需定期隨訪觀察[10]。而發生腫瘤破裂的小GIST,無論核分裂像多少,危險度分級均為高級別,術后復發風險極高。此分級系統提示:雖然絕大多數小GIST(直徑≤2cm)生物學行為表現為惰性生長,不易進展,但是仍有少數小GIST具有惡性特征,危險度高,應給予足夠重視。然而,此分級系統具有一定的局限性,此系統僅適用于原發GIST切除術后病人進行預后及復發評估,是否需增加術后補充治療尚未評定;該分級系統亦無法用于術前評估GIST危險度。核分裂像的檢測需要離體的腫瘤標本,而多數小GIST可完整切除,《共識》不推薦對此類小GIST術前進行常規活檢或穿刺,且不適當的活檢會引起腫瘤破潰、出血及增加腫瘤播撒風險;其次,內鏡下活檢常常難以明確病理診斷,因為只有少數GIST累及黏膜時才能取到腫瘤組織,且偶可導致腫瘤嚴重出血及播散[10]?!豆沧R》增加《2010年版WHO消化道腫瘤分類》和《2013年版WHO軟組織腫瘤分類》的6類8級標準,并根據預后分組將GIST分為良性、惡性潛能未定和惡性三類,作為“NIH危險度分級修訂版”參考。
4小GIST的臨床對策
《指南》建議對于GIST病人可采取多學科專家組(MDT)診療模式[1]。對于未發生并發癥及腫瘤無轉移的早期病人,一般不推薦進行MDT診療模式;對于發生并發癥或腫瘤轉移的進展期病人,推薦進行MDT診療模式。筆者認為,對于病情較復雜、診斷不明、病期較晚或臨床醫師在選擇病人治療策略發生分歧時,應啟動MDT診療模式,根據GIST特點及病人個體化差異,選擇最佳的策略。
4.1隨訪觀察針對無臨床癥狀、無高危EUS特征的小GIST,臨床上一般采取密切隨訪觀察對策,但對于無高危EUS特征的小GIST,長期EUS隨訪發現,仍有部分病人術后復發[19]。對于小GIST病人,有學者建議隨訪采取EUS檢測或EUS聯合增強CT檢查的方案,隨訪頻率為至少每2年1次?!吨改稀芬幎?,對于直徑<2cm的胃小間質瘤,若不存在邊界不規整、囊腔、潰瘍、強回聲及性質不均勻等高危EUS特征,應每6~12個月復查EUS。筆者認為,對于風險極低的病例,可降低隨訪頻率;反之,風險增高,隨訪頻率隨之增高?!豆沧R》與《指南》意見基本一致,對于小GIST,若EUS證實存在不良因素,如邊緣不規則、潰瘍、強回聲和異質性,應考慮手術切除;否則,暫不手術,應每6~12個月復查EUS。
4.2小GIST的治療
4.2.1內鏡下治療絕大多數小GIST起源于固有肌層,多呈外生性壁外生長,與周圍組織邊界較難判斷,有時內鏡下觀察直徑較小的腫瘤,實際外生部分較大,內鏡下切除很難保證其切緣陰性,若切除過深過大又極易導致穿孔及出血,故行內鏡下根治性切除術困難較大[20]。有學者指出,對于微小GIST病人應采取謹慎態度,在考慮行內鏡切除治療之前,必須充分告知病人風險[7]?!豆沧R》指出,內鏡下操作發生出血、穿孔和腫瘤種植等并發癥的風險相對較高,不作為常規推薦[10]。目前關于內鏡治療后行EUS隨訪的策略仍存爭議,Sun等[21]報道,內鏡下治療聯合術后系統EUS隨訪,對于小GIST是一項既有效又安全的策略。筆者認為,對于經驗豐富的內鏡治療中心,在保證手術安全性及根治性的基礎上,可進行探索性嘗試與臨床試驗,但是治療后應制定系統的隨訪策略。
4.2.2外科治療目前尚缺乏循證醫學證據證實小GIST是否必須定期EUS隨訪,但有并發癥發生風險或有癥狀者建議考慮手術切除[22]?!吨改稀方ㄗh,對于有高危EUS特征(邊界不規整、囊腔、潰瘍、強回聲、性質不均勻)的小GIST病人應手術完整切除,術后3~5年內每3~6個月復查1次CT,之后每年復查1次;無高危EUS特征的病人每6~12個月復查1次EUS。《共識》指出,對于無癥狀的擬診胃小間質瘤,若存在高危EUS特征,應考慮切除。臨床醫生應根據病人的個體化差異,選擇最佳的外科治療方式。
4.2.2.1腹腔鏡手術治療隨著腹腔鏡技術的不斷推廣和應用,越來越多的外科醫師選擇腹腔鏡手術切除GIST,但目前GIST腹腔鏡下手術仍處于探索階段。有研究表明,腹腔鏡GIST切除術具有復發率低、住院時間短以及病死率低等優點?!吨改稀分赋觯睆剑?cm的胃間質瘤可行腹腔鏡手術切除。《共識》指出,腹腔鏡手術一般可用于胃間質瘤的治療,而其他部位GIST不推薦行腹腔鏡手術治療[10]。筆者認為,對于小GIST的腹腔鏡手術,目前暫不適合作為常規推薦,但是對于腹腔鏡手術經驗豐富的醫生,可根據部位和大小進行綜合評定,確保術中無腫瘤破裂及瘤細胞播散的前提下,選擇性地行腹腔鏡手術治療。
4.2.2.2傳統開放手術治療外科手術完整切除腫瘤仍是治愈小GIST的首選治療方式,但具體術式應根據腫瘤部位及生長方式決定。由于手術的根治性與否與疾病的預后密切相關,因此,《共識》推薦行GIST病灶的整塊完整切除[10]。手術切除應做到鏡下切緣陰性(R0切除),同時應避免腫瘤破裂及出血等,積極降低術中造成瘤細胞播散的風險,在保證手術安全性的基礎上,盡量保證腫瘤的根治性。多數胃小間質瘤可能伴隨終生或自行萎縮退化,并不需要積極地外科干預。當胃小間質瘤有高危EUS特征或其惡性危險度較高時,應對其進行局部切除?!豆沧R》建議,對于直腸小間質瘤,惡性程度較高,且腫瘤增大后保肛手術難度增加,傾向于早期手術切除[10]。對于小GIST,手術完整切除仍是主要手術方式。目前,尚無明確證據顯示小GIST病人術后是否需要輔助藥物治療,雖然核分裂像>5個/50HPF的小GIST病例較少,但臨床應視為可復發風險組,需定期隨訪觀察。
