期刊 科普 SCI期刊 投稿技巧 學術 出書

    首頁 > 優秀范文 > 禁煙標語

    禁煙標語樣例十一篇

    時間:2023-03-14 15:17:41

    序論:速發表網結合其深厚的文秘經驗,特別為您篩選了11篇禁煙標語范文。如果您需要更多原創資料,歡迎隨時與我們的客服老師聯系,希望您能從中汲取靈感和知識!

    禁煙標語

    篇1

    在室內公共場所吸煙,就是犯法!

    《公共場所衛生管理條例實施細則》規定,室內公共場所禁止吸煙!

    吸煙有害健康

    遠離煙草,崇尚健康,愛護環境

    遠離煙草,拒吸第一支煙;凈化空氣,保護環境衛生

    燃燒的是香煙,消耗的是生命。

    無煙世界,清新一片。

    小小一支煙,危害萬萬千。

    健康,隨煙而逝;病痛,伴煙而生!

    無煙的環境,健康的身體。

    愛健康,全民禁煙大行動。

    熄滅香煙,點燃文明。

    健康隨煙而逝,病痛伴煙而生

    現在吞云吐霧,以后病痛纏身

    燃燒的是香煙,消耗的是生命

    摒棄吸煙陋習,創造健康新時尚

    還人類一片清新,請丟掉手中的香煙

    第二組:公共場所禁煙標語

    5月31日為世界無煙日,公共場所和工作場所禁止吸煙已成為時代潮流,吸煙是繼戰爭、饑餓和瘟疫之后,對人類生存的最大威脅。

    1、小小一支煙,危害萬萬千。

    2、健康,隨煙而逝;病痛,伴煙而生!

    3、為了愛你和你愛的人,請不要吸煙。

    4、現在吞云吐霧,以后病痛纏身。

    5、 No smoking , No crying.

    6、青煙長在,惡夢長隨。

    7、 香煙是魔鬼的契約。

    8、 提神不妨清茶;消愁不如朋友;若吸煙,又何苦?

    9、我最怕最怕煙霧蒙蒙,看不清看不清你的面容。

    10、 不一定煙霧繚繞的地方才是天堂。

    11、健康隨煙而滅!有多少生命可以重來?

    12、 無煙世界,清新一片。

    13、吸煙,我們可以選擇,那么,生命呢?

    14、還人類一片清新,請丟掉手中的香煙。

    15、點燃香煙的一剎那,你也點燃了死亡的導火索。

    16、 不抽一支煙,快樂似神仙!

    17、讓你的肺清亮一點。

    18、 煙緲緲兮肺心寒,尼古丁一進兮不復還。

    19、 曾經有一堆煙擺在我面前,我沒好好珍惜,現在后悔莫及;如果上天,再給我一次機會,我會對那鬼東西吆一聲“get out”。

    20、它(吸煙)是你最簡單的快樂,也讓你最徹底地哭泣。

    21、都說吸煙的男人夠瀟灑,可知香煙的危害有多大?

    22、 請把火柴留給你的生日蠟燭,而不是香煙。

    23、蠟燭---燃燒自己,照亮別人;香煙---燃盡自我,貽害眾生。做蠟燭or吸煙?

    24、燃燒的是香煙,消耗的是生命。

    25、 It is easier to start than it is to stop.

    Tobacco , it”s killing the one you love.

    26、吸煙幾時止?美景幾時還?青春何能駐?生命何與共?只愿君能禁吸煙,盼回“無煙好世界”!

    27、千山鳥飛絕,萬徑人蹤滅。吞云吐霧中,物物皆湮滅。

    28、摒棄吸煙陋習,創造健康新時尚

    哥倫布于1492年1月11日首度在美洲接觸煙草,然后引進到歐洲,逐漸傳遍全世界。

    1996年,第49屆世界衛生大會在日內瓦舉行,大會發表了關于吸煙的第一份世界綜合性報告《警惕煙草》,報告指出: “香煙每10秒鐘殺害一個人,估計世界上每年有300萬人死于吸煙。倘若煙草消費量維持目前的增長率,那么到2010年前后每年死亡人數可能達到1000萬,其中70%的受害者在發展中國家”。

    我國男性吸煙率雖整體下降,但仍然保持很高的水平,最近一次全國吸煙行為流行病學調查數據顯示,男性人群吸煙率為57%,吸煙行為幾乎沒有什么限制。這也是造成不吸煙者在多種場所接觸“二手煙”的主要原因。

    篇2

    2、現在吞云吐霧,以后病痛纏身。

    3、你的香煙,我的石油,注定我們不能相愛——吸煙者禁入。

    4、讓你的肺清亮一點。

    5、珍惜生命,崇尚文明生活;熱愛生命,養成良好習慣。

    6、遠離煙草,崇尚健康,愛護環境。

    7、它(吸煙)是你最簡單的快樂,也讓你最徹底地哭泣。

    8、摒棄吸煙陋習,創造健康新時尚。

    9、吸煙,我們可以選擇,那么,生命呢?

    10、千山鳥飛絕,萬徑人蹤滅。吞云吐霧中,物物皆湮滅。

    11、煙緲緲兮肺心寒,尼古丁一進兮不復還。

    12、不一定煙霧繚繞的地方才是天堂。

    13、煙,盼回“無煙好世界”!

    14、請不要讓你的自私點燃我的大樓——請勿吸因(商場禁煙)

    15、想說愛你(吸煙)并不是很容易的事,那需要太大的勇氣。

    16、點燃你的煙,污染了空氣,害了人性命,良心在哪里!

    17、人,請不要吸煙。

    18、點燃香煙的一剎那,你也點燃了死亡的導火索。

    19、生命只有一次,怎能斷送在香煙上?

    20、吸煙有害健康。

    21、還人類一片清新,請丟掉手中的香煙。

    22、拒絕煙草,珍愛生命。

    23、為了你和家人的健康,請不要吸煙。

    24、蠟燭---燃燒自己,照亮別人;香煙---燃盡自我,貽害眾生。做蠟燭or吸煙?

    25、曾經有一堆煙擺在我面前,我沒好好珍惜,現在后悔莫及;如果上天,再給我一次機會,我會對那鬼東西吆一聲“getout”。

    26、吸煙是繼戰爭、饑餓和瘟疫之后,對人類生存的最大威脅。

    27、都說吸煙的男人夠瀟灑,可知香煙的危害有多大?

    28、有時候相愛是一種無奈,有時候離開是另一種安排。為了愛你和你愛的。

    29、無煙世界,清新一片。

    30、健康隨煙而滅!有多少生命可以重來?

    31、提神不妨清茶;消愁不如朋友;若吸煙,又何苦?

    32、吸煙幾時止?美景幾時還?青春何能駐?生命何與共?只愿君能禁吸。

    33、如果你想吸煙,定時炸彈在身邊?。佑驼窘麩煟?/p>

    34、健康,隨煙而逝;病痛,伴煙而生!

    35、一時的快樂,永恒的傷痛——請勿吸煙。

    36、請把火柴留給你的生日蠟燭,而不是香煙。

    37、小小一支煙,危害萬萬千。

    38、遠離煙草,拒吸第一支煙;凈化空氣,保護環境衛生。

    39、千萬別點著你的煙,它會讓你變為一縷青煙(加油站禁煙)

    40、不抽一支煙,快樂似神仙!

    篇3

    盛年不重來,一日難再晨,及時當勉勵,歲月不待人。

    把德性教給你們的孩子:使人幸福的是德性而非金錢,這是我的經驗之談,在患難中支持我的是道德,使我不曾自殺的,除了藝術以外也是道德。

    一寸光陰一寸金,寸金難買寸光陰。

    失去金錢的人損失甚少,失去健康的人損失極多,失去勇氣的人損失一切。

    (來源:文章屋網 )

    篇4

    ぶ型擠擲嗪:J 604

    文獻標識碼:A

    文章編號:1004-2072(2007)02-0055-03

    おオ

    聲樂藝術的獨特魅力不僅在于美妙聲音的展現,更在于真摯情感的抒發,聲樂演唱中的情感表現早已成為廣大聲樂理論工作者的重要課題,這方面的文獻十分豐富。但大多數的文章都是從作品的理解、情感基調、音高、節奏、音色、調式、調性、以及嗓音表現的感知等微觀的角度進行分析與闡釋,而忽略了重要的宏觀思考原則。鑒于此,本文擬從宏觀的視角,追溯聲樂藝術情感表現的歷史發展軌跡,扼要闡釋歌劇詠嘆調的戲劇性、藝術歌曲的文學性和民歌的民俗性。

    一、聲樂藝術情感表現的歷史演進

    ィㄒ唬┞蘊該欄枋貝聲樂表現

    ト魏窩莩藝術都是隨著時展變化的,聲樂藝術也不例外,即人們對于音樂情感表現的認知和聲樂藝術的審美標準亦會隨之變化。 18世紀初至19世紀中是美歌(Bel canto)的黃金時代,不僅要求歌者以輕松、流暢的方法唱出均勻、響亮、圓潤、統一(無明顯的聲區轉換痕跡)的聲音,元音純正、吐字清晰,同時亦要求歌手具有非凡的技巧,寬廣而靈活的音域,各聲部都能即興演唱華彩樂段等。那時大量樂譜是手抄的,一般只提供一個簡單的旋律輪廓,這就要求歌手以各種裝飾,如滑音、跳音、抖音、波音及華彩樂句等來豐富它。這種即興的演唱被稱為"隨意唱"(Cantar al mente),歌手必須掌握具有獨創性的個人絕技和手段,在沒有音樂創作和樂隊效果或戲劇結構的幫助下,創造出激動人心的舞臺效果。

    ピ諗分奚樂發展歷程中,美歌時代是聲音唯美、歌手高于一切的時代,人們并不認為作曲家或劇作家是演出成功的關鍵。正因為這樣,閹人歌手一度獨霸歌壇,他們的聲音既有男聲的力度,也有女聲的高度,能達至當時所認為的聲樂藝術的最高美感。 雖然也有少數女歌唱家登上歌劇舞臺試圖與閹人歌唱家分庭抗禮,如:苔希(V.Tesi 1700-1775)、彭蒂(B.Banti 1756-1806)、卡塔拉尼(A.Catalani 1780-1849)等,但她們在舞臺上演唱并無創新,仍是一味賣弄花腔而不顧歌曲的內涵和音樂情感的表現。這種唯美的聲樂藝術標準一直持續到以帕斯塔為代表的一批新型女歌唱家的出現才得以改變。

    ィǘ)歌劇演唱轉變的代表

    歐洲從19世紀20年代起,最典型的代表是帕斯塔(G.Pasta 1798-1865)。因她原本是戲劇演員,其聲音技巧并不完美,亦不完全符合當時要求的規范,嗓音的音色也不吸引人,但她以一種飽滿的熱情及扣人心弦的魅力征服了聽眾。最主要的原因就是她深刻地理解劇情,她一登場就以宣敘調進入角色,寓情于聲,全身心地以真實感情吸引聽眾,讓聽眾如臨其境。她把自己與所演角色融為一體,把歌唱與戲劇融為一體,使得19世紀30年代的歌劇演唱風格發生了劃時代的轉變。 女高音再不只是像小鳥一般發出婉轉的高音:唱著膚淺的花腔,在舞臺上好似牽線木偶般地游蕩,而是有著真實深沉、感人肺腑之聲的、氣度非凡的悲劇演員。帕斯塔的創新及她的特殊才能,為歐洲歌劇演唱戲劇化做出了巨大的貢獻。她的創造改變了多尼采蒂的藝術生涯與影響了貝里尼的創作風格。貝里尼的《夢游女》 、《諾瑪》等都是受到她特殊才能的啟發而創作的。

    ビ紗絲芍,聲樂藝術的審美標準經歷了以歌手至上、聲音唯美到寓情于聲、聲情并茂的發展過程,從此,具有創新精神與真實的戲劇情感、能刻畫人物心靈的聲樂演唱,成為了歌劇音樂美學的標準。

    二、不同類型聲樂情感表現的衡量標準

    ィㄒ唬杈纈教鏡韉南肪縲

    雖然,歌劇詠嘆調和藝術歌曲在音樂表現上都是音樂與歌詞的結合、人聲與器樂的結合,都是以舞臺藝術為表演形式的,但歌劇詠嘆調的音樂情感表現為戲劇角色的情感,除了帶有直接的"語義性"音樂表情外,其音樂情感的表現還直接或間接地來自于戲劇上的、特殊情感的造型創作--即詠嘆調音樂情感表現上的角色化、戲劇化的創作,是戲劇角色的獨唱曲,是對角色"具體情感"的特殊刻畫,其音樂情感不能脫離戲劇因素而獨立存在,因此它是客觀的戲劇化的聲樂現象。

    例如,歌劇《托斯卡》中的選段"為藝術,為愛情"是托斯卡在假意答應警察署長時演唱的。一個善良的女伶在警察署長威逼利誘可又無力反抗下,心里充滿仇恨,但她深深地愛著她的情人,充滿對幸福生活的向往。演唱者只有體會了托斯卡愛恨交加的復雜情感后,把自己與所演角色融為一體,才能準確地塑造托斯卡熱愛生活、向往愛情的熱望以及 無力反抗、走投無路的悲傷與絕望

    歌劇演唱要求體驗人物,以真實的戲劇性與音樂情感協調、統一的演唱,亦是歌劇美學的基本準則。

    ィǘ)藝術歌曲的文學性

    藝術歌曲文辭性較強、音樂的專業特點比較突出,其音樂情感表現與歌劇詠嘆調的情感表現不同,是聲樂、器樂和詩歌結合的統一體,帶有較強的文學性和器樂性。其情感表現在很大程度上來自于詩歌或詩人的情感,歌唱者的情感表現相對而言是比較獨立、自由、完整的。

    ナ艿賾頡⑹貝、詩詞影響較大、音樂語義也較強的是19世紀浪漫主義音樂品種之一的德奧藝術歌曲。這些藝術歌曲的歌詞大都采用19世界著名浪漫主義詩人的抒情詩歌,為了表現出詩歌的意境、幽靜、細膩、浪漫等格調與深刻的寓意、深沉的情感,演唱時就要求充分運用聲樂技巧和音樂文學藝術修養, 例如運用輕聲、半聲和在高聲區上漸弱的表現手段等。這些藝術歌曲雖也運用美聲唱法,但演唱風格與演唱歌劇時迥然不同。它的演唱具有室內樂的特點,以抒情、敘事、吟誦為主,不像歌劇演唱要求戲劇性,或有大幅度的、強烈的音量變化與對比。

    ノ了豐富音樂情感的表現,藝術歌曲在音樂情感表現上賦予聲樂形態與器樂形態以同等重要的地位。藝術歌曲的伴奏聲部起著獨立作用,旨在揭示旋律聲部沒有直接表現出的心理內容。因此,藝術歌曲的聲樂表現是立體式的,旋律聲部僅僅是立體詩意空間的一部分,這就要求歌唱者在演唱旋律時,除了保持聲樂情感表現中的文學價值與深刻內涵、掌握音色變化、吐字清晰之外,還必須保持著對器樂伴奏(鋼琴或其他)具有敏銳的感知力。例如,演唱舒伯特、舒曼等人的藝術歌曲,必須注意其伴奏的藝術表現力。除個別情況外,古典樂派藝術歌曲的伴奏僅是歌聲部分的和聲與節奏的烘托,而浪漫派作家的藝術歌曲卻給予鋼琴伴奏以音樂形象性及獨立的作用。這方面的先驅者舒伯特做出了杰出的貢獻,他使歌詞、旋律、伴奏三者結合,相輔相成,融為一體,意境完美。最典型的歌曲,如《魔王》(歌德詞),在148小節的貫穿發展過程中,從4個不同的人物(講述者,父親,病兒和魔鬼)的不同角度,用不同音色、心情和語氣,通過調性的對比轉換,織體,力度和音樂旋律線條的變化被生動地體現出來:魔鬼的誘惑,兒子的呼救與父親的緊張不安,講述者宣敘性的音調和鋼琴伴奏始終疾馳,并以三連音來描寫急迫的馬蹄聲,用低聲部描述黑松林中的寒風呼嘯聲,從定型化織體戛然而止及最后的和弦,與歌者共同營造出緊張陰森的意境和氣氛。フ饈資敉ㄌ謇嘈偷男鶚賂棖,充分體現舒伯特藝術歌曲其伴奏部分的音樂形象和獨立作用,當歌唱者演唱其藝術歌曲時對器樂伴奏(鋼琴)應認真理解、感知,必須深刻理解、細心衡量這些美感的尺度,歌唱的音樂美感表現才能全方位的符合藝術歌曲音樂美學的要求,從而能準確理解、規范和把握藝術歌曲音樂情感表現的尺度。