傳統中國醫學的系統決定著通過支隊提取有效成分的方法,通過治療的單一效果,對傳統中藥或者復方研究療效進行評估,無法得到其本身所具有的本質屬性。因此,傳統中國醫學的物理化學性質和生物活性,不單純需要單一的藥物與化合物,還需要進一步研究目標系統的反應規律之間的化學成分,以及人類的相關影響和協同的方法。在西方,研究中藥的方法常常是拆遷測試,即通過解剖麻雀來發現活性成分的明顯作用,但是卻無法反映中藥方劑在配伍方面的規則。因此,中國傳統醫學要想得到持續發展,不能僅僅局限在“全面”上,也不能單純停留在提取活性成分的水平、純化分離等層面,而是應該立足于中醫理論,與研究現代生物醫學的方法相結合,對于中國醫藥進行系統研究,以期建立起現代中醫學理論體系。
傳統中藥復方充分體現了中醫特有的整體觀念和辨證治療的整體理論,以君臣配伍理論為基礎,通過藥物的精選,全面調節平衡身體機能,發揮祛邪、標本兼治的功效。中國醫藥復方是傳統中國醫學的精華,傳統中藥的復合成分同人體之間呈現出復雜的非線性函數關系。中藥復方的作用機理和整體評估兼容性的特性,必須要全面準確把握復合效應的整體性,傳統中國醫學與人體這兩個復雜系統的相互作用,促成了一個更為先進系統的形成。傳統中國醫學理論只有在這一理念的指導下,與現代科學技術相結合,并發揮二者的相互作用,才能全面闡述中醫的理論、作用機理以及治療的物質基礎。
傳統中藥復方具有對于各種有效成分進行協調的作用,針對器官、治療目標、機體的生理和病理的不同,進行綜合調控,發揮中藥復方的綜合作用。因此,研究傳統中藥復方應該從整體上進行,從而構建中國復合藥品質量評價體系,這是很有必要的。因此,筆者基于化學基團理論,闡述復方中藥的物質基礎和分子作用機制,因為這樣能夠闡明兼容性的規則,有利于相應的中醫辨證研究的開展。
2假蜜環菌的子實體形態
假蜜環菌子實體棕褐色,叢生或單生于林內地表枯樁或根上。叢生者,每叢具子實體19~42個,叢質量18.39~42.15g。子實體株高5.3~13.2cm,平均8.9cm。株質量1.83~10.03g,平均4.11g。子實體由菌柄和菌蓋構成,菌蓋下為菌褶,無菌環和菌托,菌蓋中部表面具褐色鱗片(圖1A)。菌蓋肉質,菌肉白色,菌褶污白色,或淺褐色,長短不等,寬0.3~0.7cm,略延生于菌柄上。菌蓋直徑2.4~7.3cm,平均4.6cm。菌柄纖維質,柱狀,向下漸粗,中部松軟或中空。柄長6.3~1.5cm,粗0.4~0.9cm(圖1B~C)。孢子印白色(圖1D)。
3假蜜環菌的顯微形態特征
顯微觀察,菌蓋鱗片由黃褐色菌絲蜜集交織形成,菌絲具隔、具分枝,其細胞壁有明顯環狀內凸增厚現象。菌絲粗5.24~10.35μm,平均8.28μm(圖1E)。菌蓋菌肉菌絲無色透明,具隔、具分枝,無鎖狀聯合現象。菌絲粗絲不勻,相互交織呈網狀,菌絲直徑4.74~11.51μm,平均8.14μm(圖1F)。菌柄菌絲縱向緊密平行排列,菌絲亦無色透明,具隔、具分枝,無鎖狀聯合。菌絲粗6.87~11.76μm,平均9.37μm(圖1G)。顯微鏡觀測,菌褶厚383.07~499.54μm,平均449.33μm。菌褶中間為菌髓,兩側為子實層。菌髓菌絲行排列,無色透明,具隔、具分枝,無鎖狀聯合。菌髓菌絲8.49~16.84μm,平均11.91μm。子實層由擔子、幼擔子和擔孢子組成。子實層厚45.93~51.51μm,平均48.49μm(圖1H~I)。擔子及幼擔子呈棒狀,無色透明,頂端圓鈍,向下漸狹,端部具小梗4個,小梗長4.33~7.19μm,平均5.73μm。成熟擔子每小梗頂端具一枚擔孢子。擔子大小為(40.96~41.36)μm×(7.46~8.51)μm(圖1J)。擔孢子寬卵形,無色透明,光滑,內有油球或顆粒狀物,大小為(4.91~6.13)μm×(6.77~9.31)μm(圖1K)。
4假蜜環菌的培養特征
在供試的2種培養基上,假蜜環菌菌落的形態有明顯差異。在PSA培養基上,菌落為白色稀疏絨毛狀,氣生菌絲明顯,有些菌絲形成菌絲束(圖2A、E),菌絲生長速度平均為0.58mm•d-1,菌落在黑暗處發較弱熒光,菌落背面棕褐色,說明菌絲能產生棕褐素。PSA綜合培養基上,菌落為致密白色細絨毛狀,氣生菌絲不明顯,后期在菌落中部形成棕灰色菌皮(圖2B),菌絲生長速度平均為0.63mm•d-1,菌落在暗處發較強的熒光,菌落背面亦為棕褐色,菌絲可產生棕褐素(圖2C);顯微觀察,菌絲在2種培養基上也有一定差異。在PSA培養基條件下,氣生菌絲無色或棕色,多彎曲,具隔且多分枝,菌絲直徑2.73~4.30μm,平均3.68μm(圖2D)。基內菌絲呈無色透明節節狀,有隔、具分枝,菌絲直徑3.08~3.90μm,平均3.48μm(圖2F)。在PSA綜合培養基條件下,氣生菌絲無色透明,具隔、具分枝,菌絲直徑2.31~3.72μm,平均2.92μm(圖2G)?;鶅染z無色透明,隔膜明顯,分枝密集,細胞內多液泡,菌絲直徑3.19~4.85μm,平均3.68μm(圖2H)。菌皮由菌絲及泡囊組成,菌絲淡棕色,具隔、具分枝,表面粗糙有大量疣狀突出物。菌皮菌絲直徑3.20~3.74μm,平均3.56μm,泡囊狀細胞大小為(6.31~8.88)μm×(5.01~8.13)μm(圖2I~J)。
根據相關數據可知,思茅松毛蟲的蛹重一般是0.015kg和0.027kg之間,蛹期19~22天。在蟲卵期,它的天敵主要包括黑卵蜂、松毛蟲赤眼蜂、金小蜂和平膠小蜂等,具有很強的抑制作用,其中,寄生率達到了30%;在幼蟲時期,它的天敵主要是蠶飾追寄蠅、二色瘦姬蜂、松毛蟲面麻蠅、黑胸姬蜂和傘群追寄蠅等,寄生率15%~20%;蛹期階段,它的天敵主要包括廣大腿小蜂、花胸姬蜂和松毛蟲黑點瘤姬蜂等,寄生率在10%。并且,它的病菌天敵包括擬青菌和白僵菌、鳥類天敵主要包括四聲杜鵑、黑枕黃鸝和大山雀等。
2思茅松毛蟲的防治技術
2.1物理防治技術充分利用成蟲具有的趨光性,用燈光引誘思茅松毛蟲,結合高壓將他們除去;也可將信息素添加到一起使用,能夠取得更好的防治效果,在減低蟲口密度的同時,可以對思茅松毛蟲的情況進行有效檢測;在思茅松毛蟲下枝結繭的時候,采用人工方法摘繭,要避免中毒情況出現。
2.2生物防治技術在地面噴霧白僵菌,1m2用量是1~5億孢子;在地面噴粉的話,在早春時候和帶菌越冬時期進行防治,可以取得更好的防治效果,用量是每667m2內500g粉,且每g為100億孢子。其中,第1代生育越冬時,使用帶菌越冬防治方式效果會更好。
2.3化學防治技術一般主要使用的化學藥劑有50%的馬拉硫磷乳劑、殺螟松乳劑,其中,殺螟松乳劑為八百倍液;90%的晶體敵百蟲,用量為800倍液;2.5%的敵百蟲粉劑、溴氰菊酯,20%的殺滅菊酯或者氯氰菊酯;在每年的4~6月,使用濃度為20%的殺滅菊酯,在大面積防治中比較適用。
1.2教師對心理環境中師生關系的態度通過調查教師對延長工作時間為學習后進生提供幫助的看法以及教師對何種學生最適合實驗教學的課堂為例展開對師生關系的調查分析。由圖3可以看出67%教師對課后幫助學生補習實驗予以精力范圍內的支持,只有18%的教師認為要全力幫助學生。圖4則可以看出63%的教師喜歡遵守紀律聽話的學生,只有31%的教師認為在實驗課堂上學生應該是態度積極、思維活躍的。
1.3教師自身對實驗教學的準備和理解教師自身的理念和對實驗教學的準備和理解也是心理環境的重要組成部分,直接會影響到實驗教學的質量,筆者以實驗教學中教師對實驗的準備情況和一節高效率的實驗課的決定因素為例展開調查。由圖5可以看出36%的教師會精心準備實驗課,但有30%的教師認為學校條件的限制影響了對實驗的準備情況。圖6可以看出77%的教師認為一節成功的實驗課取決于師生的實驗心理是否積極,師生關系是否和諧,只有23%認為是取決于硬件設施和時空環境。
2優化策略與建議
2.1教師應加強對學生消極實驗心理的關注和優化研究教師應當充分意識到分析學生實驗心理、端正學生實驗態度對優化實驗教學中心理環境的重要意義。首先教師要重視心理輔導,消除學生的恐懼心理,這也要求教師自身在實驗操作過程中要從容不迫,給學生良好的榜樣;另外有些實驗過程可能耗時較長,這樣學生可能就會對此失去耐心而產生抗拒心理等。所以教師可以嘗試優化實驗過程來培養學生的實驗興趣,從而將學生的注意力維持在一個較長的水平。
1.2肝細胞標志基因的檢測按照總RNA提取試劑盒的操作說明分別提取hUC-MSCs和人肝癌細胞HepG2的總RNA,用RNase-FreeDNaseⅠ去除基因組,最后檢測RNA的濃度和純度,立即進行反轉錄合成cDNA或保存于-80℃備用。采用Prime-ScriptTMⅡHighFidelityRT-PCR試劑盒反轉錄2μgRNA得cDNA,取2μL用于PCR。根據GenBank提供的人肝細胞標志基因序列,使用PrimerPremier5.0軟件設計引物,引物序列和產物大小見表1。GAPDH為內參對照。PCR反應條件:94℃預變性5min;94℃變性30s,56℃退火45s,72℃延伸30s,30個循環;最后72℃延伸5min。PCR產物用20g/L的瓊脂糖凝膠電泳,在凝膠分析系統下拍照。
1.3PAS糖原染色按照PAS染色試劑盒的說明書操作,對第5代hUC-MSCs和HepG2進行糖原染色,在倒置相差顯微鏡下觀察并照相。
2結果
2.1hUC-MSCs的分離、培養、傳代及鑒定組織塊貼壁培養3~4d時,可觀察到組織塊間隙鋪展出小三角形或長梭形的細胞,繼續培養至7d左右,可觀察到局部細胞呈集落生長,此時,在無菌條件下取出組織塊,更換新鮮培養基,繼續培養1周左右,細胞可達80%~90%匯合,即可傳代。用胰酶/EDTA消化后細胞呈亮而圓的單個分散狀,以1∶3的比例進行傳代,約4h貼壁,2d后迅速生長。倒置相差顯微鏡下可觀察到細胞較大,輪廓清楚,內部有清晰的應力纖維,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構,細胞核呈規則的卵圓形,核仁大而明顯,呈典型的成纖維細胞樣形態(圖1A);持續培養大約2周時,細胞基本達到完全匯合,形態發生一定的變化,胞質變得狹窄,內部的應力纖維也不明顯,呈平行排列或漩渦生長(圖1B)。連續多次傳代,細胞保持穩定的、相對均一的成纖維細胞樣形態以及較強的增殖能力。經鑒定分離培養的細胞CD44呈陽性表達,且具有良好的均質性。
2.2肝細胞標志基因的表達以HepG2作為陽性對照,用RT-PCR檢測hUC-MSCs的肝細胞標志基因的表達情況,結果見圖2,hUC-MSCs表達ALB、CK18、G6P、GLUL和MET,不表達TAT。
2.3PAS糖原染色結果對hUC-MSCs和HepG2進行PAS糖原染色,染色結果顯示兩種細胞的細胞質中均有紫色顆粒物形成,即均呈糖原陽性反應(圖3)。
3討論
MSCs能分泌多種細胞因子和生長因子,具有直接或間接的抗炎及抗纖維化作用,可抑制肝細胞的死亡和纖維化;還可通過其分泌物抑制肝細胞的凋亡、刺激肝細胞再生、為受損肝細胞提供營養支持等。MSCs還具有低免疫原性及免疫抑制力,適用于進行同種異體移植,在移植后可遷移、歸巢至受損的組織,發揮治療作用。因此,MSCs在肝臟疾病的細胞移植治療中具有廣闊的應用前景。研究發現,相較不同來源的MSCs,臍帶來源的MSCs不僅具有干細胞的特性,而且來源豐富、取材方便、增殖能力較強、無倫理法律限制,還具有較低的免疫原性和分化程度,從而成為一個非常有吸引力的移植治療肝病的細胞來源。