    3.民歌的民俗性

    ッ窀璧墓餐特點是:簡明精煉,質樸無華,曲詞順暢,有著濃郁的地方風格和可親的鄉土氣息,篇幅一般不大,但邏輯嚴密,能體現一個民族現實生活的價值。一個民族的民歌與該民族的地理環境、人文歷史、生活習俗等有很大關系,不同民族都有自己民族獨特的民俗性,因此,民間歌曲都有各自不同的聲樂表達方式和情感韻味的表現形式。同藝術歌曲相比,民歌的情感表現可以在一條樸素單一的音樂旋律上完美展現出來。

    ダ如,我國的民族風格色彩是南方偏于柔美細膩,如江南民歌《茉莉花》,具有濃郁江南民歌韻味的歌曲,旋律流暢,優美抒情,清新雅致,表現了一位少女對生活的炙熱情感和少女的含蓄恬抒,頗有江南水鄉的詩情畫意般。而我國北方的民歌則較為剛健豪放。如《牧歌》展現在人們面前的是一幅遼闊壯麗的畫卷:藍藍的天空,一望無際的草原,白云下的無數羊群,表現了游牧民族熱愛生活、無拘無束的豪放情懷。

    民歌的民俗性還體現在地方俗語在歌詞中的運用和演唱的方言色彩,取消了不同民族或地方語言的音調作用,也就取消了不同民族或地域聲樂藝術的不同風格與色彩的表現。例如《長沙山歌》,歌詞是:"郎在那外間打山歌,姐在那房內織綾羅,我不曉得禾只個上屋,下屋,嶺前,坳背,巧娘,巧爺,生出咯樣聰明伶俐的崽喲,打出咯樣干干凈凈,索索利利,漂洋過海,鉆天入地的好山歌,打得那鯉魚子鉆不得水,打得黃牛子滾下坡,我綾羅子不織聽山歌。娘罵女你咯只死妖婆,你為何綾羅不織聽山歌,郎的山歌聽不得,他要打得你去把他做堂客。叫聲媽媽你莫罵我,你老年輕頭里也愛聽山歌,你不聽山歌又禾得有我,我不聽山歌又禾只有外孫伢子喊你做外婆。"歌詞中不少詞匯如"不曉得","禾只個","咯樣","崽","堂客"等字里行間浸透了長沙方言的韻味,是湘方言口頭語的鮮明表現,而拖腔拉音的旋律節奏正是湘民歌民俗性的體現。

    ヒ隕媳收嘰雍旯鄣氖詠親匪萘松樂藝術情感表現的歷史發展軌跡,了解了聲樂藝術的審美標準從歌手至上、聲音唯美到寓情于聲、獨具特色聲情并茂的發展過程。同時,為了避免聲樂表演中的情感表現的一般化現象,重點闡釋了歌劇詠嘆調的戲劇性、藝術歌曲的文學性和民歌的民俗性,它們既是聲樂情感表現的衡量標準,也是聲樂藝術表演者成功與否的關鍵。

    ピ鶉偽嗉:陳達波

    ゲ慰嘉南祝

    ァ1〕金衛國.西方聲樂體裁的歷史演變與形式含量的增長〔J〕.載《中國音樂學》2004年2期

    ァ2〕李兆國.試析美國人的時這觀在美國文化中的投影〔J〕.《聊城師范學院學報:哲學社會科學版》2000年3期

    ァ3〕呂曉紅.談談德奧藝術歌曲〔J〕.《 自貢師范高等??茖W校學報》2003年18卷2期

    ァ4〕姚小蘭.歌唱情感的表達〔J〕.《藝海》2005年2期

    ァ5〕尚家驤.歐洲聲樂發展史〔J〕.載《華東出版社》2003年第一版

    ァ6〕于潤楊.西方音樂通史》〔J〕.載《上海音樂出版社》2001年5月第一版

    ァ7〕李維渤:《西洋聲樂發展概略〔J〕.載《世界圖書出版西安公司出版公司》1999年12月第一版

    ァ8〕連波.國樂飄香〔J〕.載《人民音樂出版社》2001年7月北京第一版

    ァ9〕金衛國.西方聲樂體載的歷史演變與形式含量的增長〔J〕.《中國音樂學》2004年2期

    ァ10〕余篤剛.聲樂藝術美學〔J〕.載《人民音樂出版社》2005年10月第一版

    Historical Development and Measurable Standardof Emotion Expression of Vocal Music

    篇5

    心理學家的研究發現:無聲語言所顯示的意義要比有聲語言多得多,而且更加深刻。對此,有這樣一個公式:信息的傳遞=7%言語+38%語音+55%表情。

    所以,一名優秀的醫生,不僅要語言表達流暢,而且要精心設計自己的非語言體系,讓肢體語言自然、流暢、合理地表達出無聲的意涵,襯托出語言背后的無窮魅力。

    肢體語言是給人的

    第一印象

    在某種特殊情況下,肢體語言不但可以單獨使用,甚至還可以表達出有聲語言難以表達的思想感情,直接代替自然有聲語言。

    廣泛性:

    與有聲語言配合默契

    肢體語言的使用簡便快捷、靈活自由。只要人們張口說話,都會有意或無意地運用肢體語言來傳情達意,交流信息。

    有時,肢體語言甚至先于自然有聲語言,在接受者的心目中形成第一視覺形象,直接影響自然有聲語言的表達效果;有時,說話人在不開口的情況下,單純運用肢體語言,也能傳達一定的信息。

    有時候,患者在問醫生問題的時候,有的醫生頭都不抬,只是用一根手指,不耐煩地在臺板下壓著的文字上急促地點擊幾下――這樣的肢體語言,就是告訴患者:我忙著呢!你自己看!不是說過很多次了嗎?你怎么還不懂啊?

    在醫生與患者的交談中,幾乎沒有只運用自然有聲語言而不運用肢體語言的。它總是與自然有聲語言配合默契,協調一致,相輔相成,相得益彰。

    直觀性:

    人體圖像更形象

    有聲語言直接訴諸于人的聽覺器官,不具有視覺的形象可感性;而肢體語言則不同,它以靈活多變的表情、動作、體姿構成一定的人體圖像來表情達意,交流信息,直接訴諸于人的視覺器官,具有形象直觀的特點。

    如形容物體的大小,用手勢來比劃,對某事物表示贊成或反對,采用點頭或搖頭的方式等,就具有鮮明的形象直觀性。

    患者在問醫生具體關于病情的相關問題的時候,醫生可以借助肢體語言,讓問題的表達更加直觀、形象、生動,從而打消患者的顧慮。用手比劃一下,患者可以知道未來的創口究竟有多大。用手示意一下球體的大小,可以形象地傳達病灶的危險性,讓患者充分知情,而不要一味的猜測,惴惴不安。

    對應性:

    互動更協調

    肢體語言不但要與有聲語言協調配合,而且交談雙方,要協調配合,雙向交流,才能達到交談的目的。

    美國著名人類學家霍爾曾指出這種人類交際的常見現象:一個人傾聽別人說話時,總會望著對方的臉,尤其是他的眼睛;為了表示注意,聽話者會輕輕地點頭,或者說“嗯”、是的,如果哪句話他深表贊同,點頭就點得很深;如果感到懷疑,他就會揚起或皺起眉頭來,或者嘴角向下拉;要是不想再聽下去,就會將身子挪一挪,把腿伸一伸,或者移開視線,不再注視說話人等等。以上說的種種現象,正是對應性的表現。

    所以,當患者在向醫生陳述病情的時候,醫生切忌頭都不抬,而是應該看著患者,并以同理心仔細呼應患者的表達。這既是對患者的尊重,也是很好的路徑去察覺患者的未發之音。尤其是通過面部表情,可以傳達對患者的認可、顧慮,以及疑惑、追問,從而更好地與患者交流。

    依賴性:

    與有聲語言相輔相成

    肢體語言對有聲語言和具體言語環境的依存性,決定了它表意的多義性。離開了自然有聲語言,離開了一定的言語環境,肢體語言在當時特定的含義就不明確,就難于辨析和領會。

    患者,在醫生面前,屬于絕對的弱勢群體。出于對疾病的恐懼和擔心,又囿于專業知識的缺乏,患者往往渴望醫生給予更多的關注、關懷和支持、鼓勵。有的醫生明明成竹在胸,但是,沉默不語,或者偶爾發聲,只言片語,那么,患者就會更加焦慮不堪。如果我們的醫生善于表達,充分告知,輔助于強有力的肢體語言,比如,有力的揮手、堅定的握拳、雙手自上而下的下壓……就會讓患者信心滿滿,精神大振。

    肢體語言透露出的

    秘密

    醫生在與患者交談時,都會自覺或不自覺地用眼睛、面孔、身體和態度來表達自己的真正感覺,這就是肢體語言實現的過程。

    握手是一種肢體語言

    一個人的身體語言反映一個人的感覺,而恰到好處地用力握手對交談也至關重要。握手的方式,往往在不知不覺向別人透露不少你自身的秘密。

    目光是一種肢體語言

    握手,是肢體語言的一種,然而不管和對方是輕輕相握還是緊緊相握,眼睛卻決定著握手的性質。也就是說,目光更能表達出你交談的意圖。醫生和藹的目光,是醫者真摯心靈的自然投射,讓患者及其家屬充分地感到你的尊重、寬容和教養有素。

    微笑是一種肢體語言

    人們常贊美蒙娜麗莎的微笑,說她具有永恒的魅力。那么,她的魅力究竟在哪兒?蒙娜麗莎畢竟只是一張畫。她永遠不會開口,誰也不能知道她會說些啥。然而,她的微笑,她的眼神和表情卻一直在不停地“說話”。廣義而言,笑容都是美的、好的,因此即使一個天生嚴肅的人也可以通過訓練成為一個愛笑的人。

    善用體姿語言

    提升自我魅力

    體姿語言,是利用人的身體姿勢變化來傳情迭意的肢體語言。體姿語言包括站姿、坐姿、步姿、蹲姿、臥姿等。這里我們主要分析一下站姿、坐姿的選擇,來提升醫生的專業權威性,獲得患者的認同。

    說話時的站姿

    站姿,是身軀站立起來說話的姿態。主要通過肩、腰、腿、腳等動作的變化來傳情達意。

    如果站著和患者交流,醫生必須自信滿滿,體現出職業的權威性,不能過于放松、神情倦怠、甚至過于嘻哈、休閑、缺乏專業性。

    通常的情況是:兩腿站直,胸部挺起,雙手自然下垂,雙目平視,表明精神振作,充滿自信。如果將雙手自然下垂,改成背后相交,就更顯得精神飽滿而有氣勢;兩腿略屈,兩腳稍微分開,身體重心不斷由這只腳移到另一只腳,胯骨放松,會顯得輕松自如,神態自若;兩腿分開,上身挺直,雙手叉腰,是極端自信的姿勢。

    說話時的坐姿

    更多的時候,尤其是門診醫生,是坐著和患者交流。

    篇6

    Abstract:Drug target discovery and verification is not only the first step of investigation of new drug, but also one of the most important factors in drug screening and directional synthesis. With the fast development of genomics, proteomics, bioinformatics and the advancement of new techniques, such as RNA interference and bacteriophage display, the discovery and verification of drug target is changing with every passing day. In the present paper, the development and successful cases of drug discovery and verification were reviewed.

    Key words: Drug target;Target discovery;Target verification

    藥物靶標是尋找藥物的基礎,在過去的幾個世紀中,人們很大程度上是依賴目前已知的五百多個藥物靶標來發現藥物?;蚪M研究表明,人類有3~4萬個基因和更多的蛋白質,其中許多蛋白質是控制人類疾病的潛在的藥物靶點,因此至少有 9/10 的藥物靶點蛋白尚未被發現。發現并驗證藥物新靶標對闡明疾病原因、藥物作用機制具有重要意義,是產生“重磅炸彈”式創新藥物的源頭。近年來,隨著基因組學、蛋白組學、生物信息學的快速發展,以及RNA干擾、噬菌體展示等新興技術的出現,新的藥物靶標搜尋和驗證方法不斷出現。因此,本文擬從基因水平、轉錄水平和蛋白水平,就藥物靶標發現和驗證技術的研究進展作一綜述。

    1基因水平的藥物靶標發現和驗證

    1.1從基因數據庫中搜尋藥物靶標20世紀90年代以來,表達序列標簽(expressed sequence tag,EST)數據庫被廣泛應用于新基因搜尋,如成功搜尋到了組織蛋白酶K 和阿立新受體等[1]。相對于EST 數據庫,人類基因組數據庫的序列信息更為完整,但它不能提供不同組織的表達信息,因此人們開始將EST 數據庫與基因序列數據庫結合起來搜索新的藥物靶標。2001年,3個不同研究小組分別應用不同方法,以H3 受體為參照,利用BLAST,FAST-PAN 和TFAST 程序,搜索到5 種新的H4 基因,這些基因都以標準分子生物學方法確認,可作為疾病治療候選藥物靶標。

    1.2基因芯片技術基因芯片技術是在微小的基片表面集成了大量的分子識別探針,應用已知核酸序列作為探針與互補的靶核苷酸序列雜交,通過隨后的信號檢測進行定性與定量分析。基因芯片技術可以同時篩選、鑒別藥物或疾病相關基因,同時將這些基因與之功能聯系起來,因此在藥物靶標發現和驗證過程中是一個強有力的工具。但是由于芯片技術本身尚不十分成熟,在大量數據處理之后還需要大量的驗證工作;它反映的是mRNA 表達水平,而這未必與蛋白表達和功能一致,這使它在藥物靶標發現和驗證領域的應用受到一定限制。雖然如此,仍有許多成功應用的例子[2]。此外,基因芯片技術在阿爾茨海默病[3]、帕金森病[4]、惡性腫瘤[5]等疾病的藥物靶標研究中也發揮了很大作用。

    1.3基因敲除技術基因敲除(gene knockout)是指對一個結構已知、而功能未知的基因,從分子水平上設計實驗,將該基因去除,或用其它序列相近的基因取代,然后從整體觀察實驗動物,推測相應基因的功能?;蚯贸P驮诎l現基因功能和藥物作用新靶點的發現方面具有高度價值,同時也有助于確定藥物作用于特定靶點后的不良反應。目前,研究者正在系統地敲除鼠固有基因,并根據哺乳動物生理學特點確定它們在體內的功能,這一研究足已覆蓋幾乎所有的蛋白質和可用于藥物研究的基因家族,如離子通道、核激素受體、蛋白酶、磷酸二酯酶、激酶、磷酸酶及其它關鍵的酶類。同時,基因敲除技術也已廣泛應用于確證藥物在免疫[6]、動脈粥樣硬化[7,8]、高血壓病[9]、糖尿病[10]和腫瘤[11]等疾病中的作用靶點。

    2轉錄水平的藥物靶標發現和驗證

    2.1反義寡核苷酸技術反義寡核苷酸技術是利用反義寡核苷酸或修飾的寡核苷酸與特定靶mRNA 的一部分互補,抑制mRNA 的翻譯和剪接,從而抑制其編碼的蛋白質的表達。與基因敲除技術相比,盡管這種方法是一種更加省時省力的研究目的基因的強大工具,但還是有局限性,如體內應用時生物利用度有限,毒性較大。利用反義技術驗證藥物靶標也有一些成功的例子。如Jarvis等[12]利用磷酸化的反義序列作用于P2X3 受體的1100~1119 和1166~1185 位點序列,證明P2X3 受體是慢性炎癥和神經痛的重要角色,據此為靶點發現了一種小分子A-317491。Okabe 等[13]利用cDNA 芯片技術分析臨床肝癌樣品發現,DDEFL1(development and differentiation enhancing factor-like 1)基因在肝癌組織中表達異常,進而以硫代反義核酸抑制此基因的表達,結果腫瘤細胞的生長受到抑制,提示DDEFL1 可以作為肝癌的潛在治療靶點。

    2.2RNA干擾 (RNA interference, RNAi) 技術

    2.2.1RNA干擾用于發現新藥靶RNA干擾技術自誕生以來,已被廣泛應用于藥物靶標的發現與確證,這主要是由于該技術具有很多其他技術所無法比擬的優點:能特異高效地抑制基因表達,獲得去基因功能表型;僅需要少量的核酸序列信號,而且不被蛋白結構影響;siRNA 的合成和控制較基因敲除或其他方法簡單易行、資金消耗少、周期短,使得我們能夠在短時間內大規模篩選靶點,而且可以通過質粒或病毒載體表達的小發卡RNA(small hairpin RNA, shRNA)干擾目的基因,從而達到了在細胞水平和動物水平篩選藥物靶標的目的[14, 15]。研究表明,RNAi 技術能快速有效地鑒別藥物新靶點,RNAi 文庫的應用將為腫瘤和感染性疾病等的發病機制和治療研究提供理論依據和新的切入點。