國內Wang等近期對抗SRP抗體陽性患者的研究中顯示,其肌活檢顯示肌纖維壞死伴再生,有少量炎性細胞浸潤,并有肌肉萎縮的形態學特征??筍RP抗體陽性患者對標準治療的反應性不確定,有研究表明其對標準免疫調節治療的癥狀改善不明顯;然而,Miller等和Wang等研究發現其對糖皮質激素(簡稱“激素”)和免疫抑制劑治療有效。分析其原因可能與患者是否伴有其他疾病和個體差異性有關。一般情況下,在劑量逐漸減量或停用藥物者復發率高(達70%)。對激素等治療有效的患者表現為肌力改善,抗SRP抗體及CK水平降低,大多數患者均有較好的臨床痊愈結果,雖然部分仍然有殘余的肌肉無力。部分患者的死亡原因多為合并其他疾?。ㄈ玳g質性肺炎、腫瘤等)抗SRP抗體檢測和肌肉病理檢查,包括對肌內膜毛細血管的檢測,可能為疾病的診斷和治療提供有效的信息。目前,主要是通過對人喉癌上皮細胞(HEp-2cells)的間接免疫熒光法檢測抗SRP抗體,陽性結果顯示為典型的胞質反應。但這種檢測不是很準確,需要通過免疫斑點分析或蛋白質免疫沉淀反應來驗證。以上這些檢測方法均不能準確定量血清抗SRP抗體的活性,近期為了定量檢測及隨訪該種抗體水平變化,Fritzler等開展了一種可尋址的激光免疫磁珠分析(theaddressablelaserbeadimmunoassay,ALBIA)方法。通過這種方法可以定量檢測抗SRP抗體水平,從而可以進一步分析抗體與疾病發生、復發及預后的關系。
2抗HMGCR抗體
近期由Christopher-Stine等[8]描述的抗-200/100自身抗體,并發現其與NAM(特別是有他汀類藥物暴露史者)有關聯。隨后,Mammen等的研究證實抗-200/100抗體所結合的Mr為100000的自身抗原復合物是HMGCR,其是他汀類藥物的治療靶點,而且通過免疫熒光檢測發現HMGCR表達在再生肌纖維上并顯著地表達上調。
Kuncl[17]和Silva等的研究表明不同種類的他汀類藥物產生肌病的風險和嚴重程度不同??笻MGCR抗體陽性NAM的臨床特點是大部分患者有服用他汀類藥物史(66.7%),特別是在老年患者中可達92.3%。該病表現為急性或亞急性起病的對稱性近端肌無力,部分伴有肌痛、關節痛和吞咽困難等;CK水平顯著升高;MRI提示病變肌肉水腫征象;肌電圖提示肌源性改變;肌活檢顯示肌纖維顯著退化、壞死和再生,部分有輕度炎性細胞的浸潤;肌肉免疫組化提示肌內毛細血管壁的異常增厚,但未見其數量明顯的減少,MAC在肌束膜內血管及壞死和再生肌纖維上的沉積;MHC-Ⅰ在肌纖維膜上及再生肌纖維胞質中表達上調??笻MGCR抗體陽性NAM對治療的反應多變,其中他汀類藥物介導的NAM患者對治療的敏感性明顯高于非他汀類藥物介導的NAM。
大多數患者對激素治療的效果不明顯,需要結合免疫抑制劑來控制病情。利妥昔單抗和靜脈注射免疫球蛋白有利于上述治療作用的提高。治療藥物減量或停藥時病情容易復發,所以此類患者藥物劑量的調整需要慎重。依據患者對綜合治療的反應性可以初步判斷預后,大部分對治療敏感的患者療效相對較佳,表現為肌力增強、CK水平下降和抗HMGCR抗體滴度降低等。近期Werner等闡述了他汀類藥物介導的自身免疫性肌病患者中原始抗HMGCR抗體水平與血清CK水平和臨床癥狀嚴重度的關系,并發現治療所致的臨床癥狀改善與抗體滴度的下降相關??笻MGCR抗體檢測方法主要有利用放射性標記的海拉細胞(Helacells,HeLa細胞)進行定性檢測的免疫沉淀反應[8],之后Mammen等又開展了血清抗HMGCR抗體的ELISA檢測。2012年,ELISA檢測抗體的有效性被證實,并被認可用于篩選抗HMGCR抗體陽性患者。Mammen等通過分析28例抗HMGCR抗體陽性患者及705例抗體陰性對照,得出ELISA分析的靈敏度和特異度分別是94.4%和99.3%,但在未經選擇的人群中的陽性預測值非常低,這表明可確診的免疫沉淀反應檢測還是有必要的。然而,在未經選擇的人群中陰性預測值大于0.999,表明陰性結果的ELISA幾乎可以完全排除這種具有重大意義的自身抗體的存在。最近Drouot等[22]提出了激光尋址免疫磁珠分析法,這是一種能夠有效檢測和定量的分析方法。
3抗合成酶抗體(anti-synthetaseantibodies)
多種合成酶自身抗體各自識別不同種類的氨基酸-tRNA合成酶(aminoacyl-tRNAsyn-thetase)。這些合成酶廣泛存在于細胞質,從而可以將氨基酸與相應的tRNA結合。NAM患者血清學異質性和自身抗體可能對預測其臨床表型及預后有重要意義。值得注意的是,抗氨基酸-tRNA合成酶抗體是抗合成酶綜合征的標志物,此類NAM患者有一些相似的臨床特征,如自身免疫性肌病、間質性肺炎、非侵蝕性關節炎和高熱等。其中與壞死性肌病有關的研究報道較少,2010年Christopher-Stine等發現38例NAM中4例(10.5%)伴有抗氨基酸-tRNA合成酶抗體。Mehndiratta等于2012年報道了1例NAM伴抗-PL12(丙氨酸)抗體陽性的患者,但其缺乏炎性改變,并有典型結締組織疾病表現。近期Meyer等發現兩例NAM伴抗-PL7(蘇氨酸)抗體陽性患者,伴有嚴重的肌外受累癥狀。由于該種NAM的報道較少,其治療方面的信息相對缺乏。有研究表明這類患者激素治療反應性較好??购铣擅缚贵w陽性的NAM的預后主要取決于肌外受累癥狀,特別是肺部受累,通常仍然存在亞臨床肌炎癥狀。該類抗體的檢測主要使用常見的酶聯免疫吸附試驗或免疫印跡及免疫擴散分析。
4MAC
MAC,即C5b-9,是補體系統被抗原抗體復合物或內毒素等經過經典、旁路和凝集素途徑激活后形成的共同終末效應產物。有研究表明,MAC沉積在內皮細胞從而導致毛細血管的損傷和缺失可能是自身免疫性肌病的早期過程。皮肌炎中MAC在血管的沉積報道的最多,這也進一步說明了皮肌炎是一種微血管病變。在NAM中也有MAC在血管沉積的情況,但嚴重程度沒有皮肌炎中的改變明顯。
Hengstman等研究發現MAC的沉積僅見于壞死的肌纖維而未見于毛細血管壁。但也有研究表明,在部分抗SRP抗體陽性肌病患者中,肌活檢發現MAC在肌肉毛細血管壁沉積。也有多項研究發現,在一部分抗HMGCR抗體陽性肌病患者中檢測到MAC在小血管和非壞死肌纖維沉積。這些發現提示微血管的損害可能是NAM的肌肉壞死的基礎或促進因素。
MAC并非為NAM的特異性標志物,其可能作為發病機制中的一種因子而在多種NAM亞型中發揮作用。目前主要通過免疫組織化學染色方法進行MAC檢測。
5MHC-Ⅰ
MHC-Ⅰ在肌病中表達并具有一定意義。首先,MHC-Ⅰ/CD8復合物在未壞死的肌纖維中存在提示免疫性肌炎(如多發性肌炎和包涵體肌炎)。其次,單獨MHC-Ⅰ表達可以觸發內質網應激,影響肌肉結構和應激蛋白基因的表達,甚至引發炎性反應和肌肉無力。最近Li等在MHC轉基因小鼠實驗觀察中進一步確認該途徑的存在。越來越多的證據表明,在炎性反應情況下表達MHC-Ⅰ的肌纖維本身可能作為抗原提呈細胞激活T細胞而觸發免疫反應。
多發性肌炎和包涵體肌炎的一個重要的免疫生物學觀察結果是肌纖維表面顯著性表達MHC-Ⅰ。肌營養不良、非免疫性壞死性肌炎及其他肌病則不同,這些肌病中MHC-Ⅰ表達缺乏或很少在細胞浸潤區域表達。在來自Christopher-Stine等的一組抗HMGCR抗體陽性肌病患者中,有約一半患者在非壞死肌纖維表面表現出MHC-Ⅰ強表達。其他的病例分析也表明,大部分推測為他汀類藥物介導的自身免疫性肌炎患者中MHC-Ⅰ染色顯示為表達上調??筍RP抗體陽性肌病患者的MHC-Ⅰ染色均未見任何陽性表現。近期有研究發現MHC-Ⅰ散在或集中在壞死或再生的肌纖維膜上或細胞質中表達,這提示再生肌纖維可能是維持肌病發展的一個因素。
醫學細胞生物學是一門以細胞生物學和分子生物學為基礎,探索研究人體細胞發生、發育、增殖、衰老、死亡以及細胞結構與功能的異常與人類疾病關系的學科[1]。醫學細胞生物學是臨床醫學、檢驗醫學、口腔醫學、預防醫學等醫學專業的一重要基礎課,同時也是生理學、病理學、免疫學、組織胚胎學、藥理學等醫學基礎課程以及后續臨床課程的基礎[2]。學習醫學細胞生物學的基本理論知識有助于醫學專業學生從分子細胞層面理解人體生命活動規律和疾病發生發展進程,為專業課學習和后續的科研工作奠定堅實的理論基礎[3]。醫學細胞生物學是一門實驗操作性極強的學科,實驗教學是這門課程教學工作中的重要實踐環節,在培養學生動手能力、實踐探索能力和科學創新能力等方面具有重要作用[4-6]。傳統的教學理念和教學方法已經不能滿足新時代的需要,如何能在有限的時間內,讓學生系統掌握醫學細胞生物學的基礎理論知識,并熟練掌握基本實驗操作技術,是新形勢下醫學細胞生物學教學改革的一項重要內容[7-8]。本文結合鄭州大學基礎醫學院的實際情況,對醫學細胞生物學理論課及實驗課教學中存在的問題及改革策略進行探討并提出建議,以提高醫學細胞生物學教學質量。
1提高醫學細胞生物學理論課教學質量的建議
1.1理論課教學內容的改革
首先,針對不同專業,因材施教。臨床醫學、檢驗醫學、法醫學、臨床藥學、預防醫學等專業均需要開設醫學細胞生物學。任課教師應該結合教學大綱并根據教材內容,為不同專業的學生制定相應的教學計劃和授課內容,按照學校的課程設置,多方面、多角度、多層次因材施教,提高醫學細胞生物學的課堂教學效果。其次,注重基礎理論,由淺入深。注重教學內容的基礎性,構建并完善由細胞基本結構及其功能、細胞重大生命活動現象及本質等所組成的理論教學體系,加強學生對基本理論知識及基礎實驗技術的理解。授課教師應該以真核細胞的結構與功能為教學重點,使學生對細胞的主要結構及其功能等有系統、全面的了解和認識。然后,精煉教材內容,突出重點。醫學細胞生物學課程的內容較多,但課時有限,所以,任課教師應精煉教材內容,有的放矢授課。該門課程的必修內容是認識人類自身生命活動的基礎,也是認識疾病發生、發展的理論基礎。授課教師在授課過程中要注意精練授課內容,突出重點章節,同時,課后需要對本節課的內容進行歸納總結。
1.2理論課教學方法的改革
首先,使用啟發式教學。授課教師應該在課堂上開展啟發式教學,實現教師與學生的課堂互動。啟發式教學相比傳統單純由教師講課的教學方式更具有優勢,可以更加有效地激發學生的學習興趣。啟發式教學不但注重知識的傳授,更注重能力培養,因此,啟發式教學可提高學生的思維能力和創新能力。其次,使用多媒體教學。醫學細胞生物學課程中有很多細胞結構圖和分子機制圖需要制作成動畫,以使復雜抽象的內容變得直觀有趣,調動學生的學習主動性,增強學生的學習興趣。同時,任課教師可以充分利用網絡資源,搜集醫學細胞生物學的視頻課件資料并運用到課堂教學中。這樣既可以拓展學生的學術視野,又可以提高學生的綜合素質。然后,使用案例式教學。案例教學是在事實案例基礎上的一種開放式、互動式的新型教學方式。醫學專業學生不僅要掌握細胞的結構、功能,還應該熟悉細胞的病理改變與疾病發生發展的關系。但是由于醫學細胞生物學課程的理論性強、內容抽象,所以任課教師應該積極探索案例式教學,以激發學生的學習興趣,提高醫學細胞生物學的教學質量。
1.3理論課考試方式的改革建議
首先,優化考試內容。任課教師可以通過以下幾點優化理論課程的考試內容:(1)建立和完善理論課程的考試題庫,保證理論課程考試的有效性;(2)根據本院開設的臨床醫學、檢驗醫學、預防醫學等專業設置相對應的考試題目;(3)指導學生撰寫綜述性論文或科研標書,以培養醫學專業學生良好的思維能力和創新意識。其次,優化考試形式。任課教師可以通過以下方法優化理論課程的考試方式:(1)構建綜合豐富的考試方式。建立平時成績和期末考試成績相結合的考試體系;(2)增加創新能力考試的比重。任課教師讓學生按照要求寫出科研標書并進行打分;(3)增加平時表現考試的比重。平時表現考試主要是在課堂上對學生回答問題的情況予以評分并記錄。然后,優化評價方案。任課教師可以通過調整期末閉卷考試及平時表現考試優化評價方案。理論課考試中的期末閉卷考試成績占理論課總成績的70%,試題從考試題庫中隨機抽取。同時理論課考試中也包含學生的平時成績,這一部分占總成績的30%,包括學生的出勤情況、課堂上回答問題的情況以及學生完成綜述性論文的情況。