    2.2.2RNA干擾輔助藥物靶點的確證高通量篩選技術可以發現和某種疾病相關的藥物靶點庫,然而要完全確定某蛋白在某種疾病中的重要性或某種蛋白在某種藥物發揮藥效中的作用,要看在動物模型內阻斷候選基因是否能減緩病癥或拮抗藥物原有的藥理活性,甚至在人體內驗證。鑒于近來向活體中轉染siRNA 技術的不斷提高,在動物模型中的應用也取得進展,于是利用RNAi 阻斷模擬人疾病狀態的動物模型中的基因的表達,對靶點進行深入的鑒定和評價呈現出潛在的優勢。Brummelkamp 等[16]通過逆轉錄病毒載體介導的shRNA 表達系統靶向K-rasV12 的mRNA,轉染人胰腺癌細胞,結果驗證了K-rasV12 是胰腺癌中一個很好的抗腫瘤藥物靶點,同時也說明RNAi 可以驗證藥物篩選中候選靶點在活體內的功能,為鑒定候選靶點最終是否能作為新藥靶提供了有力的證據。

    3蛋白水平的藥物靶標

    發現與驗證人類基因組計劃大規模測序為創新藥物的研究提供了前所未有的機遇,但是生命活動是通過DNA 到RNA 到蛋白質來實現的。藥物作用的基礎也是蛋白質而非 RNA/ DNA [17]。蛋白水平的藥物靶標研究具有更加重大的意義。迄今,已發現的大部分藥物靶標都是來自蛋白水平研究。蛋白水平藥物靶標的研究方法也是層出不窮,人們不僅通過蛋白質組學[18, 19]、蛋白芯片[20]、噬菌體展示[21, 22]等技術大規模篩選藥物靶標,而且還利用親和色譜[23~25]、酵母三雜交系統[26,27]、磁性納米探針技術[28]等發現了很多天然活性化合物或其衍生物的作用靶點。

    3.1親和色譜技術在藥物靶標研究的漫長發展歷程中,親和色譜技術是最經典的一種技術。由于它具有能直接分離各種組織、細胞中的天然狀態蛋白、操作方便、穩定性強等優點,長期以來被廣泛應用于藥物靶蛋白的分離。迄今為止,親和色譜法已成功應用于FK506[23]、環孢菌素[24]等多種藥物靶蛋白的搜尋。常用的親和色譜法包括固相洗脫、藥物競爭法等,如果親和柱(柱材——藥物)與靶蛋白解離過慢,則很難洗脫下來,須制備無活性結構類似藥物的對照柱;如果藥物溶解性差,蛋白會隨不溶的藥物沉淀,則無效。2006-05報道的一種稱為“系列親和色譜法”的改良親和色譜法,則不受藥物溶解性、配基-蛋白復合物解離速度的影響,適合于溶解性較差的化合物,該方法已經甲氨喋呤、FK506 等藥物的靶點尋找上得到了驗證[25]。作者也采用系列親和色譜法首次發現了麥冬活性成分——魯斯可皂苷元的特異性結合蛋白(另文發表)。

    3.2噬菌體展示技術噬菌體展示技術是一種有效的藥物靶點篩選工具,它可以將外源蛋白或多肽呈現在噬菌體表面,利用外源蛋白或多肽與待篩選藥物的特異性親和作用,通過吸附-洗脫-擴增的篩選富集過程,將表達與藥物特異性結合的外源蛋白或多肽的噬菌體大量富集,然后通過測序分析即可得到與藥物特異性結合的外源蛋白或多肽。這一技術將基因型和表型、分子結合活性和噬菌體的可擴增性巧妙的結合起來,是一種高效的篩選體系,同時也是一種探討受體和配體之間相互作用的結合位點、尋求高親合力結合配體的有力工具。據報道,Rodi[21]等利用噬菌體展示技術,對抗癌藥物紫杉醇進行篩選,獲得了紫杉醇在體內的藥物作用的靶點Bcl-2 蛋白。Jin[22]等利用噬菌體展示技術,通過固定化阿霉素篩選T7噬菌體人類肝臟的cDNA 文庫,得到了阿霉素的靶點蛋白hNopp140。

    3.3三雜交系統三雜交系統(three-hybrid system)是近幾年在酵母雙雜交技術的基礎上發展的由活性小分子鑒定靶蛋白的方法。其基本原理與酵母雙雜交類似,只是在“鉤”與“魚”之間加了“餌”構成三雜交中的3個組分:其中的“餌”是一種修飾過的活性小分子,是由活性小分子和配體A 連接而成:“鉤”是由配體A 的受體蛋白與DB 融合而成;“魚”是由cDNA 庫中的蛋白融合在AD 上構成。當待篩選靶組織的cDNA 庫中的某一蛋白與小分子相互作用時報告基因的轉錄被啟動,這時細胞可被明顯檢測。Becker 等用周期素依賴性蛋白激酶(CDK)抑制劑作為餌,采用該方法從人cDNA 庫中篩選到多種CDK抑制劑的靶蛋白[26]。此外,在哺乳動物組織細胞中采用三雜交系統篩選活性小分子的靶蛋白也已獲得成功[27]。

    3.4蛋白芯片技術蛋白質芯片是一種類似于基因芯片的高通量篩選方法。利用蛋白質芯片技術可以從正常細胞和病變細胞的蛋白質的變化中發現疾病相關蛋白,這些相關蛋白經研究篩選后可能成為藥物的新靶點。Fong 等[20]借助蛋白質芯片發現TROP2 將成為口腔鱗狀上皮細胞癌的診斷治療和抗口腔鱗狀上皮細胞癌藥物研究的新靶點。

    4展望

    雖然目前確定的藥物靶點還很少,藥物靶標的發現與驗證的各種方法也存在種種不足,毫無疑問人類基因組框架圖的繪制完成,功能基因組研究的深入,為發現更多藥物靶標提供了可能,這將有利于藥物發現和開發的進程。同時,生命科學與化學、物理學、信息學等其他學科進一步的交融,將為各種技術方法不斷發展完善奠定基礎。相信隨著功能基因組研究的深入及生物技術的快速發展,人類將能夠更加明確地闡明疾病的病理生理機制、藥物治療作用及其毒性作用的分子機制,發現更多可以治療疾病的藥物作用靶點或靶點組合,進而發現更好的藥物,提高人類的生活質量。

    參考文獻

    [1]Sakurai T, Amemiya A, Ishii M, et al. Orexins and orexin receptors: a family of hypothalamic neuropeptides and protein-G coupled receptors that regulate feeding behaviour [J]. Cell, 1998, 92 (4): 573.

    [2]Jayapal M, Melendez AJ. DNA microarray technology for target identification and validation [J]. Clin Exp Pharm Physiol, 2006, 33 (5):371.

    [3]鄭越, 程肖蕊, 周文霞, 等. DNA微陣列技術在阿爾茨海默病及其防治藥物研究中的應用[J]. 生物技術通訊, 2007, 18 (2): 320.

    [4]Grunblatt E, Mandel S, Maor G, et al. Gene expression analysis in N-methyl-4-phenyl-1, 2, 3, 6-tetrahydropyridine mice model of Parkinson′s disease using cDNA microarray: effect of R-apomor-Phine [J]. J Neurochem, 2001, 78 (1): 1.

    [5]Stam RW, den Boer ML, Meijerink JP, et al. Differential mRNA expression of Ara-C-metabolizing enzymes explains Ara-C sensitivity in MLL gene-rearranged infant acute lymphoblastic Leukemia [J]. Blood, 2003, 101(4): 1270.

    [6]Thal MA, Carvalho TL, He T, et al. Ebf1-mediated down-regulation of Id2 and Id3 is essential for specification of the B cell lineage [J]. Proc Natl Acad Sci. USA, 2009, 106 (2): 552.

    [7]Tanaka R, Miwa Y, Mou K, et al. Knockout of the l-pgds gene aggravates obesity and atherosclerosis in mice [J]. Biochem Biophys Res Commun, 2009, 378 (4): 851.

    [8]Cao RY, St. Amand T, Gr?bner R, et al. Genetic and pharmacological inhibition of the 5-lipoxygenase/leukotriene pathway in atherosclerotic lesion development in ApoE deficient mice [J]. Atherosclerosis, 2008, 203 (5): 395.

    [9]Sun Z, Cade R, Zhang Z, et al. Angiotensinogen gene knockout delays and attenuates cold-induced hypertension [J]. Hypertension, 2003, 41(2):322.

    [10] Chen WS, Peng X, Wang Y, et al. Leptin deficiency and beta-cell dysfunction underlie type 2 diabetes in compound Akt knockout mice [J]. Mol Cell Biol, 2009, 29 (11): 3151.

    [11]Rao CV, Lei ZM. Consequences of targeted inactivation of LH receptors [J]. Mol Cell Endocrinol, 2002, 187 (1): 57.

    [12] Jarvis MF, Burgard EC, McGaraughty S, et al. A-317491, a novel, potent and selective non-nucleotide antagonist of P2X3 and P2X2/3 receptors reduces chronic inflammatory and neuropathic pain in rat [J]. Proc Natl Acad Sci USA, 2002, 99 (26):17179.

    [13]Okabe H, Furukawa Y, Kato T, et al. Isolation of development and differentiation enhancing factor-like 1 (DDEFL1) as a drug target for hepatocellular carcinomas [J]. Int J Oncol, 2004, 24 (1): 43.

    [14]Brummelkamp TR, Bernards R. New tools for functional mammalian cancer genetics [J]. Nat Rev Cancer, 2003, 3 (10): 781.

    [15]Hannon GJ, Rossi J. Unlocking the potential of the human genome with RNA interference [J]. Nature, 2004, 431 (3): 371.

    [16]Brummelkamp TR, Bernards R, Agami R. Stable suppression of tumorigenicity by virus-mediated RNA interference [J]. Cancer Cell, 2002, 2 (3):243.

    [17]Latterich M, Abramovitz M, Leyland-Jones B. Proteomics: New technologies and clinical applications [J]. Eur J Cancer, 2008, 44: 2737.

    [18]Celis JE, Rasmussen HH, Vorum H, et al. Bladder squamous cell carcinomas express psoriasin and externalize it to the urine [J]. J Urol, 1996, 155 (6): 2105.

    [19]Zhou C, Nitschke AM, Xiong W, et al. Proteomic analysis of tumor necrosis factor-alpha resistant human breast cancer cells reveals a MEK5/Erk5-mediated epithelial-mesenchymal transition phenotype [J]. Breast Cancer Res, 2008, 10 (6): R105.

    [20]Fong D, Spizzo G, Gostner JM, et al. TROP2: A novel prognostic marker in squamous cell carcinoma of the oral cavity [J]. Mod Pathol, 2008, 21 (2): 186.

    [21]Rodi DJ, Janes RW, Sanganee Hitesh J, et al. Screening of a library of phage-displayed peptides identifies human Bcl-2 as a taxol-binding protein [J]. J Mo Biol, 1999, 285 (1):197.

    [22] Jin T, Yu J, Yu Y. Identification of hNopp140 as a binding partner for doxorubicin with a phage display cloning method [J]. Chem Biol, 2002, 9 (2): 157.

    [23]Kuramochi K, Miyano Y, Enomoto Y, et al. Identification of small molecule binding molecules by affinity purification using a specific ligand immobilized on PEGA resin [J]. Bioconjugate Chem, 2008, 19 (12): 2417.

    [24]Tanaka A. Identification of the specific binding proteins of bioactive small compound using affinity resins [J]. Methods Mol Biol, 2009, 577: 181.

    [25]Yamamoto K, Yamazaki A, Takeuchi M, et al. A versatile method of identifying specific binding proteins on affinity resins [J]. Anal Bioch, 2006, 352 (1): 15.

    篇7

    Abstract: Chronic kidney disease(CKD), characterized by high incidence, poor health outcomes and high treatment costs, imposes a huge burden on individuals and society. Renal tubulointerstitial fibrosis and renal medulla hypoxia are believed to be the main causes of CKD progression. At present, ultrasound-guided renal biopsy is the gold standard for the evaluation and diagnosis of renal fibrosis. However, it is difficult to carry out follow-up monitoring in clinical practice because it is an invasive test with certain side effects and poor repeatability. MRI can provide information about tissue structure noninvasively, and advances in MRI functional imaging techniques offer promise for unique insights into renal function and fibrosis severity, but its potential to assess fibrosis and inflammation in diseased kidneys remains unclear. This paper reviews the research progress of functional magnetic resonance imagingin the diagnosis of chronic kidney disease.

    Keyword: functional magnetic resonance imaging; chronic kidney disease; renal fibrosis;

    慢性腎臟病目前已成為影響全球約10%人口的主要全球公共衛生問題,每年造成數百萬人死亡,并且數十萬人需要通過透析來維持生命[1]。因此,讓慢性腎病引起人們的足夠重視,并且做到早診斷,早治療,防止病情惡化,改善患者預后是非常必要的。

    1 、慢性腎病的病理學基礎

    大量研究表明,腎間質纖維化是多種腎臟疾病進展到慢性腎病的共同途徑和病理基礎[2,3],在腎間質纖維化過程中,首先組織因受損啟動了腎臟纖維化,而纖維化會導致腎小管萎縮,毛細血管進行性減少,導致腎臟灌注減低[4,5],導致血流減少和向腎臟實質的腎小管上皮細胞的氧氣輸送減少,又可以進一步促進纖維化[6]。因此,毛細血管丟失不僅是纖維化腎的關鍵特征,而且是與纖維化相關的進一步損傷的驅動因素[7,8]。隨著腎單位的瘢痕形成,沉積的細胞外基質會增加[9],從而增加腎臟的僵硬度。

    有研究表明,在腎間質纖維化形成的慢性進展過程中,患者早期可以沒有明顯的臨床表現,甚至在腎小球纖維化時,腎小球濾過率(glomerular filtration rate,GFR)仍可維持數年,直到腎小球間質纖維化的發展,最終導致GFR下降[10],因此在腎小球纖維化發展為嚴重的腎損傷之前,早期發現纖維化并定量評價纖維化程度在理論上可以早期評估患者病情進展的風險,由于許多新的抗纖維化藥物正在開發中,這種早期的鑒定可能在患者發展為明顯的腎功能障礙之前,給予藥物干預,早期治療,有助于延緩腎纖維化的發生及發展[11],改善患者預后,提高患者生存質量。

     

    2 、慢性腎病診斷金標準

    腎活檢是目前用組織學技術對腎纖維化進行特異性診斷和分期的金標準[12],但因其具有創傷性,可重復性差,不適用于疾病進展或治療反應的長期監測,盡管近年來這種檢查技術變得更加安全,但并發癥和局限性依然存在。首先,腎臟穿刺活檢有出血的風險,嚴重者還可能會產生動靜脈瘺和腎周軟組織感染,甚至死亡[12,13]。其次,因為活檢樣本的直徑只有2 mm,即使是“滿意的”樣本也幾乎不包括髓質,因此腎活檢分析也必然受到抽樣偏差的影響[14]。

    考慮到這些安全性和取樣問題,患者往往不愿接受活檢,當非侵入性檢測不能提供診斷時,臨床醫生往往得不到有助于臨床診療決策的關鍵信息。因此盡管活檢是目前評估腎纖維化的金標準,但從臨床和研究的角度來看,它都是不完善的。很顯然,安全、準確地評估全腎纖維化負擔的非侵入性新方法是必要的。

    3 、慢性腎病的MRI研究進展

    傳統的MRI通常無法實現組織纖維化成像,然而,結合對纖維化病理生理學的進一步理解,有學者使用釓對比劑增強MRI行心肌纖維化成像取得諸多成效[15,16],這也為MRI纖維化成像提供了可能性,然而,由于釓對比劑對腎功能障礙患者的風險,這些技術不能適用于腎臟[17]。值得注意的是,隨著磁共振功能成像技術的進展,其他無釓技術也已被開發出來,例如擴散加權成像(diffusion-weighted imaging,DWI)、動脈自旋標記成像(arterial spin labeling,ASL)、磁共振彈性成像(magnetic resonance elastography,MRE)、血氧水平依賴性磁共振成像(blood oxygenation level-dependent MRI,BOLD-MRI)以及磁化轉移成像等,有望改善無創地檢測腎臟內結構、功能和分子變化的能力。有幾篇文章評論了這些無創MRI技術在腎臟中的應用[18,19,20],包括Ebrahimi等[21]對腎臟功能MRI的精彩綜述,認識到微血管損傷和腎硬化對腎臟纖維化的重要性。

    3.1、 擴散加權成像

    DWI是一種能夠無創地探測到組織中自由水分子布朗運動的磁共振成像技術,通常用ADC來描述水分子的凈移動。腎間質纖維化的病理表現包括腎小管周圍微血管減少、細胞外間質中成纖維細胞的增殖以及基質沉淀,這些改變均有可能導致組織中水分子的擴散受限,從而減低ADC值。

    在動物模型和人類中的大量研究表明,與健康腎臟相比,患病腎臟的ADC值顯著降低[22]。目前的證據表明DWI對腎間質變化特別敏感,例如腎纖維化、細胞(炎性或腫瘤性)浸潤和水腫[23],腎纖維化核心活檢標本的纖維化百分率與ADC顯著相關[24]。近年來大量的研究顯示,CKD患者腎臟的ADC值與其腎纖維化量呈負相關[25],并且隨著慢性腎病患者腎功能的降低,腎臟的ADC值也明顯下降[26,27]。

    使用體素內不相干運動(intravoxel incoherent motion,IVIM)模型對擴散信號進行高級建模,分別估計擴散(ADC擴散)和灌注(ADC灌注)對總ADC值的貢獻[28,29],這種能力可能會極大地提高對擴散機制的理解。Feng等[30]和Deng等[31]利用IVIM-DWI評估2型糖尿病患者的早期腎功能變化,發現IVIM參數值在檢測早期腎臟變化中比白蛋白/肌酐比值更敏感。Mao等[29,32]用IVIM-DWI對于腎臟功能和CKD病理學的無創評估可能是可行的,尤其是在早期發現腎功能不全時。

    DWI的另一個延伸序列稱為擴散張量成像(diffusion t e n s o r i m a g i n g,DTI),使用各向異性分數(f r a c t i o n a l anisotropy,FA)來測量沿不同軸線的水的流動性。因此,理論上使用擴散張量成像有利于捕捉到水在特定方向運動的有序結構的破壞,例如大腦中的軸突或腎臟中的小管。基于這種功能,DWI已被廣泛應用于神經成像,特別是缺血性腦損傷的早期檢測和腫瘤成像[33,34]。有關腎臟的研究顯示,由于腎小管結構的存在,使得腎髓質內各向異性程度比腎皮質更高;使用DTI,無論GFR是否降低,CKD患者腎皮質及髓質的FA值明顯低于健康對照組,對腎小球病變及腎小管損傷行進量化評分顯示,FA與損傷評分呈負相關[24,35]。

    總之,DWI可能是所有類型CKD的首選成像技術,甚至在腎功能衰退之前,用于評估組織纖維化程度、預測功能演變和跟蹤治療過程中出現的微結構變化,這可以減少診斷和隨訪的腎活檢的數量[25]。為了提高DWI的特異性,將其與其他有前途的MRI (多參數MRI)相結合進行腎組織表征和隨訪,將有助于對正常和病變腎臟進行完整的形態學和功能評估。

    3.2 、腎臟血氧水平依賴MRI

    考慮到腎實質缺氧會引起一系列復雜的細胞因子和其他因素的激活,最終引起腎小管間質纖維化,導致腎功能進行性受損。利用這一現象,Ogawa等[36]用一種對血氧變化敏感的技術BOLD-MRI對腎臟進行成像,獲取圖像用來估計組織的含氧量,目前,BOLD-MRI已被廣泛驗證為腦氧合的一種測量方法[37]。Prasad等[38]首先在腎臟中進行了BOLD-MRI測試,結果顯示髓質的T2*信號低于皮質,這與髓質在近缺氧條件下工作的事實相符。另有研究[39]顯示糖尿病患者的腎皮質及髓質R2*信號均明顯高于正常對照組。髓質R2*信號與腎小球濾過率呈正相關,皮質R2*信號強度與e GFR呈負相關。髓質與皮質R2*值之比在糖尿病早期升高,隨著糖尿病腎病的加重而降低。Feng等[40]的研究表明髓質R2*值可能是一種新的更敏感的糖尿病腎病早期預測指標。同時,BOLD-MRI檢測到單純糖尿病期髓質缺氧,DTI未檢測到此期髓質定向擴散的變化,基于上述假設,筆者推測BOLD成像對早期腎功能改變的評估可能比DTI更敏感。

    3.3 、動脈自旋標記成像

    ASL通過磁標記動脈血液來測量組織灌注。由于腎臟較高的生理灌注,原則上腎臟是可以用磁共振動脈自旋標記技術進行灌注成像的理想臟器。ASL在動物[41]和人類[42]中的應用表明,與金標準的測量相比,該技術提供了合理的、可重復的腎皮質微血管血流估計。廣泛的研究表明,ASL對動脈狹窄或腎臟疾病的再循環是敏感的[43]。在CKD病人中,ASL顯示的微血管流速隨著e GFR不同程度減低而減低[44,45]??紤]到腎纖維化與毛細血管損失和微血管灌注受損有關,CKD中可見的ASL反映的血流減少可能是衡量全腎纖維化負擔的替代指標,也可能預測進展風險。一項糖尿病腎病的研究顯示[46],ASL血流量的MRI可以無創測量腎皮質組織灌注的減少,且隨著病程的進展,組織灌注減少。

    雖然腎臟ASL是一種具有腎間質纖維化的潛能,還有一些局限性需要解決。首先,測量結果受到低信噪比和相應的低分辨率的困擾,這限制了對皮質和髓質進行分別評估的能力,尤其是對皮質變薄的慢性損傷的腎臟。其次,ASL測量腎髓質灌注是困難的,因為髓質只接收總腎血流的10%,使得ASL信號通常比大腦皮層弱,那么要進行多次采集來改善信號測量,但這會延長掃描時間,使ASL對呼吸運動偽影更敏感。Nery等[47]應用背景抑制3D梯度自旋回波序列(a single-shot background-suppressed 3D gradient and spin-echo,3D-GRASE)可明顯改善ASL的運動偽影,使其可應用于患有重度腎病的兒童。

    3.4、 磁共振彈性成像

    腎纖維化的另外一個重要特征經常被忽視,那就是腎臟硬度的增加。器官硬化是由柔軟的腎實質細胞被剛性纖維基質所替代[48],并通過這些基質膠原纖維的交聯進一步增強;這種器官硬化可以通過MRE來捕捉,得到組織剛度和感興趣區域彈性可視化的定量值[40]。Rouvière等[50]首次顯示了MRE在健康成年人中的可行性和可重復性。MRE已經是一種成熟的肝纖維化成像技術,已被證明可以準確反映活檢來源的肝纖維化測量結果[51],MRE用于腎臟的可行性已在國內外多項研究中得到證實。在一項動物研究中,MRE被用于檢測豬慢性腎動脈狹窄引起的髓質纖維化,研究結果表明隨著腎組織纖維化的增加,MRE測得髓質剛度值也明顯增加[52]。然而Brown等[46]對CKD患者腎臟MRE的一項研究顯示MRE的剛度會隨著CKD的惡化而降低,這很可能與較低的血液流速引起的組織膨大有關。

    雖然這些初步研究結果令人鼓舞,但仍存在一些問題,與相對同質的肝臟不同,腎臟在結構上非常不均勻,因此,從活檢取樣點測量的硬度指標是否與活檢獲得的纖維化評分有更好的相關性需要進一步驗證。

    3.5 、其他成像方法

    過度的組織瘢痕形成或纖維化是導致終末期腎臟疾病的關鍵因素,磁化轉移成像(magnetization transfer-MRI,MT-MRI)利用附著在基質蛋白等大分子上的水質子(與自由水分子的質子相比)的不同磁性能,提供有關組織大分子組成的間接信息。Jiang等[20]應用該技術對進行的腎動脈狹窄手術的小鼠在基線及術后不同時段進行檢測,結果顯示,腎動脈狹窄的腎臟,磁化轉移率顯示從基線到術后6周逐漸增加(皮層和髓質分別增加13.7%和21.3%),同時還伴有腎臟容量、灌注、血流量和氧合的逐漸減少,并且患側腎臟的磁化傳遞比圖顯示與離體標本測得的纖維化程度有良好的相關性;另外,該研究團隊進一步改進研究方案,在膠原體膜中選擇合適的MT參數,并將其應用于體內磁化轉移成像,研究結果證實了MTI在評估豬腎動脈狹窄性腎臟纖維化中的作用,研究顯示無論腎皮層還是髓質,在頻率為600 Hz和1000 Hz時的磁化轉移率均與天狼星紅染色法測定的腎間質纖維化呈良好的相關性[53]。

    T1 mapping、T2 mapping:前面筆者闡述的腎纖維化的成像方法主要集中在MRI功能成像模式上,即圖像要么揭示腎臟的微血管灌注、氧合情況,要么就是腎臟硬化的改變,而目前,基于MRI的技術也在發展中,以檢查纖維化組織的其他特性。有一項動物實驗表明[54],慢性腎病模型中腎纖維化程度與T1值呈良好的正相關性。

    分子MRI也是檢測和評估器官病變的先進MRI工具。最近的一項研究取得了顯著進展。Sun等[43]使用彈性蛋白磁共振特異性顯像劑(elastin-specific magnetic resonance imaging agent,ESMA)進行無創性分析腎纖維化,彈性蛋白在健康的小鼠、大鼠和人的腎臟中幾乎不表達,而在進行性CKD的皮質、髓質和血管周圍區域中過表達;其次,在已經建立的纖維化模型給予伊馬替尼進行治療,發現治療后ESMA分子成像獲得的信號強度顯著低于對照組小鼠,說明彈性蛋白成像可以對腎纖維化進行重復和可重復的評估,從而準確記錄抗纖維化治療的效果。

    4 、小結

    間質纖維化是慢性腎損傷的主要原因,目前主要靠腎活檢組織學來對其評價,功能磁共振成像克服了活檢分析的創傷性和取樣偏差限制,為腎纖維化評估的無創成像提供了廣泛的可能性。以上筆者已經強調了幾種基于MRI的技術,它們可以展示腎臟纖維化的兩個重要病理特征:毛細血管減少和腎硬化,但每種方法仍需要進一步的發展和驗證。到目前為止,實驗數據顯示MR結果與腎纖維化和腎功能有良好的相關性,尤其是DWI可在一定程度上反映腎間質纖維化的程度,ASL及BOLD-MRI則與腎間質氧分壓則有很好的相關性;但是這些研究成果都處于基礎階段,還不能適用于臨床,這需要繼續發展和改進MRI腎臟成像方法來評估腎纖維化,早日將其轉化為臨床成果。

    利益沖突:無。

    參考文獻

    [1] Chevalier RL. Evolutionary nephrology. Kidney Int Rep, 2017, 2(3):302-317.

    [2] Szeto SG, Narimatsu M, Lu M, et al. Yap/taz are mechanoregulators of tgf-β-smad signaling and renal fibrogenesis. J Am Soc Nephrol, 2016,27(10):3117-3128.

    [3] Brown CA, Elliott J, Schmiedt CW, et al. Chronic kidney disease in aged cats:Clinical features, morphology, and proposed pathogeneses.Vet Pathol, 2016, 53(2):309-326.

    [4] Tanaka T. A mechanistic link between renal ischemia and fibrosis. Med Molecul Morphology, 2017, 50(1):1-8.

    [5] Romagnani P, Remuzzi G, Glassock R, et al. Chronic kidney disease.Nat Rev Dis Primers, 2017, 55(Suppl 2):S116-117.

    [6] Fine LG, Norman JT. Chronic hypoxia as a mechanism of progression of chronic kidney diseases:From hypothesis to novel therapeutics. Kidney Int, 2008, 74(7):867-872.

    [7] Hayer MK, Price AM, Liu B, et al. Diffuse myocardial interstitial fibrosis and dysfunction in early chronic kidney disease. Am J Cardiol,2018, 121(5):656-660.

    [8] Guzzi F, Cirillo L, Roperto RM, et al. Molecular mechanisms of the acute kidney injury to chronic kidney disease transition:An updated view. Int J Mol Sci, 2019, 20(19):4941.

    [9] Breyer MD, Susztak K. The next generation of therapeutics for chronic kidney disease. Nat Rev Drug Discov, 2016, 15(8):568-588.

    [10] Schena FP, Gesualdo L. Pathogenetic mechanisms of diabetic nephropathy. J Am Soc Nephrol, 2005, 16(Suppl 1):S30-33.

    [11] Leung G, Kirpalani A, Szeto SG, et al. Could mri be used to image kidney fibrosis? A review of recent advances and remaining barriers.Clin J Am Soc Nephrol, 2017, 12(6):1019-1028.

    [12] Esposito V, Mazzon G, Baiardi P, et al. Safety and adequacy of percutaneous kidney biopsy performed by nephrology trainees. BMC nephrology, 2018, 19(1):14-15.

    [13] Redfield RR, McCune KR, Rao A, et al. Nature, timing, and severity of complications from ultrasound-guided percutaneous renal transplant biopsy. Transpl Int, 2016, 29(2):167-172.

    [14] Walker PD. The renal biopsy. Archives Pathology&Lab Med, 2009,133(2):181-188.

    [15] Kholmovski EG, Morris AK, Chelu MG. Cardiac mri and fibrosis quantification. Card Electrophysiol Clin, 2019, 11(3):537-549.

    [16] Ciep?ucha A, Trojnarska O, Kociemba A, et al. Clinical aspects of myocardial fibrosis in adults with ebstein's anomaly. Heart Vessels,2018, 33(9):1076-1085.

    [17] Layne KA, Dargan PI, Archer JRH, et al. Gadolinium deposition and the potential for toxicological sequelae-a literature review of issues surrounding gadolinium-based contrast agents. Br J Clin Pharmacol,2018, 84(11):2522-2534.

    [18] Grenier N, Merville P, Combe C. Radiologic imaging of the renal parenchyma structure and function. Nat Rev Nephrol, 2016, 12(6):348-359.

    [19] Zhang J, Zhang LJ. Functional mri as a tool for evaluating interstitial fibrosis and prognosis in kidney disease. Kidney Dis(Basel,Switzerland), 2020, 6(1):7-12.

    [20] Jiang K, Ferguson CM, Ebrahimi B, et al. Noninvasive assessment of renal fibrosis with magnetization transfer mr imaging:Validation and evaluation in murine renal artery stenosis. Radiology, 2017, 283(1):77-86.

    [21] Ebrahimi B, Textor S, Lerman LO. Renal relevant radiology:Renal functional magnetic resonance imaging. Clin J Am Soc Nephrol, 2014,9(2):395-405.

    [22] Feng Q, Ma Z, Wu J, et al. Dti for the assessment of disease stage in patients with glomerulonephritis-correlation with renal histology. Eur Radiol, 2015, 25(1):92-98.

    [23] Wittsack HJ, Lanzman RS, Mathys C, et al. Statistical evaluation of diffusion-weighted imaging of the human kidney. Magn Reson Med,2010, 64(2):616-622.

    [24] Liu Z, Xu Y, Zhang J, et al. Chronic kidney disease:Pathological and functional assessment with diffusion tensor imaging at 3t mr. Eur Radiol, 2015, 25(3):652-660.

    [25] Caroli A, Schneider M, Friedli I, et al. Diffusion-weighted magnetic resonance imaging to assess diffuse renal pathology:A systematic review and statement paper. Nephrology Dialysis Transplantation, 2018,33(Suppl 2):29-40.

    [26] Ding J, Chen J, Jiang Z, et al. Assessment of renal dysfunction with diffusion-weighted imaging:Comparing intra-voxel incoherent motion(ivim)with a mono-exponential model. Acta Radiologica, 2016, 57(4):507-512.

    [27] Emre T, Kili?kesmez?, Büker A, et al. Renal function and diffusionweighted imaging:A new method to diagnose kidney failure before losing half function. La Radiologia Medica, 2016, 121(3):163-172.

    [28] Togao O, Doi S, Kuroo M, et al. Assessment of renal fibrosis with diffusion-weighted mr imaging:Study with murine model of unilateral ureteral obstruction. Radiology, 2010, 255(3):772-780.

    [29] Mao W, Zhou J, Zeng M, et al. Intravoxel incoherent motion diffusionweighted imaging for the assessment of renal fibrosis of chronic kidney disease:A preliminary study. Magn Reson Imaging, 2018, 47:118-124.