2提高醫學細胞生物學實驗課教學質量的建議
2.1實驗課教學內容的改革建議
首先,優化實驗教學大綱。由于受到課堂學時及硬件條件等方面的制約,很多院校的醫學細胞生物學課程的實驗課內容僅僅局限在一些驗證性和基礎性的實驗。任課教師需要調整教學內容,增開一些與理論課程密切相關并且與學科前沿緊密聯系的綜合設計實驗。這樣可以激發學生的學習興趣,更好地發揮學生的積極性和主觀能動性。其次,培養學生創新能力。任課教師可以在基礎性實驗之外開設一些探索性及創新性較強的綜合實驗,例如細胞融合實驗、細胞凋亡實驗、細胞免疫組織化學實驗和免疫熒光實驗等。培養并提高學生的實際操作能力以及分析問題和解決問題的能力,使學生初步具備進行設計性實驗的能力,提高學生的科研素質和創新能力。然后,設置開創綜合實驗。任課教師應當結合理論課內容及相關臨床應用,修改完善實驗課教學大綱,科學設置實驗內容,培養學生的實驗操作能力,以增強學生的科研興趣為重點,在實驗課教學中適當增加一些開放性強且創新性強的綜合實驗,讓學生運用已掌握的知識與技術進行更深入的研究設想,培養獨立科研工作的能力。
2.2實驗課教學方法的改革建議
首先,應用啟發式教學。與傳統的實驗課教學相比,在啟發式的實驗課教學中,任課教師應該在講解實驗目的和原理后,鼓勵學生根據所學的知識設計實驗過程,然后分析研究最后得到的實驗結果以探索實驗原理。采用啟發式教學可以培養學生的思維能力,引導學生積極思考,啟發學生從不同的角度考慮問題,期提高學生的綜合科研素質。其次,使用多媒體教學。在醫學細胞生物學的實驗課教學中,多媒體技術的應用能夠極大地方便課堂教學工作。多媒體教學形象生動、易于理解,可以方便地解決一些不容易講解或者難以開展的實驗。另外對于某些受條件所限而不便親自操作的實驗,學生可以觀看教學演示片,全面了解這些前沿實驗儀器的結構、性能和用途。然后,開展研究型教學。醫學細胞生物學的實驗課程與科研工作相結合可以提高學生的學習興趣和科研熱情。任課教師在實驗課堂上采用開放式的研究型教學可以激發學生的求知欲,讓學生學會分析問題和解決問題。開放式研究型的實驗課教學,讓學生經歷嚴格的科研訓練,為以后申報、參與以及實施各種創新性科研項目奠定基礎。
2.3實驗課考試方式的改革建議
首先,優化考試內容。為全面、科學地考察學生的實際動手能力以及科研創新能力,改革后的醫學細胞生物學實驗課的考試內容應該以核學生的實驗操作水平為主,以考試學生的理論知識水平為輔。這種改革模式,可以培養學生在實驗操作過程中分析問題、解決問題的能力,并拓寬學生對實驗操作技術在臨床應用中的思考。其次,優化考試形式。建立完善的成績評定體系是保證實驗教學質量的關鍵。實驗課程的考試應是一個全方位、多角度、全時段的綜合評測,包括平時課堂考試及綜合實驗考試,平時課堂考試包括出勤情況、課堂回答問題情況和實驗操作情況、實驗報告完成情況,綜合實驗考試包括實驗理論考試、實驗操作考試、開放性及探索性實驗考試等。然后,優化評價方案。實驗課的考察應該以考察學生運用實驗技術的能力為主,包括以下幾點:(1)考察學生的平時成績,包括出勤情況、實驗報告完成情況等,占實驗課總成績的20%;(2)考查學生的理論水平,包括實驗基本原理、實驗技術手段、實驗操作方法等,占實驗課總成績的20%;(3)考察學生的實驗操作,占實驗課總成績的60%。綜上所述,醫學細胞生物學的教學是教師與學生共同學習、教學相長的過程。在這個過程中,首先任課教師需要不斷提高自身素質,認真做好科研工作并積極學習本課程最先進的理論知識與最前沿的實驗技術。其次,任課教師也需要精心把握課程內容,不斷總結教學經驗,比較各種教學方法的優劣,并將各種教學方法有機結合、交叉運用。同時,任課教師可以根據學生的不同專業方向,改進傳統教學模式中教案和課件的內容,在上課時適量引入案例教學,從而調動學生的學習興趣,提高學生的綜合素質。另外,任課教師也需要加強實驗課教學的比重,改革實驗教學內容,完善實驗教學條件,采用多種教學手段,建立完善評價體系,并不斷探索研究新實驗,使實驗課堂更富有學術氣氛。以上這些舉措是提高醫學細胞生物學的教學質量,培養適應現代社會發展的具有較強的綜合能力和科研素質,具有獨立發現問題、思考問題、分析問題及解決問題能力的創新型醫學專業人才。
作者:鄭皓 單位:鄭州大學基礎醫學院醫學遺傳與細胞生物學系
參考文獻:
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2靈活多樣,結合臨床,增強學生的主觀能動性