    [30] Feng YZ, Chen XQ, Yu J, et al. Intravoxel incoherent motion(ivim)at 3.0T:Evaluation of early renal function changes in type 2 diabetic patients.Abdominal Radiol(New York), 2018, 43(10):2764-2773.

    [31] Deng Y, Yang B, Peng Y, et al. Use of intravoxel incoherent motion diffusion-weighted imaging to detect early changes in diabetic kidneys.Abdominal Radiol(New York), 2018, 43(10):2728-2733.

    [32] Mao W, Zhou J, Zeng M, et al. Chronic kidney disease:Pathological and functional evaluation with intravoxel incoherent motion diffusionweighted imaging. J Magn Reson Imaging, 2018, 47(5):1251-1259.

    [33] Sabour S, Batari H. Conventional MRI combined with dti for neonatal hyperbilirubinemia; methodological issues on diagnostic value. Pediatr Neonatol, 2018, 59(6):638-639.

    [34] Trip AK, Jensen MB, Kallehauge JF, et al. Individualizing the radiotherapy target volume for glioblastoma using DTI-MRI:A phase 0study on coverage of recurrences. Acta Oncol, 2019, 58(10):1532-1535.

    [35] Feng YZ, Ye YJ, Cheng ZY, et al. Non-invasive assessment of early stage diabetic nephropathy by dti and bold MRI. British J Radiol, 2020,93(1105):20190562.

    [36] Ogawa S, Lee TM, Kay AR, et al. Brain magnetic resonance imaging with contrast dependent on blood oxygenation. Proceed National Acad Sci, 1990, 87(24):9868-9872.

    [37] Eckardt KU, Bernhardt WW, Weidemann A, et al. Role of hypoxia in the pathogenesis of renal disease. Blood Purification, 2003, 21(3):253-257.

    [38] Prasad PV, Edelman RR, Epstein FH. Noninvasive evaluation of intrarenal oxygenation with bold MRI. Circulation, 1996, 94(12):3271-3275.

    [39] Yin WJ, Liu F, Li XM, et al. Noninvasive evaluation of renal oxygenation in diabetic nephropathy by bold-MRI. Eur J Radiol, 2012,81(7):1426-1431.

    [40] Feng YZ, Ye YJ, Cheng ZY, et al. Non-invasive assessment of early stage diabetic nephropathy by DTI and bold MRI. Br J Radiol, 2020,93(1105):20190562.

    [41] Artz NS, Wentland AL, Sadowski EA, et al. Comparing kidney perfusion using noncontrast arterial spin labeling mri and microsphere methods in an interventional swine model. Investigative Radiol, 2011, 46(2):124-131.

    [42] Ritt M, Janka R, Schneider MP, et al. Measurement of kidney perfusion by magnetic resonance imaging:Comparison of MRI with arterial spin labeling to para-aminohippuric acid plasma clearance in male subjects with metabolic syndrome. Nephrol Dial Transplant, 2010, 25(4):1126-1133.

    [43] Sun Q, Baues M, Klinkhammer BM, et al. Elastin imaging enables noninvasive staging and treatment monitoring of kidney fibrosis. Sci Transl Med, 2019, 11(486):4865.

    [44] Heusch P, Wittsack HJ, Blondin D, et al. Functional evaluation of transplanted kidneys using arterial spin labeling mri. J Magnetic Reson Imaging, 2014, 40(1):84-89.

    [45] Artz NS, Sadowski EA, Wentland AL, et al. Arterial spin labeling MRI for assessment of perfusion in native and transplanted kidneys. Magn Reson Imaging, 2011, 29(1):74-82.

    [46] Brown RS, Sun MRM, Stillman IE, et al. The utility of magnetic resonance imaging for noninvasive evaluation of diabetic nephropathy.Nephrology Dialysis Transplantation, 2019, 23:66.

    [47] Nery F, De Vita E, Clark CA, et al. Robust kidney perfusion mapping in pediatric chronic kidney disease using single-shot 3D-grase asl with optimized retrospective motion correction. Magn Reson Med, 2019,81(5):2972-2984.

    [48] Georges PC, Hui JJ, Gombos Z, et al. Increased stiffness of the rat liver precedes matrix deposition:Implications for fibrosis. Am J Physiol,2007, 293(6):G1147-G1154.

    [49] Yin M, Chen J, Glaser KJ, et al. Abdominal magnetic resonance elastography. Topics in Magn Reson Imaging, 2009, 20(2):79-87.

    [50] Rouvière O, Souchon R, Pagnoux G, et al. Magnetic resonance elastography of the kidneys:Feasibility and reproducibility in young healthy adults. J Magn Reson Imaging, 2011, 34(4):880-886.

    [51] Tan CH, Venkatesh SK. Magnetic resonance elastography and other magnetic resonance imaging techniques in chronic liver disease:Current status and future directions. Gut and liver, 2016, 10(5):672-686.

    篇8

    關鍵詞: 資金成本;目標成本法;改進

    Key words: capital cost;target costing;improvement

    中圖分類號:F275.3 文獻標識碼:A 文章編號:1006-4311(2013)11-0165-02

    ――――――――――――

    作者簡介:許培(1993-),女,江蘇如皋人,在讀本科,江蘇科技大學經濟管理學院會計系,主要研究方向為財務成本管理。

    0 引言

    日本會計學會第53屆年會由“目標成本法特別委員會”發表了題為《目標成本法研究的課題》的報告草案。該報告將目標成本法活動視為綜合性利潤管理的一環,認為是企業確立中長期競爭優勢的、與產品開發相關聯的戰略性管理方法。理論界、實務界倡導的“目標成本法”,認為它具有強烈的管理工程學屬性,其獨特之處在于會計方法與工程技術的有機結合,可視為會計、工程與組織這三重力量的匯集。該報告作出的定義:“目標成本法是指,在產品的策劃、開發中,根據用戶需求設定相應的目標,希冀同時達成這些目標的綜合性利潤管理活動”。

    這個定義有三點值得注意:①其目標是針對“用戶滿意”(Customer Satisfaction,簡稱CS);②其手段是綜合性的,即工程方法、組織措施和會計計量融會一體貫徹實施的;③它以成本管理的形式達成終極的利潤管理的目的。顯然,這三方面對傳統成本管理學科有了不同程度的突破。鑒于“目標成本法”服務于改善成本信息這一目標,在工學數據匯總的基礎上必須針對各費用項目進行成本估算,并采用了具有管理會計屬性的成本控制方法(如將目標成本與估算成本對比的方法),也結合了并不隸屬于傳統管理會計的價值工程(Value Engineering)、設計評價(Design Review)等方法,這種結合可以視為成本管理學科的發展完善。

    目標成本既是成本控制的目標,保證企業足夠好地完成生產、實現利潤。同時它還是針對某一產品是否投入生產進行決策的重要依據。本文認為現有理論與實務在闡述目標成本法時都沒有考慮資金成本這一因素,而這一因素可能影響產品的生產決策,即拒絕還是接受生產某產品。

    1 目標成本法實施方法概述

    目標成本法的實施方法表現為針對目標成本進行策劃并將其延伸至設計、制造階段。其實施流程粗略地可歸納為下面主要幾個階段:①產品策劃;②目標成本設定;③目標成本的功能別分解;④目標成本的部件別分解;⑤在設計圖紙上實施成本降低;⑥轉向實施生產的準備。

    同時目標成本法還是一個成本管理系統,這個系統把市場需求融入到了產品的開發條件之中。企業以客戶愿意為產品支付的價款作為起點,用它扣除必要利潤來確定產品的目標成本,即允許成本。目標成本法之后的所有工作都集中在實現這一目標成本上。目標成本的基本規則是,只有那些生產成本小于或等于允許成本的產品允許被制造(Cooper和Slagmulder,1997年)。

    2 傳統目標成本計算的基本模型

    目標成本以市場調研為起點,以確定顧客期望的產品功能、質量和價格。企業根據市場的價格減去該公司生產產品的必要利潤所得到的結果安排生產。產品的市場價格和預期盈利之間的差異表示產品的允許成本或目標成本。一家公司制造的產品所必要利潤,通常是根據銷售回報率或利潤率標準(Cooper and Slagmulder, 1997; Sakurai,1989)來測量的。產品的目標成本確定后,企業就會委托一個專門的部門在其允許的成本約束條件下設計和開發產品,以滿足客戶的要求。

    假設在整個生命周期內,產品的價格P、單位生產成本C,年銷售額Q和所得稅率t不變,傳統的目標成本法基本模型可以這樣來表示:NI=PQ(1-t)-CQ(1-t) (1)

    滿足約束條件:NI/(1-t)≥αPQ (1-A)

    NI是稅后凈收入,變量α是該公司的必要利潤率,為成本對象的凈利潤除以銷售額(Ingram和Albright,2007年)。

    式(1)中的收益是根據稅后標準測算的,以此來與包含資本成本的目標成本法模型的后續分析進行比較。上式(1)右邊的第一項和第二項分別測算產品的預期稅后收入和生產費用。式(1-A)為其約束條件,表示的是企業保證產品生產所必須滿足的條件。

    目標成本表示式子(1)中C的最大值。當滿足式(1-A)這個約束條件時,產品就能生產。因此,用式(1)的右側相應代替式(1-A)的左側那么就會得到C的最大值:

    C=P(1-α) (2)

    式(2)中,C表示產品的允許成本。實際上,C值是式(2)中產品的設計和生產團隊要努力實現的目標。一旦設計和生產團隊可以盡可能降低產品成本,同時又不影響客戶產品功能和質量的要求,那么就拿產品的估計成本與C相比。因此,由式(2)得來的C就是接受還是排除產品生產決策的基礎。

    3 基于資金成本的目標成本計算模型

    變量i是一個期間指標,i=1,2,…N,N是一個產品的經濟周期,Pi是期間i內產品的單位價格,Ci是期間i內單位生產成本,Ii期間i內長期資產的賬面價值,Qi是在期間i內生產和銷售產品的數量,ri是期間i內的資本成本,ti是在期間i內的所得稅率,α是該公司未來產品預期的必要利潤率,PVN,r是資本成本率為r的N年期年金現值,NPV是凈現值。

    Hartman(2000年)和Shrieves、Wachowicz(2001)指出,產品的EVA貼現在數學上相當于其凈現值。因此,產品生命周期內的經濟收益,或凈現值,可表示為:

    NPV=■■-■■(3)

    式(3)中的第一項表示一個產品的稅后收入,第二項表示為取得營運收入而付出的資本成本。長期資產的初始投入,也就是I,乘以(N+1-i)/N表示每個期間長期資產提取折舊費用以后的資金占用。和前面一樣,假設產品的單位價格、單位生產成本、每年的產品銷售額、實際所得稅率以及資本成本,在產品的生命周期里都是不變的,那么式子(3)則可以簡化為:

    NPV=■-I[1-■](4)

    滿足約束條件:NPV?叟0(4-A)

    上式(4)右邊的第一項是產品經營收入的稅后現值,而第二項是投入資金在生命周期內資金成本的現值。式子(4-A)表示生產產品必須滿足的約束條件,即產品必須獲得等于或超過其資本成本的回報。實際上,和式子(1)、(1-A)一樣,式子(4)和(4-A)可用于實施目標成本法。兩個模型之間唯一的區別在于,基于式(4)和(4-A)的目標成本法,包含了資金成本的現值,即每期期初的EVA貼現。

    更換每個期間的式(4),即相當于得出資本成本率為r的N期年金現值,即PVN,r。則式(4)可被改寫為:

    NPV=(P-C)Q(1-t)PVN,r-I(1-PVN,r/N)(5)

    滿足約束條件:NPV?叟0(5-A)

    把式(5)的右邊的項代入式(5-A)的左邊,求得C的最大值:C=■(6)

    式(6)中,C等于產品的目標成本。當一個產品的價格、年銷售收入、稅率以及資本成本隨產品的經濟周期變化時,式(3)可以用來確定產品的目標成本。

    4 討論

    在傳統的目標成本法模型下,產品的利潤率可能被夸大了,從而更有可能接受產品投產的決定。然而,當投入資金的機會成本納入到產品的成本時,產品的回報率可能會低于公司的資本成本率。因此,傳統的目標成本法模型可能導致管理層作出為公司生產無價值產品而不是有價值產品的決策。

    目標成本法的一個缺陷是它在評估產品生產決策時沒有考慮到資本成本。EVA貼現模型代表了包含資本成本的目標成本法模型。傳統的目標成本法模型會接受負凈現值的產品,同時會排除正凈現值的產品。我們在做決策時,應比較公式(2)和公式(6)得出的成本數額,取兩者小的作為目標成本,然后進行成本分解、擠壓。這樣才能制定出充分可靠的生產決策。

    參考文獻:

    篇9

    下面我們通過具體實例來分析考生在解答語言表達題時常易犯的錯誤。

    一、審題不到位

    例1.請以“夢想與現實”為內容,仿照下面的示例寫兩個句子。要求每個句子都采用比擬的修辭方法,兩個句子之間構成對偶。

    太陽熱烈、奔放,帶著萬丈光芒,給生靈以活力;

    月亮溫馨、寬容,帶著無際清輝,給萬物以安寧。

    [解析]

    答本題,有幾個注意點:(1)明確所寫內容;(2)每個句子都用比擬修辭;(3)句子之間構成對偶形式。但有些考生誤答成“大海與森林”“山峰與河流”“教師與父母”“山與水”“辣椒與薄荷”等等,沒有“以‘夢想與現實’為內容”。這樣的回答,只能得0分。

    原試卷未提供答案,筆者試擬:夢想輕盈、綺麗,猶如一顆流星,劃亮整個夜空;現實沉穩、樸實,猶如步步臺階,踏遍人生旅程。

    例2.一位學者指出,“”是一個早已普遍使用的漢字,它形簡而意賅,直觀而獨特,但許多重要的漢語辭書卻沒有收錄。請用一個生動形象的句子表達讓“”字盡快收錄到漢語辭書中這樣的意思。

    要求:(1)切合原意;(2)運用比喻或比擬的修辭方法。

    [解析]

    此題考查按照具體要求正確運用常見的修辭方法的能力。值得注意的是,試題不是要考生講道理、作議論,自行寫出一個將“”收進辭書的“理由”,而是要求表達“讓‘’字盡快收錄到漢語辭書中”這樣一個意思――許多考生卻都誤讀了題意。

    答案示例:(1)不要讓“”字到處漂泊,讓它有“籍”可入,有“家”可歸。(2)“”字睜著圓圓的大眼睛,期盼著回到母親的懷抱。(3)“”字睜著圓圓的大眼睛,盼望回到自己的家園。(4)無家可歸的“”字,盼望和自己的兄弟姐妹們一起生活。

    例3.請用“月光如水水如天”為統率句,寫一段情景交融的文字。要求想象合理,語言連貫,不少于80字。

    [解析]

    回答本題,除注意“想象合理,語言連貫,不少于80字”外,還有兩個隱性要求須遵守:(1)“用‘月光如水水如天’為統率句”,意味著“月光如水水如天”應置于語段開頭;(2)既然是“月光如水水如天”,內容上就要先寫“月光如水”,再寫“水如天”,既不能有所遺漏,又得講究順序。

    答案示例:“月光如水水如天。”放眼望去,但見清冷如水的月光,傾瀉在波光粼粼的江面上,月光就像熠熠閃動的江水,江水又仿佛和幽深的藍天連成一片,整個世界好像都融化在無邊的迷茫、恬靜的月色水光之中。一個多么清涼、寂靜的夜晚啊!詩人不禁觸景生情,感到寂寞悵惘。

    二、內容不合理、格調欠高雅或色彩不協調

    例4.請參照下面材料中畫線的部分,另選我國兩個傳統節日(如春節、清明節、端午節、重陽節等),仿寫句子。要求字數相同,句式相似。

    黃土黃,那是江北世世代代淳樸的厚實;清水清,那是江南祖祖輩輩悠然的淡雅,蕩漾著千年的風物與風華。唯在中秋,江南江北,共賞一輪明月;或在元宵,將一鍋鍋湯圓,煮成千年不變的甜甜蜜蜜與團團圓圓。

    [解析]

    有考生的答案是:“唯在端午,江南江北,同敬一位詩人;或在清明,將一張張白紙,折成百年依舊的悲悲戚戚與凄凄慘慘?!比绱嘶卮?,感彩與原句喜慶的基調不符,得分自然就不會高。