教學方法的選擇應根據不同的認知對象、不同的學科、同一學科的不同內容從而選擇不同的方法,但不管采取何種教學方法,關鍵在于把課上活,充分調動學生參與教學的積極性。因而根據教學內容的不同,我們采取了多種教學方法。如對于細菌的形態和結構這一章節內容,采用直觀的多媒體教學可以讓學生形象地看到各種細菌的形態、基本結構及特殊結構;在細菌各論部分,選取部分教學單元由學生自主教學。教師事先根據教學目的、教學內容提出授課提綱、學習重點及難點并確定人員分組。小組成員細致分工、相互協作,在課后完成資料素材收集及教學課件的準備。在此期間,教師與學生進行充分溝通,及時為學生排疑解惑,引導學生在教學大綱的框架下安排課堂講授內容,并傳授講課技巧及注意事項。同時設計《學生自主學習實踐評價標準》,由學生從教學內容安排、課件制作、語言表達等多方面互相進行評議、分析和總結,教師最后進行點評總結。這種教學方式一方面活躍了課堂氣氛,加深學生對所學知識的理解,增強了學生的團隊意識,另一方面也可以讓教師在與學生的互動中、從學生獨特的視角中發現許多平時不會思索的問題;在學習引起人類疾病的常見病毒這一部分內容時,采取專題討論方式進行學習。專題討論式學習由教師提出專題,分組學生在本專題內提出應深入討論的問題,查資料,作綜述,課堂進行討論。例如“人類免疫缺陷病毒”的討論式教學,學生提出一系列問題,如HIV-1感染的分子機制及免疫反應、T細胞功能受損的疾病、HIV疫苗的研究等,經過討論,不僅全面完成了教學內容,而且為學生提供了一次“綜述訓練”的機會,教學效果令人滿意。此外,作為一門與臨床學科關系十分緊密的基礎課程,我們在教學過程中十分注重微生物學知識的臨床應用,采用PBL教學法將臨床病例分析引入課堂討論教學,由病引入菌,菌中解析病,菌病結合,解除病菌。如此,在整個講授過程中就將病原微生物的生物學特性、致病物質與致病機制、檢查及防治原則講解清楚。
3反映前沿,開闊視野,培養學生創新能力
在教學過程中,既要將教材中最基本、最核心的理論知識傳授給學生,為學生自主學習打下堅實的基礎,同時要補充一些開拓性、時代性和應用性較強的學科前沿內容。如微生物的耐藥性這一章節,我們為學生播放與耐藥機制相關的視頻和短片,引導學生就微生物耐藥機制的產生及防控進行積極的討論,鼓勵學生查閱耐藥機制最新的高質量學術論文并就學習心得進行討論交流,取得了良好的效果。此外,在授課過程中結合教研室老師的科研方向,為學生講授該領域的研究進展,如人體微生態學與免疫性疾病的相關性研究進展、新出現的傳染病病原體、流行性感冒病毒的研究進展等教材中鮮有介紹的前沿動態,從而啟迪學生思維,拓寬學生的知識面。同時鼓勵學生積極參與教師的科研課題,通過進行科學實驗研究進一步激發學生學習微生物學的興趣及愛好,培養學生發現問題、解決問題的能力和創新能力,全面提高學生綜合素質。
病原生物學包含醫學微生物學與人體寄生蟲學2門相關學科,是醫學人才培養課程體系中一門重要的專業基礎課川。實驗課是病原生物學教學的重要組成部分,實驗教學的質量直接影響著這們課程的整體教學效果。傳統的教學模式中存在重理論講授、輕實踐操作的現象。學生缺乏動手能力和開拓創新精神,很難適應素質教育的需求。我們經過長期的教學實踐,深切的體會到只有強化病原生物學實驗課各個環節,采用經典與創新結合的教學方法,傳統與現代并用的教學手段,才能有效地提高教學質量。
一、實驗教學內容的優化、改革
根據專業培養目標和學科發展的要求,制定實驗教學大綱和教學計劃,編寫實驗教材、優化教學內容,注重培養學生的綜合能力,改革單調的演示驗證性實驗。逐步開設綜合性、設計性實驗,激發學生創新意識,鍛煉、培養學生獨立操作及分析和解決問題的能力。
二、培養學生嚴謹求實的科學態度及作風
每次實驗課前,首先讓學生充分預習實驗內容,實驗過程中教師應幫助學生建立“有菌觀念”,養成“無菌操作”的良好習慣。及時糾正錯誤,規范實驗操作,實驗課上一定要強調“眼見為實,實事求是”的重要性,強調實驗結果的準確性。對于實驗報告中抄襲實驗講義,編造實驗結果,不講求實事求是的現象要予以嚴肅批評教育,同時也和未獲得預期結果的學生一起探討原因,營造切磋研討,教學相長的機會和氛圍。在實驗教學中潛移默化地培養學生求精敬業的醫學職業道德,為以后科研及臨床工作奠定良好的基礎。
三、強化技能訓練
實踐技能訓練是培養學生綜合能力最有效的途徑,我們在強化技能訓練的同時,將能力培養和態度培養貫穿于實踐教學的始終。如顯微鏡油鏡的使用、革蘭染色法與抗酸染色法操作、細菌的培養與鑒定技術等。對鍛煉和培養學生的精細動作,細致的觀察力及一絲不茍、精益求精的工作態度等都極為重要。通常一個完整的實驗過程,涉及實驗設計、操作步驟、結果觀察、報告書寫等方面,教師要充分利用實驗教學過程中的每一個環節,切實加強學生綜合能力的培養。
四、培養學生動手操作能力
4.1明確實驗目的首先向學生闡述實驗目的,鼓勵其親自動手,獨立操作。
4.2將社會實踐融人到實驗教學中在教學過程中,針對一些常見病原性疾病的實驗診斷方法進行相關實驗診斷和檢測。如學生應用透明膠帶法自行檢查蠕形蠟感染;應用糞便生理鹽水涂片法檢查蠕蟲卵;應用酶聯免疫吸附試驗等方法對自身血清中的乙型肝炎、丙型肝炎抗原、抗體進行檢測。因為這些實驗都是檢測自己的感染情況,所以學生實驗操作都非常認真,實驗過程中既掌握了操作技術,又深刻體會了實驗技術在臨床實際工作中的應用,同時學生在實驗中對自身的健康狀況又有了進一步的了解,極大地激發了實驗興趣。
4.3發揚團隊協作精神對部分需要多人共同完成的實驗,實行小組長負責制,實驗小組成員之間相互協作,密切配合,要求在最短的時間內完成實驗,訓練學生的組織能力和團結協作能力。
五、充分利用多媒體教學手段。提高實驗教學效率
多媒體教學是將文字、圖形、動畫、視頻、聲音等多種信息加工組合在一起來呈現知識信息。多媒體突破了微觀限制,幫助學生加深理解教學內容,將不易單純用語言表達清楚的抽象復雜的理論直觀地表現出來,變抽象思維為形象認識,使教學內容生動形象。病原生物學實驗有一些內容以模式圖和實物標本難以展示,應充分運用現代計算機多媒體進行輔助教學,激發學生的求知欲望和實驗興趣。比如在講解用懸滴法進行細菌的動力測定時,學生經常無法找到正確的視野,除了顯微鏡使用原因之外,更多的是學生對細菌運動沒有直觀的認識。為此,我們特意制作了常見細菌的動力學觀察視頻資料,學生在短短的幾分鐘時間內對細菌的運動和顯微鏡的使用便有了初步的認識,操作和觀察效率大為提高,激發了學生自主學習興趣,教學效果也有了顯著提高。