    【答題指津】

    一、壓縮語段

    (1)根據閱讀材料的性質,明確其側重點。記敘性材料中,時間、地點、人物、事件等是重要信息;議論性材料,關鍵是找到論點句;說明性材料中,對象、范圍、特征是主體內容;新聞材料,要抓住“導語”不放松。(2)分析閱讀材料的結構,弄清其內在關系。(3)對文段殊的句子(如中心句、首尾句、過渡句、設問句)和詞語(如“首先”“其次”等)要高度重視。(4)扣住題目要求,盡量用主謂句(尤其是主動句)表達;盡可能選用材料中負載主要信息的原詞;嚴格控制字數,使用單音節詞、簡稱、代詞等。(5)最后來個“回頭望”,檢查所概括的信息要點全不全、語句連貫不連貫等。

    二、仿用句式

    (1)弄清題目要求。有時題目規定陳述對象,這時須以給定的對象為主語。(2)弄清原句中心,理解原句的隱含意義,在讀懂文意的基礎上把握主旨,循旨聯想,遵旨選材,按旨索句。(3)注意句子結構形式的高度一致。(4)分析所給例句所用的修辭格。(5)仿寫的句子同例句相比,色彩要和諧(如詞語的褒貶雅俗,感情的憂傷、喜悅、沉重、明快等)。此外,仿句立意境界要高,最好有一定的意趣。(6)對聯是一種更為嚴格的仿寫。對聯的基本要求:上下聯字數相等,詞性相同;內容關聯而不重復;仄起平落(上聯末字是仄聲,下聯末字是平聲)。

    三、變換句式

    (1)審清要求,明確答題的方向。(2)分析原句特點,包括原句的句式特點、各分句間的關系等。(3)根據題目要求改變句式,同時須相應地改變原句中的詞語甚至句子結構。比如主動句與被動句的變換,要將主動者與被動者的位置互換,表主動和被動關系的介詞“把”“被”等也要改換;再如長句變短句,最基本的就是使長句的附加成分“消腫”,方法有三:一是把長句的附加成分獨立出來,單獨成句;二是利用復指的辦法,使句子主干突出;三是重新組句。變換時可添加必要的句子成分或關聯詞語,有時還要重復某些詞語或添加代詞。

    四、語言簡明

    (1)掌握消除歧義的方法:一是更換詞語,把容易產生歧義的詞語換成意義單一的詞語;二是增設語境,給歧義句增設上下文;三是調語序,把句內有關詞語的位置改動一下;四是改動標點;五是重新造句。(2)掌握避免冗余的方法:一是找主干,理枝葉,發現并消除贅余的詞語;二是分析句間關系,發現和刪除重復的語句;三是把握語段主旨,發現和刪除游離于中心之外的內容;四是恰當地運用省略和指代;五是恰當地對某些內容進行概括與合并。

    五、語言得體

    語言得體涉及以下幾點。(1)要考慮一些特殊用語的含義和用法,如謙稱和敬稱、自稱和他稱、褒義和貶義、口語與書面語等。以敬稱來說,常見的有:看望別人說“拜訪”,陪伴朋友說“奉陪”,中途退席說“失陪”,求人幫忙說“勞駕”,請人指點說“賜教”,贊人見解說“高見”,等等。(2)要考慮說話人(或聽話人)的身份地位、職業經歷、性格修養、表達目的以及心理因素與文化修養等。(3)要根據外部環境――場合、時間、氣氛等考慮詞句的選用。

    六、擬寫公益廣告

    篇10

    【中圖分類號】Q94-34 【文獻標識碼】A 【文章編號】1009-9646(2008)08-0191-02

    植物標本是與植物相關的教學中不可缺少的直觀教具,它能幫助學生了解植物形態特征,增強記憶,并可克服課時進度與季節脫節而導致選材的困難,便于學生觀察和學習,增加教學效果。另外,植物標本也是科研工作的重要資源,還是保護植物種質、鑒定植物種屬的重要依據。

    1 植物標本的干態保色保存

    1.1 常規保色保存

    常規保存的標本也叫臘葉標本。蠟葉標本的傳統制作方法是將采集來的植物標本經整理后,平放在標本夾的吸水紙上,壓制吸水幾天而成。臘葉標本在制作過程中應根據植物的不同特點,進行特殊處理,使其達到最佳效果[1]。王艷秋等對肉質、易掉葉植物和易變黑植物標本的壓制方法進行了研究,結果表明通過把植物材料均勻放在吸水紙上,每天翻一次標本和每天翻二次標本進行觀察研究,發現含水量較低的植物,經8天8次的處理,成品率較高;但對含水量較高、花瓣較大的肉質植物則需要經8天16次的處理,其成品率常低于前者[2]。因而在處理標本時,既要考慮到植物材料的差異,又要考慮到處理時所采用的方法、時間的長短及環境因素等,不同類型采用不同的處理,使標本盡量保持它的本色,以達到最佳效果。

    1.2 烘干保色保存

    用烘箱干燥標本,也有很好的效果,一般溫度在30℃~50℃[3],黃艷花等把夾好的標木夾放入40~50℃的干燥箱中烘干,效果較好[4]?;蛘哂眉t外燈烘干壓制,也就是用瓦楞紙板、泡沫板把夾著標本的草紙隔開,用標本夾捆住,放于烘烤架上(金屬材料),紅外燈放于烘烤架下進行烘烤,溫度為40℃左右[5]。用紅外燈烘干壓制不但保持標本的原有色彩,而且還可殺死標本上的一些蟲卵和病菌,值得推廣應用。王蘭州等依據風、熱能夠加速水分蒸發的原理,首次研制出了一種便于攜帶、又能省時省力地對新鮮植物標本進行快速、優質干燥的機電一體化設備,命名為“便捷式植物標本干燥器”,這種設備使植物標本壓制時能夠省時省力、優質而又便于攜帶[6]。

    1.3 熱熨保色保存

    就是將整形后的花、葉放在兩層吸水紙的中間 ,鋪于平板上,以預熱的熨斗或裝有熱水的搪瓷杯來回熨3~4次,標本驟然失水,色素未破壞。倘標本較厚實,失水不足,可換吸水紙再熨,然后再把熨好的標本整理、固定、上蠟,貼上標簽[7]。對于在一般的干燥條件下花會褪色的植物也可用熱熨保色保存,把采集到的植物先放在標本夾中1~2天,然后在紙的上面用熾熱的烙鐵熨燙,這樣干燥的花,顏色便能保存很好[3]。對于含水量較高易變色、霉變的植物標本,舒孝喜采用電熨斗隔著吸水紙小心熨燙(注意溫度不易過高),使其快速脫水,來保持植物的原有鮮艷的色彩[8]。

    1.4 硅膠干燥保存

    將事先烘干的硅膠顆粒(1~1.5毫米)慢慢倒入盛放標本的盒子或標本瓶中使其充滿標本的每個空隙,直到完全覆蓋為止,然后將標本放入干燥箱中5~6天,硅膠作為干燥劑吸去標本中的水,如有真空干燥器將標本置于其中抽氣并保持低壓二天左右也可完成脫水過程[9]。陳尚義將采集的植物標本放在夾有草紙干燥過的硅膠粉的標本夾中捆緊,放入烘干箱(通電后高溫中)迅速烘干的方法也成功的進行了標本的保存[10]。

    1.5 微波干燥保存

    將按常規方法整理好的標木夾放入微波爐內的轉盤上,將微波爐門關閉,根據植物體含水量,來確定處理功率和時間[11]。劉淑琴將采集到的植物標本在形態和顏色沒有改變之前置于微波爐中,通電幾秒鐘就完成了干燥過程[9]。

    2 植物標本的浸制保色保存

    因干態保存的標本未經過原色的固定,所以保色的時間較短,保色的效果往往不是很好,科技工作者做了大量的實驗,發現通過對采集的植物進行化學處理,使原色固定,然后進行浸制保存,可使制作的標本色澤自然、形態逼真,能較長時間保持原色澤不變。

    2.1 綠色植物標本的浸制保色保存

    植物體之所以呈綠色是因為植物體的葉綠體中含有葉綠素,葉綠素是一種復雜的有機化合物,其分了結構的中央有一個金屬鎂原了,葉綠素呈現綠色的原因就是由于含有鎂原了的核心結構。葉綠素極容易分解破壞,且易溶解在酒精或福爾馬林等保存液中,所以浸在酒精或福爾馬林等保存液中的標本以及干制的臘葉標本如果不進行保色處理,很容易褪色,當葉綠素與酸發生反應時,鎂就分離出來,此時因葉綠素缺鎂,所以植物就變成褐色,這種沒有鎂的葉綠素一般稱為植物黑素。與此同時如果把另一種金屬銅原了放入黑素分子中,使葉綠素分了中的核心結構恢復原來的有機金屬化合狀態,植物體便獲得了象葉綠素樣的綠色物質,而重變綠。以銅原子為核心的葉綠素分子結構很穩定,不容易分解破壞,且不溶于酒精或福爾馬林中,所以經過如此處理的植物標本在保存液中可以保存綠色。

    韓峻等將醋酸銅結晶加入50%冰醋酸溶液中,直加到溶液飽和為止,然后用4倍水稀釋,再加熱至80~85℃,把要做成標本的植物放進燒熱的溶液中,繼續加熱,直到植物由綠變褐,再由褐轉綠時,把植物取出用清水洗凈,保存于5%福爾馬林中,進行綠色標本的保存[12,13]。宋良科等對藥用植物原色標本的制作進行了研究,結果發現將清洗且晾干的材料標本用7%CuS04硫酸銅溶液固定2~4 d,取出洗凈,(根據標本的老嫩程度確定,老的時間長些,嫩的短些),再用0.2%亞硫酸溶液保存于標本瓶中,密閉瓶蓋的方法,無論從效果、操作和經濟適用上均較好[14]。劉淑琴將硫酸銅[CuSO4?5H2O]制成飽和溶液按比例將100份飽和溶液跟67份甲醛,333份水混合得到處理液,然后將綠色標本放入處理液中浸泡20天后取出,用清水洗凈后浸入4%甲醛溶液中長期密封保存,其保色效果也很好[9]。

    對不適于熱煮或藥液不容易透入的植物,可以改用硫酸銅飽和水溶液700m1、福爾馬林50m1、水250m1的混合液,將植物放入這種液體中浸漬,浸漬時間的長短,要視植物老嫩程度和種類而定,當植物褪成黃色而又重新變成綠色時,即可取出,用清水將藥液洗凈,然后放到5%福爾馬林中保存,標本就制成了[12]。對于葉薄而嫩的植物因其在高溫下易變軟,可將50%乙醇90ml、福爾馬林5ml、甘油2.5ml、冰醋酸2.5ml、氯化銅10g配成混合溶液,將標本浸漬數日,即可保色[15,16]。

    2.2 紅色植物標本的浸制保色保存

    某些器官呈現紅色是由其細胞里的花青素決定的,而花青素具有遇堿性溶液易變蘭、遇酸性溶液變紅的特性。因此,采用合理的酸性溶液來加以處理即可達到使植物保持紅色的目的。

    寧小清實驗發現用硼酸45g,95%酒精200ml,40%福爾馬林200ml,加蒸餾水至1000ml,將植株置于其中浸制且保存,這種方法對澳洲合歡花、辣椒果、荔枝果的紅色保存效果較好[17]。韓 峻用硼酸粉450g、水2000~4000m1、75~95%酒精2000m1,福爾馬林原液300m1混合起來,取澄清液作為浸制液,直接用來保存標本。如果保存粉紅色的標本時,須將福爾馬林減至微量或不加[12]。劉淑琴等研究發現將硼酸3克,40%的甲醛4毫升與水400毫升混合制成固定液,然后將洗干凈的紅色植物標本放在固定液中浸泡1-3天,如不發生混濁現象即可取出放入由甲醛25毫升、甘油25毫升、水1000毫升制成的保存液或由10%亞硫酸20毫升、硼酸10克、水580毫升制成的保存液中長期密封保存,對較大的果實標本最好用注射器注入少量保存液再長期密封保存效果會更好[9][18]。

    2.3 黃色或黃綠色植物的浸制保色保存

    黃色的花和果實主要是其中含有類胡蘿卜素和核黃素,類胡蘿卜素和核黃素又是由胡蘿卜素和葉黃素組成,胡蘿卜素為橙紅色而葉黃素為黃色。用化學方法保持其結構從而保存其顏色。

    取6%亞硫酸500毫升和80~90%酒精500毫升加入400毫升蒸餾水混合得保存液,將采集來的標本直接浸入保存液密封保存效果較好[9]。寧小清用亞硫酸50ml,95%酒精50ml,加蒸餾水至1000ml,將植株置于其中浸制且保存,效果較理想[17]。韓 峻用亞硫酸飽和溶液568ml、95%酒精568ml、水4500 ml混合起來取澄清液對標本進行了保存[12]。

    2.4 黑色、紅紫色、紫色標本的浸制保色保存

    對黑色、紅紫色、紫色標本的浸制保色保存,一種方法是用福爾馬林450ml,95%酒精540ml、水18100ml混合起來,取澄清液來保存標本。另一種方法是用福爾馬林500ml、飽和氯化鈉溶液1000ml、水8700ml混合液的澄清液,來保存標本[12]。

    3 植物標本保存的新方法

    因干態標本在使用和保存過程中易氧化變色、易腐蝕、被蟲咬,標本的莖、葉容易折斷,花果實等也易脫落,且使用不方便。而浸制的標本由于保存液揮發后減少,需經常添加保存液,保存液揮發的氣味也使室內空氣有難聞的甲醛污染,影響工作人員的健康,也不利于參觀學習。隨著社會的發展和科技人員的研究,目前所使用的新的植物標本保存方法有以下幾種:

    3.1 塑化法

    唐安科把原有的浸制和新鮮的植物標本經過加工處理,即先給綠色植物保色,再用水溶性塑料聚乙二醇(PEG)處理來替換植物內的水,制成了高分子水溶性塑料處理的標本,這種標本不需加入甲醛、乙醇等防腐劑浸泡,就能防霉防蟲,有一定的實用價值[19]。

    3.2 塑封法

    把制成的干態標本或化學保色后的浸制標本制干后,用塑封膜塑封,這種方法保存的標本保色期長、使用方便(可用實物投影儀在課堂上展示)克服了用掛圖的死板,同時彌補了新鮮標本容易損壞及課時進度與季節脫節而導致選材困難等不足,用塑封法還可制作葉形、葉脈及其剪貼標本等,不僅容易保存而且使用方便、效果明顯,且具有一定的藝術性和觀賞價值[11][12][20]。

    3.3 電子標本保存法

    隨著科學技術的發展和數碼相機的普及,電子標本越來越引起重視,它克服了傳統標本的局限性,比如傳統標本在植物標本的采集、制作時成本高,需要時間長,許多植物種類的標本很難采到,標本使用過程中破損和廢棄嚴重,保存需要很大的標本室空間和專門人員的管理等等,而植物電子標本具有圖片清晰、易拷貝、不占室內空間、易管理等優點,它的電子圖片也可用于多媒體教學,為傳統課程實現電子化和網絡化教學奠定了基礎[21]。

    4 標本制作中有待注意的問題

    雖然絕大多數植物按物理和化學方法都能解決好保色問題,但也有一些植物保色效果不理想,如桂花樹、松科的植物等基本上還沒有找到理想保色方法;葉中含有膠汁的一類植物如橡膠樹、印度榕、桕等,保色后,葉子顏色容易發黑;而女貞、黃檀等植物在保色過程中不僅顏色不綠,而且葉子容易脫落;還有馬齒莧保色后,標本呈現紫紅色等問題均有待進一步研究[16]。另外,電子標本不能完全代替傳統的蠟葉標本和液浸標本,因為在許多方面,實體標本仍具有其獨特的作用,比如植物新的形態變異或新種類、新類型的比較鑒定,從標本中提取樣品,不同產地標本形態的變化,生物多樣性研究等方面,傳統標本的優勢是電子標本所不能替代的[21]。

    參考文獻

    [1] 李文祥.干花制做方法的探討[J].云南農業大學學報,1995.(3):207-212.

    [2] 王艷秋,王春,劉明等.關于植物標本保色的研究[J].吉林農業大學學報1997,19(增刊):45-47.

    [3] 閆潔,崔學明.淺談植物標本的采集與壓制[J].內蒙古林業科技,1998年第3期,40-42.

    [4] 黃艷花,覃連紅,梁萍等.植物病害標本固綠保綠技術研究[J].安徽農業科學,2007,35(29):9138-9139.

    [5] 林祁.新型的植物標本烘干壓制法[J].植物雜志,1997,3.

    [6] 王蘭州,令利軍,王一峰.一種快速、優質壓制植物標本的新設備及使用方法[J].草業科學,2000年(第17卷)第1期:86-88.

    [7] 姚遠,姜姝姝.論植物標本的采集和制作[J].成才之路,2007年27期:54.

    [8] 舒孝喜.植物蠟葉標本制法的改進與應用[J].農業科技與信息,2004年01期:9-10.

    [9] 劉淑琴.原形原色生物標本的制作及保存方法[J].教學儀器與實驗,2000年第10期,22-23.

    [10] 陳尚義.植物標本保色新方法[J].教學儀器與實驗,2000年第1期,16.

    [11] 張美萍.植物塑封標本的制作[J].生物學雜志,1999年(第16卷)第5期,31.

    [12] 韓峻,李玉卿,武煜明等.幾種常用植物教學標本的制作方法[J].云南中醫學院學報,第2006年(第29卷)第2期:31-34.

    [13] 蘇紹科.植物原色復膜標本的制作[J]. 實驗教學與儀器,2006年01期:22.

    [14] 宋良科,易志剛,蔣合眾.藥用植物原色標本的制作研究[J].現代中藥研究與實踐,2005年(第19卷)第4期:47-48.

    [15] 劉曉霞,張金環.植物標本的采集、制作與保存[J].陜西農業科學,2008年01期:223-224.

    [16] 黃肇宇,蔣波,覃雪梅.植物標本原色澤的保色技術研究[J].玉林師范學院學報(自然科學),2006年(第27卷)第3期:126-128.

    [17] 寧小清,郭建華.植物綠色固定保色AB液的實驗研究[J].廣西中醫學院學報2005年(第8卷)第1期:3-5.

    [18] 段顯德.植物標本保色術[J].丹東師專學報,1994年03期:64-66.

    篇11

    關鍵詞:巢蛋白陽性細胞 胰腺 表達

    關鍵詞:巢蛋白陽性細胞 胰腺 表達

    早在1985年Hockfield 和Mckay首先發現巢蛋白在胚胎大鼠脊髓神經管神經前體細胞表達,將其稱為神經上皮干細胞蛋白。以后發現巢蛋白存在于胚胎期的膠質細胞、成年的神經前體細胞等細胞中。Hunziker等[1]發現在胰腺內有巢蛋白陽性細胞(nestin+)。Lumelsky等[2]認為巢蛋白可以作為多潛能的胰腺干細胞的標志。體外分離克隆胰腺干細胞作為種子細胞,并定向誘導其分化為功能性胰島移植治療糖尿病,是解決胰島供體短缺的有效途徑。因此檢測胰腺中的nestin+并對其進行分離、體外增殖、誘導分化及克隆成為人們研究的熱點之一。本文綜述巢蛋白在胰腺中的表達及相關研究進展。

    早在1985年Hockfield 和Mckay首先發現巢蛋白在胚胎大鼠脊髓神經管神經前體細胞表達,將其稱為神經上皮干細胞蛋白。以后發現巢蛋白存在于胚胎期的膠質細胞、成年的神經前體細胞等細胞中。Hunziker等[1]發現在胰腺內有巢蛋白陽性細胞(nestin+)。Lumelsky等[2]認為巢蛋白可以作為多潛能的胰腺干細胞的標志。體外分離克隆胰腺干細胞作為種子細胞,并定向誘導其分化為功能性胰島移植治療糖尿病,是解決胰島供體短缺的有效途徑。因此檢測胰腺中的nestin+并對其進行分離、體外增殖、誘導分化及克隆成為人們研究的熱點之一。本文綜述巢蛋白在胰腺中的表達及相關研究進展。

    1.巢蛋白在胰腺中的分布及定性、定位

    1.巢蛋白在胰腺中的分布及定性、定位

    1.1 巢蛋白在大鼠胰腺中的分布及定性、定位

    1.1 巢蛋白在大鼠胰腺中的分布及定性、定位

    2000年Hunziker等[1]首先發現在胰腺內有nestin+。Zulewski等[3]發現,成年大鼠的nestin+位于胰島及散在腺泡周圍的外分泌部中。胰島來源的巢蛋白可以參與胰島內分泌細胞的新生。該細胞在胰島和導管內不同于導管上皮細胞,因其不表達導管標志物CK219。為進一步明確在大鼠胰腺中nestin+的類型,Lardon 等[4] 通過免疫組化發現,nestin+定位在正常和再生成年胰腺的間充質細胞內。在導管結扎所致的胰腺炎大鼠中,每個胰島至少含有2~3個nestin+。大多數細胞有星形細胞的形態,一種典型的與血管相關的外周細胞。另外,nestin+也存在于胰腺再生過程中的新生毛細血管的內皮細胞。在胰腺組織移植時,nestin+在間充質迅速增生,并表達結蛋白、波形蛋白,GFAP(代表星形細胞標志物) 。巢蛋白也是星形細胞、增生時的血管源性內皮細胞的標志物。國內倪雪峰[5]等研究顯示在大鼠胚胎后期、新生期、成年三階段nestin在核酸、蛋白水平均有表達,nestin +主要分布在胰島,在腺泡周圍的外分泌中有少量分布。隨大鼠胰腺的生長發育,nestin核酸、蛋白表達下調,胰島內nestin+數也呈下降趨勢。

    2000年Hunziker等[1]首先發現在胰腺內有nestin+。Zulewski等[3]發現,成年大鼠的nestin+位于胰島及散在腺泡周圍的外分泌部中。胰島來源的巢蛋白可以參與胰島內分泌細胞的新生。該細胞在胰島和導管內不同于導管上皮細胞,因其不表達導管標志物CK219。為進一步明確在大鼠胰腺中nestin+的類型,Lardon 等[4] 通過免疫組化發現,nestin+定位在正常和再生成年胰腺的間充質細胞內。在導管結扎所致的胰腺炎大鼠中,每個胰島至少含有2~3個nestin+。大多數細胞有星形細胞的形態,一種典型的與血管相關的外周細胞。另外,nestin+也存在于胰腺再生過程中的新生毛細血管的內皮細胞。在胰腺組織移植時,nestin+在間充質迅速增生,并表達結蛋白、波形蛋白,GFAP(代表星形細胞標志物) 。巢蛋白也是星形細胞、增生時的血管源性內皮細胞的標志物。國內倪雪峰[5]等研究顯示在大鼠胚胎后期、新生期、成年三階段nestin在核酸、蛋白水平均有表達,nestin +主要分布在胰島,在腺泡周圍的外分泌中有少量分布。隨大鼠胰腺的生長發育,nestin核酸、蛋白表達下調,胰島內nestin+數也呈下降趨勢。

    1.2 巢蛋白在小鼠胰腺中分布及定性、定位

    1.2 巢蛋白在小鼠胰腺中分布及定性、定位

    為明確巢蛋白在小鼠胰腺中的定位,Selander等[6]發現nestin+在間充質中表達,上皮細胞中不表達。早期胰腺干細胞的標志物IPF1PPDX1,祖細胞的標志物ngn3;胰腺分化細胞的標志物Isl1均表達在上皮鈣連素陽性的上皮細胞內,但不表達巢蛋白。nestin+在包繞胰腺上皮和正在發育的胃腸來源的上皮周圍,但不在胰腺上皮細胞內。從而支持nestin+不同于導管上皮內的觀點。

    為明確巢蛋白在小鼠胰腺中的定位,Selander等[6]發現nestin+在間充質中表達,上皮細胞中不表達。早期胰腺干細胞的標志物IPF1PPDX1,祖細胞的標志物ngn3;胰腺分化細胞的標志物Isl1均表達在上皮鈣連素陽性的上皮細胞內,但不表達巢蛋白。nestin+在包繞胰腺上皮和正在發育的胃腸來源的上皮周圍,但不在胰腺上皮細胞內。從而支持nestin+不同于導管上皮內的觀點。

    1.3 巢蛋白在人胚胎和成人胰腺中的分布及定性、定位

    1.3 巢蛋白在人胚胎和成人胰腺中的分布及定性、定位

    鄭宗梅等[7]研究顯示nestin和Ngn3在12~14周人胚胎胰腺組織均廣泛表達,該陽性細胞中均無胰島素及胰高血糖素表達;在胰島中未見到該二者的共表達,但在導管中可見共表達。說明nestin和Ngn3在人胚胎胰腺未分化細胞中表達,而具有分泌功能的內分泌細胞無表達。夏修金[8]等發現16周人胚胎胰腺的胰島以及胰導管和腺泡結構中檢測到nestin+,以腺泡結構和小導管中的數目為多。部分胰島素和CK19染色強陽性的細胞中巢蛋白染色為弱陽性,胰升糖素強陽性的部位則未見nestin+。認為nestin+可能是胰腺組織中一個特殊的細胞亞群,代表了一群未成熟細胞。楊開明[9]等研究顯示人胚胎6~14 w胰腺中nestin+存在于胰腺的間質,數量極少,認為胚胎胰腺的發育中,胰腺間質存在胰腺干細胞。我們的實驗顯示各胎齡段(10 ~ 37 w)胰腺均有nestin+表達,存在于胰島、間充質和血管中,在腺泡、導管中未發現nestin+,胚胎發育晚期階段(29 ~ 37 w)nestin+高于其它胎齡組。因此隨著胎齡的變化,胰腺nestin+數也發生了變化[10]。

    鄭宗梅等[7]研究顯示nestin和Ngn3在12~14周人胚胎胰腺組織均廣泛表達,該陽性細胞中均無胰島素及胰高血糖素表達;在胰島中未見到該二者的共表達,但在導管中可見共表達。說明nestin和Ngn3在人胚胎胰腺未分化細胞中表達,而具有分泌功能的內分泌細胞無表達。夏修金[8]等發現16周人胚胎胰腺的胰島以及胰導管和腺泡結構中檢測到nestin+,以腺泡結構和小導管中的數目為多。部分胰島素和CK19染色強陽性的細胞中巢蛋白染色為弱陽性,胰升糖素強陽性的部位則未見nestin+。認為nestin+可能是胰腺組織中一個特殊的細胞亞群,代表了一群未成熟細胞。楊開明[9]等研究顯示人胚胎6~14 w胰腺中nestin+存在于胰腺的間質,數量極少,認為胚胎胰腺的發育中,胰腺間質存在胰腺干細胞。我們的實驗顯示各胎齡段(10 ~ 37 w)胰腺均有nestin+表達,存在于胰島、間充質和血管中,在腺泡、導管中未發現nestin+,胚胎發育晚期階段(29 ~ 37 w)nestin+高于其它胎齡組。因此隨著胎齡的變化,胰腺nestin+數也發生了變化[10]。

    郭宏波[12]等研究發現,nestin+在正常成人胰腺組織中的分布最強在于胰島內,胰腺外分泌部未見明確的nestin+。Tino[13]等應用免疫組織化學雙重染色檢測。發現nestin在胰島、外分泌部中均存在,在胰島的內分泌細胞、腺泡和導管中沒有陽性細胞,所有nestin+共表達CD31、CD105、CD34和波形蛋白,出現在圍繞導管上皮細胞周圍的結締組織血管內皮中,但不存在于導管上皮。nestin+在成人胰腺中表達在血管內皮細胞,因此它在成人胰腺中不代表表達內分泌祖細胞的標志物。

    郭宏波[12]等研究發現,nestin+在正常成人胰腺組織中的分布最強在于胰島內,胰腺外分泌部未見明確的nestin+。Tino[13]等應用免疫組織化學雙重染色檢測。發現nestin在胰島、外分泌部中均存在,在胰島的內分泌細胞、腺泡和導管中沒有陽性細胞,所有nestin+共表達CD31、CD105、CD34和波形蛋白,出現在圍繞導管上皮細胞周圍的結締組織血管內皮中,但不存在于導管上皮。nestin+在成人胰腺中表達在血管內皮細胞,因此它在成人胰腺中不代表表達內分泌祖細胞的標志物。

    2.胰腺nestin+的分離與分化

    2.胰腺nestin+的分離與分化

    2.1 大鼠胰腺nestin+的分離與分化

    2.1 大鼠胰腺nestin+的分離與分化

    Zulewski等[3]發現,成年大鼠胰島內的nestin+在體外培養( > 8個月) ,有不同尋常的多潛能增生能力,可以反復克隆。經誘導分化可以表達肝、外分泌胰腺的標志物:甲胎蛋白、淀粉酶;顯示導管P內皮形態:表達CK219;分化為內分泌細胞,表達胰島素、胰高血糖素、胰腺十二指腸同源盒轉錄因子( IDX21) 。巢蛋白可以作為多潛能的胰腺干細胞的標志。

    Zulewski等[3]發現,成年大鼠胰島內的nestin+在體外培養( > 8個月) ,有不同尋常的多潛能增生能力,可以反復克隆。經誘導分化可以表達肝、外分泌胰腺的標志物:甲胎蛋白、淀粉酶;顯示導管P內皮形態:表達CK219;分化為內分泌細胞,表達胰島素、胰高血糖素、胰腺十二指腸同源盒轉錄因子( IDX21) 。巢蛋白可以作為多潛能的胰腺干細胞的標志。

    2.2 小鼠胰腺nestin+的分離與分化

    2.2 小鼠胰腺nestin+的分離與分化

    Lumelsky 等[2]通過篩選巢蛋白陽性的胚胎干細胞(ES),體外經誘導分化后,可產生分泌胰島素的內分泌細胞。當將這些分化的細胞注射入糖尿病小鼠,分泌胰島素的細胞可以迅速血管化,形成胰島樣組織。葉健等[13]以lV型膠原酶消化小鼠胰腺組織進行低糖DMEM培養基進行體外連續培養。隨著培養時間的延長,從內分泌部分離的nestin+呈集落樣生長,開始表達PDX21,呈現向胰腺內分泌部的B細胞分化的趨勢。來源于胰腺外分泌部的nestin+呈鋪路石樣形態,表達導管上皮細胞的特異性標志CK219,呈現向胰腺外分泌部的導管上皮細胞分化的趨勢。同一細胞集落中發生分化的胰腺nestin+亦隨時間延長逐漸增多。

    Lumelsky 等[2]通過篩選巢蛋白陽性的胚胎干細胞(ES),體外經誘導分化后,可產生分泌胰島素的內分泌細胞。當將這些分化的細胞注射入糖尿病小鼠,分泌胰島素的細胞可以迅速血管化,形成胰島樣組織。葉健等[13]以lV型膠原酶消化小鼠胰腺組織進行低糖DMEM培養基進行體外連續培養。隨著培養時間的延長,從內分泌部分離的nestin+呈集落樣生長,開始表達PDX21,呈現向胰腺內分泌部的B細胞分化的趨勢。來源于胰腺外分泌部的nestin+呈鋪路石樣形態,表達導管上皮細胞的特異性標志CK219,呈現向胰腺外分泌部的導管上皮細胞分化的趨勢。同一細胞集落中發生分化的胰腺nestin+亦隨時間延長逐漸增多。

    2.3 人胰腺nestin+的分離與分化

    2.3 人胰腺nestin+的分離與分化

    鑒于多數學者認為巢蛋白是胰腺干細胞,如能提取人胰腺中nestin+并進行分離培養、體外增殖及功能誘導,若能分化為B細胞,則是解決胰島供體短缺的有效途徑。張玲[15]等采用膠原酶消化法,從胎兒胰腺組織中分離獲得胰島樣細胞簇(ICCs),發現ICCs細胞具有很強的增殖能力,可至少連續傳16代;可表達巢蛋白和ABCG2;在多種細胞因子和無血清的條件下,nestin+經誘導后可出現胰島素、胰升糖素和PDX21mRNA的表達,而巢蛋白和Ngn3mRNA表達消失。RIA分析也可檢測到誘導后的細胞內有胰島素產生。因此從胎兒胰腺中分離得到的nestin+具有胰腺前體細胞的特性,在體外具有很強的增殖能力,并可誘導分化為胰島內分泌細胞。nestin+有望為胰島移植提供一種新的細胞來源。國外學者已從成人胰管中分離出nestin+并進行培養,成功地誘導分化出了既含胰管細胞又含胰島細胞的細胞群[15],證實胰腺外分泌部存在著巢蛋白陽性的干細胞。王宏[16]等從胎兒胰中分離的nestin+進行篩選后擴增,純化后的其表面標志與骨髓間充質干細胞表面標志相似,此類細胞可在體外誘導為脂肪細胞或骨細胞,胎兒胰腺來源的nestin+具有一定間充質干細胞的特性。黃海霞[17]等對人胎胰腺中有nestin+進行分離和體外培養,發現胎胰nestin+表達高水平ABCG2/BCRPI,并在形態和生長方式上均不同于導管上皮細胞;nestin+在體外可自發形成ICC,ICC中的nestin+具有多向分化潛能,可表達多種細胞特異抗原,經體外誘導可產生少量胰島素陽性的類B細胞。并且ICC在NOD-Scid糖尿病模型小鼠和正常小鼠腎膜下移植,發現移植處有明顯的血管增生,ICC可使糖尿病小鼠血糖明顯降低,在正常小鼠體內分化為多種結構,同時繼續增殖侵入腎實質。鄭宗梅[18]等用Ⅴ型膠原酶消化胚胎胰腺,獲得貼壁生長的人胚胰腺細胞,觀察其原代培養、傳代培養、增殖能力及體外誘導分化能力,結果人胚胎胰腺可以體外分離獲得nestin和Ngn3陽性細胞,為未分化細胞,能在體外大量擴增,可長期培養,總蛋白中有胰島素表達,有分化為nestin+的潛能,有望為胰腺組織工程移植提供足夠的種子細胞。