山藥又稱淮山、山薯、薯蕷、大薯,原產亞洲熱帶地區。我國南北各地均有栽培,以地下肉質塊莖供食,喜溫暖濕潤,忌積水,怕干旱。山藥為中藥、蔬菜兼用,營養豐富,含有大量淀粉及蛋白質、B族維生素、VC、VE、葡萄糖、粗蛋白氨基酸、膽汁堿、尿囊素等。作為中藥可以健脾益胃、助消化、滋腎益精、益肺止咳、降低血糖、抗肝昏迷、延年益壽。一般產值9萬元/hm2左右,與其他作物進行周年間作套種產值可達15.0~22.5萬元/hm2。
1生物學特性
山藥為多年生纏繞草本植物,莖細長,葉對生或3葉輪生,1m以上,葉片心臟形或箭頭形,葉腋間常生1個珠芽(氣生塊莖),亦稱零余子(山藥蛋),可用來繁殖和食用。地下肉質塊莖,分為棍棒狀、掌狀和塊狀3類,表皮粗糙呈淡黃褐色或黑褐色,表面密生細須根,春季自塊莖上生不定芽,肉白色或淡紫色。夏季開花,花單生,乳白色少有結實,都行塊莖繁殖。雌雄異株,穗狀花序,雌花序下垂,雄花序直立,花小,黃綠色。果實有三棱,呈翅狀,成熟后枯黃色。山藥要求高溫,干燥氣候,塊莖10℃開始萌動,生長適溫為25~28℃,在20℃以下生長緩慢,葉蔓遇霜則枯死,短日照能促進塊莖和零余子的形成。
2高產栽培技術
2.1品種選擇
當前栽培的山藥品種主要有2類:一是普通種,通常又叫家山藥,二是大薯又叫田薯。目前栽培的主要品種有淮之、農大短山藥1號等。
2.2土地選擇
選擇地勢高燥、排水良好、土層深厚、松軟的沙壤土或壤土田塊,要求上下土質一致,如下層有較薄的黏重土層,挖溝時挖去,也可種植。土壤以微酸到中性為宜。山藥不能連作,一般應隔3年輪作1次。
2.3種子處理,培育壯苗
應采用零余子(俗稱山藥蛋、山藥豆)和山藥塊莖段作種。種前需曬種1周以上,促進種子內部物質的轉化,打破休眠,殺滅種子表面的病菌。零余子晾曬至表皮呈灰綠色,上面有很多疙瘩突起,用手剝開表皮可見紫綠色的肉。山藥塊莖段晾曬至傷口向內萎縮,并從斷面中間裂開。4月上中旬選擇較肥沃的土壤摻以腐熟農家肥進行集中催芽育苗,可采用10cm×20cm的窩行距,待苗高10cm左右便可移植大田。
2.4栽植
挖溝栽植時,首先把溝內20cm深的熟土取出放在溝兩邊,溝寬30cm,再繼續將溝下40cm深的土層挖松,將拌勻的腐熟農家肥15.0~22.5t/hm2、磷肥750kg/hm2、碳銨450kg/hm2、硫酸鉀375kg/hm2施入其上,并稍加翻挖,最后把溝兩邊的熟土提到溝上,培成寬30~35cm、高20cm的土壟,再將繁育好的山藥苗栽植在土壟上。一般栽4.5~7.5萬株/hm2,水肥條件好,密度宜小。為了便于搭架、田間管理和通風透光,宜采用寬窄行相間栽植,如100cm×70cm×25cm,栽4.65萬株/hm2;或80cm×50cm×25cm,栽6萬株/hm2。
2.5常見的栽培模式
常見的栽培模式有:韭菜與山藥套種、玉米與山藥間套種、蠶豆與山藥套種等模式。蠶豆與山藥套種,一般在10月底11月初整地點蠶豆,來年3月到4月收蠶豆栽山藥,效益可達15萬元/hm2;韭菜與山藥套種,效益可達18萬元/hm2;玉米與山藥間套種高效立體栽培,周年可生產蔬菜,效益更高,可達22.5萬元/hm2以上。
2.6噴施生長調節劑,控徒長,促高產
多效唑對山藥藤蔓生長具有明顯的抑制作用,表現為節間縮短、藤蔓粗壯、葉色濃綠、葉片增厚、頂端新生側枝減少、花蕾發育不良、零余子生長受抑,能使山藥增產10%以上。噴施多效唑的最佳時期在山藥藤蔓滿架,現蕾開花初期,均勻噴施15%多效唑可濕性粉劑1000~1500倍液,生長過旺的田塊可多噴1次,間隔1周。
2.7搭架通風透光
山藥是藤本右旋攀緣性植物,任其自然生長不利于通風透光和產量提高。搭“人”字架應在藤蔓生長到50cm以上進行,支架頂端用架材連接,并用繩子扎牢,以提高支架的撐力和抗風能力,防止倒架。搭架能改善通風透光條件,提高植株中下部葉片的光合作用能力,降低架內的濕度,減少病害,從而提高山藥產量。一般架高在2m左右。
2.8重施鉀肥,促進塊莖膨大
山藥喜有機肥,從播種到發棵都可鋪施。在生長前期以藤蔓生長為主,應適當供應速效氮肥,進入塊莖生長旺期,要重視氮、磷、鉀的配合施用,特別是重視鉀肥的施用,以促進塊莖膨大和物質積累。生長后期要控制氮肥施用量,防止藤蔓徒長。一般使用的鉀肥有硫酸鉀、磷酸二氫鉀、生物鉀肥等。在山藥生長期內,一般需分次追施硫酸鉀600kg/hm2,
才能達到較好的高產效果。生長后期結合防病治蟲,根外噴施0.3%的磷酸二氫鉀溶液2~3次,還可達到保葉防早衰的目的。
2.9病蟲害防冶
2.9.1病害防治。病害主要有白銹病、褐斑病。白銹病于春季發生,褐斑病于夏季發生。防治方法:①搭支架,使通風良好,不能在陰濕積水的地方種植;②用波爾多液(1∶1∶140)或多菌靈800倍液噴霧防治。
2.9.2蟲害防治。蟲害主要有蠐螬、地老虎,咬食根部。防治方法:①結合整地施入辛硫磷或毒死蜱顆粒劑;②發生時用毒餌誘殺或藥液灌根等。
2.10防止畸形山藥的形成
在山藥栽培過程中,因不良環境條件、栽培措施、管理方法等因素的影響,使山藥在生長過程中改變了內部組織結構,從而產生各種奇形怪狀的山藥,如山藥塊莖上端分杈、下端分杈、蛇形、扁頭形、腳掌形、葫蘆形、麻臉形等,這些統稱為畸形山藥。防止措施:①嚴格按技術規程操作,謹慎施用種肥,防治地下害蟲施用毒土、毒餌時不能盲目加大劑量;②人工挖山藥溝時應在冬前進行,通過冬春雨雪侵蝕冰凍使土塊充分風化粉碎,隨風化解凍及時填溝,填溝時仔細剔除上壤中的石塊、磚塊、沙礫等硬物。不要將大土塊填入溝內;③施用充分腐熟的有機肥,如人糞尿、堆肥、廄肥和優質土雜肥,要利用夏秋季節氣溫高、易發酵腐熟的有利時機提前進行漚制。提倡有機肥和部分化肥在種植完山藥后施入山藥行間,把腐熟的有機肥鋪施于2行山藥之間的畦面上,耬劃翻土15cm深左右,使土、肥充分混合,然后將畦面的肥土覆于山藥壟的兩側。