    鑒于多數學者認為巢蛋白是胰腺干細胞,如能提取人胰腺中nestin+并進行分離培養、體外增殖及功能誘導,若能分化為B細胞,則是解決胰島供體短缺的有效途徑。張玲[15]等采用膠原酶消化法,從胎兒胰腺組織中分離獲得胰島樣細胞簇(ICCs),發現ICCs細胞具有很強的增殖能力,可至少連續傳16代;可表達巢蛋白和ABCG2;在多種細胞因子和無血清的條件下,nestin+經誘導后可出現胰島素、胰升糖素和PDX21mRNA的表達,而巢蛋白和Ngn3mRNA表達消失。RIA分析也可檢測到誘導后的細胞內有胰島素產生。因此從胎兒胰腺中分離得到的nestin+具有胰腺前體細胞的特性,在體外具有很強的增殖能力,并可誘導分化為胰島內分泌細胞。nestin+有望為胰島移植提供一種新的細胞來源。國外學者已從成人胰管中分離出nestin+并進行培養,成功地誘導分化出了既含胰管細胞又含胰島細胞的細胞群[15],證實胰腺外分泌部存在著巢蛋白陽性的干細胞。王宏[16]等從胎兒胰中分離的nestin+進行篩選后擴增,純化后的其表面標志與骨髓間充質干細胞表面標志相似,此類細胞可在體外誘導為脂肪細胞或骨細胞,胎兒胰腺來源的nestin+具有一定間充質干細胞的特性。黃海霞[17]等對人胎胰腺中有nestin+進行分離和體外培養,發現胎胰nestin+表達高水平ABCG2/BCRPI,并在形態和生長方式上均不同于導管上皮細胞;nestin+在體外可自發形成ICC,ICC中的nestin+具有多向分化潛能,可表達多種細胞特異抗原,經體外誘導可產生少量胰島素陽性的類B細胞。并且ICC在NOD-Scid糖尿病模型小鼠和正常小鼠腎膜下移植,發現移植處有明顯的血管增生,ICC可使糖尿病小鼠血糖明顯降低,在正常小鼠體內分化為多種結構,同時繼續增殖侵入腎實質。鄭宗梅[18]等用Ⅴ型膠原酶消化胚胎胰腺,獲得貼壁生長的人胚胰腺細胞,觀察其原代培養、傳代培養、增殖能力及體外誘導分化能力,結果人胚胎胰腺可以體外分離獲得nestin和Ngn3陽性細胞,為未分化細胞,能在體外大量擴增,可長期培養,總蛋白中有胰島素表達,有分化為nestin+的潛能,有望為胰腺組織工程移植提供足夠的種子細胞。

    存入我的閱覽室

    3.結束語

    3.結束語

    結合文獻資料,認為巢蛋白是在胚胎胰腺發育過程中存在的胰腺干細胞,也代表著胰腺的增殖水平。從人胚胎后期胰島中可分離得到更多的巢蛋白陽性干細胞,更容易獲得大量的干細胞而進行篩選、體外培養及誘導分化,從而為糖尿病胰腺干細胞移植提供了更多的細胞來源。

    結合文獻資料,認為巢蛋白是在胚胎胰腺發育過程中存在的胰腺干細胞,也代表著胰腺的增殖水平。從人胚胎后期胰島中可分離得到更多的巢蛋白陽性干細胞,更容易獲得大量的干細胞而進行篩選、體外培養及誘導分化,從而為糖尿病胰腺干細胞移植提供了更多的細胞來源。

    參考文獻:

    參考文獻:

    [1]Hunziker,Stein M.nestin expressing cells in the pancreatic islets of Langerhans[J].Biochem Biophys Res Commun,2000,271(1):116-119.

    [1]Hunziker,Stein M.nestin expressing cells in the pancreatic islets of Langerhans[J].Biochem Biophys Res Commun,2000,271(1):116-119.

    [2]Lumelsky N,Blondel O,Laeng P,et al.Differentiation of embryonic stem cells to insulin-secreting structures similar to pancreatic islets [J]. Science,2001,292(5520):1389-1394.res similar to pancreatic islets [J]. Science,2001,292(5520):1389-1394.

    [3]Zulewski H,Abraham EJ,Gerlach MJ, et al .Multipotential nestin-positive stem cells isolated frompancreatic islets differentiate Ex vivo into pancreatic endocrine ,exocrine ,and hepatic phenotypes [J]. Diabetes,2001,50(3) :521-533.

    [3]Zulewski H,Abraham EJ,Gerlach MJ, et al .Multipotential nestin-positive stem cells isolated frompancreatic islets differentiate Ex vivo into pancreatic endocrine ,exocrine ,and hepatic phenotypes [J]. Diabetes,2001,50(3) :521-533.

    [4]Lardon J,Rooman I,Bouwens L. Nestin expression in pancreatic stellate cells and angiogenic endothelial cells [J] . Histochem Cell Biol,2002,117(6) :535-540.

    [4]Lardon J,Rooman I,Bouwens L. Nestin expression in pancreatic stellate cells and angiogenic endothelial cells [J] . Histochem Cell Biol,2002,117(6) :535-540.

    [5]倪雪峰,袁 櫟,程志祥,等.巢蛋白在大鼠胚胎、新生及成年胰腺中的表達變化[J].第四軍醫大學學報,2004 ,25(3):193-196

    [5]倪雪峰,袁 櫟,程志祥,等.巢蛋白在大鼠胚胎、新生及成年胰腺中的表達變化[J].第四軍醫大學學報,2004 ,25(3):193-196

    [6]Selander L,Edlund H. Nestin is expressed in mesenchymal and not epithelial cells of the developing mouse pancreas [J]. Mech Dev,2002,113(2) :189-192.

    [6]Selander L,Edlund H. Nestin is expressed in mesenchymal and not epithelial cells of the developing mouse pancreas [J]. Mech Dev,2002,113(2) :189-192.

    [7]鄭宗梅,陳東明,李凌松,等.巢蛋白和神經元素3在人胚胎胰腺中的表達和分布[J].中華外科雜志,2005,43(23):1537-1540.

    [7]鄭宗梅,陳東明,李凌松,等.巢蛋白和神經元素3在人胚胎胰腺中的表達和分布[J].中華外科雜志,2005,43(23):1537-1540.

    [8]夏修金,鮑衛漢,陳東明,等.巢蛋白在人胚胎胰腺中的表達[J].中國糖尿病雜志,2003, 11(3):204-207.

    [8]夏修金,鮑衛漢,陳東明,等.巢蛋白在人胚胎胰腺中的表達[J].中國糖尿病雜志,2003, 11(3):204-207.

    [9]楊開明,李愛冬,羊惠君,等.Nestin、CK19及insulin等在胚胎胰腺發育中的表達[J].細胞與分子免疫學雜志,2005,21 (3):353-355.

    [9]楊開明,李愛冬,羊惠君,等.Nestin、CK19及insulin等在胚胎胰腺發育中的表達[J].細胞與分子免疫學雜志,2005,21 (3):353-355.

    [10]楊最素,江 峰,郁迪,等.人胚胎胰發育中巢蛋白和轉化生長因子β1表達的變化[J].解剖學雜志,2010,34(3):311-314.

    [10]楊最素,江 峰,郁迪,等.人胚胎胰發育中巢蛋白和轉化生長因子β1表達的變化[J].解剖學雜志,2010,34(3):311-314.

    [11]郭宏波,徐秀紅,張玉海.巢蛋白免疫陽性細胞在成人胰腺中的分布[J].臨床和實驗醫學雜志,2002,1(14):218-219.

    [11]郭宏波,徐秀紅,張玉海.巢蛋白免疫陽性細胞在成人胰腺中的分布[J].臨床和實驗醫學雜志,2002,1(14):218-219.

    [12]Tino Klein,Zhidong Ling,Harry Heimberg,et al. Nestin Is Expressed in Vascular Endothelial Cells in the Adult Human Pancreas[J].J Histochem Cytochem, 2003,51(6):697-706.

    [12]Tino Klein,Zhidong Ling,Harry Heimberg,et al. Nestin Is Expressed in Vascular Endothelial Cells in the Adult Human Pancreas[J].J Histochem Cytochem, 2003,51(6):697-706.

    [13]葉健,何少健,劉瓊東,等.新生昆明小鼠胰腺巢蛋白陽性細胞的自然分化[J].中國組織工程研究與臨床康復,2009,13(14):2680-2684.

    [13]葉健,何少健,劉瓊東,等.新生昆明小鼠胰腺巢蛋白陽性細胞的自然分化[J].中國組織工程研究與臨床康復,2009,13(14):2680-2684.

    [14]張玲,洪天配,胡江,等.胎兒胰腺組織中巢蛋白陽性細胞的分離和體外增殖以及誘導分化[J].中國糖尿病雜志,2003,11(6):414-419.

    [14]張玲,洪天配,胡江,等.胎兒胰腺組織中巢蛋白陽性細胞的分離和體外增殖以及誘導分化[J].中國糖尿病雜志,2003,11(6):414-419.

    [15]Bonner - Weir S, Taneja M, Weir GC, et al.In vitrocultivation of human islets from expanded ductal tissue[J].Proc Natl Acad Sci USA,2000,97 (14): 7999-8004.

    [15]Bonner - Weir S, Taneja M, Weir GC, et al.In vitrocultivation of human islets from expanded ductal tissue[J].Proc Natl Acad Sci USA,2000,97 (14): 7999-8004.

    [16]王宏,胡江,李凌松,等.篩選后的巢蛋白陽性細胞流式鑒定及誘導分化[J].中國醫學科學院學報,2005,27(6):683-688

    [16]王宏,胡江,李凌松,等.篩選后的巢蛋白陽性細胞流式鑒定及誘導分化[J].中國醫學科學院學報,2005,27(6):683-688

    [17]黃海霞,陳玉英,倉輝,等.人胎胰巢蛋白陽性細胞的分離培養及其生物學特性研究[J].實驗生物學報,2003,36(1);25-31.

    [17]黃海霞,陳玉英,倉輝,等.人胎胰巢蛋白陽性細胞的分離培養及其生物學特性研究[J].實驗生物學報,2003,36(1);25-31.

    [18]鄭宗梅,陳東明,李凌松,等.體外培養及其誘導分化人胚胰腺巢蛋白和神經元素3陽性細胞的實驗.中國臨床康復,2005,269(9):62-67.

    [18]鄭宗梅,陳東明,李凌松,等.體外培養及其誘導分化人胚胰腺巢蛋白和神經元素3陽性細胞的實驗.中國臨床康復,2005,269(9):62-67.

    作者簡介:

    作者簡介:

    甘西西(1962-),女,漢,湖北咸豐,浙江海洋學院醫學院,高級講師。

    甘西西(1962-),女,漢,湖北咸豐,浙江海洋學院醫學院,高級講師。

    楊最素(1967-),女,漢,浙江定海,浙江海洋學院醫學院,副教授,碩士生導師。

    楊最素(1967-),女,漢,浙江定海,浙江海洋學院醫學院,副教授,碩士生導師。

    存入我的閱覽室

    3.結束語

    3.結束語

    結合文獻資料,認為巢蛋白是在胚胎胰腺發育過程中存在的胰腺干細胞,也代表著胰腺的增殖水平。從人胚胎后期胰島中可分離得到更多的巢蛋白陽性干細胞,更容易獲得大量的干細胞而進行篩選、體外培養及誘導分化,從而為糖尿病胰腺干細胞移植提供了更多的細胞來源。

    結合文獻資料,認為巢蛋白是在胚胎胰腺發育過程中存在的胰腺干細胞,也代表著胰腺的增殖水平。從人胚胎后期胰島中可分離得到更多的巢蛋白陽性干細胞,更容易獲得大量的干細胞而進行篩選、體外培養及誘導分化,從而為糖尿病胰腺干細胞移植提供了更多的細胞來源。

    參考文獻:

    參考文獻:

    [1]Hunziker,Stein M.nestin expressing cells in the pancreatic islets of Langerhans[J].Biochem Biophys Res Commun,2000,271(1):116-119.

    [1]Hunziker,Stein M.nestin expressing cells in the pancreatic islets of Langerhans[J].Biochem Biophys Res Commun,2000,271(1):116-119.

    [2]Lumelsky N,Blondel O,Laeng P,et al.Differentiation of embryonic stem cells to insulin-secreting structures similar to pancreatic islets [J]. Science,2001,292(5520):1389-1394.92(5520):1389-1394.

    [3]Zulewski H,Abraham EJ,Gerlach MJ, et al .Multipotential nestin-positive stem cells isolated frompancreatic islets differentiate Ex vivo into pancreatic endocrine ,exocrine ,and hepatic phenotypes [J]. Diabetes,2001,50(3) :521-533.

    [3]Zulewski H,Abraham EJ,Gerlach MJ, et al .Multipotential nestin-positive stem cells isolated frompancreatic islets differentiate Ex vivo into pancreatic endocrine ,exocrine ,and hepatic phenotypes [J]. Diabetes,2001,50(3) :521-533.

    [4]Lardon J,Rooman I,Bouwens L. Nestin expression in pancreatic stellate cells and angiogenic endothelial cells [J] . Histochem Cell Biol,2002,117(6) :535-540.

    [4]Lardon J,Rooman I,Bouwens L. Nestin expression in pancreatic stellate cells and angiogenic endothelial cells [J] . Histochem Cell Biol,2002,117(6) :535-540.

    [5]倪雪峰,袁 櫟,程志祥,等.巢蛋白在大鼠胚胎、新生及成年胰腺中的表達變化[J].第四軍醫大學學報,2004 ,25(3):193-196

    [5]倪雪峰,袁 櫟,程志祥,等.巢蛋白在大鼠胚胎、新生及成年胰腺中的表達變化[J].第四軍醫大學學報,2004 ,25(3):193-196

    [6]Selander L,Edlund H. Nestin is expressed in mesenchymal and not epithelial cells of the developing mouse pancreas [J]. Mech Dev,2002,113(2) :189-192.

    [6]Selander L,Edlund H. Nestin is expressed in mesenchymal and not epithelial cells of the developing mouse pancreas [J]. Mech Dev,2002,113(2) :189-192.

    [7]鄭宗梅,陳東明,李凌松,等.巢蛋白和神經元素3在人胚胎胰腺中的表達和分布[J].中華外科雜志,2005,43(23):1537-1540.

    [7]鄭宗梅,陳東明,李凌松,等.巢蛋白和神經元素3在人胚胎胰腺中的表達和分布[J].中華外科雜志,2005,43(23):1537-1540.

    [8]夏修金,鮑衛漢,陳東明,等.巢蛋白在人胚胎胰腺中的表達[J].中國糖尿病雜志,2003, 11(3):204-207.

    [8]夏修金,鮑衛漢,陳東明,等.巢蛋白在人胚胎胰腺中的表達[J].中國糖尿病雜志,2003, 11(3):204-207.

    [9]楊開明,李愛冬,羊惠君,等.Nestin、CK19及insulin等在胚胎胰腺發育中的表達[J].細胞與分子免疫學雜志,2005,21 (3):353-355.

    [9]楊開明,李愛冬,羊惠君,等.Nestin、CK19及insulin等在胚胎胰腺發育中的表達[J].細胞與分子免疫學雜志,2005,21 (3):353-355.

    [10]楊最素,江 峰,郁迪,等.人胚胎胰發育中巢蛋白和轉化生長因子β1表達的變化[J].解剖學雜志,2010,34(3):311-314.

    [10]楊最素,江 峰,郁迪,等.人胚胎胰發育中巢蛋白和轉化生長因子β1表達的變化[J].解剖學雜志,2010,34(3):311-314.

    [11]郭宏波,徐秀紅,張玉海.巢蛋白免疫陽性細胞在成人胰腺中的分布[J].臨床和實驗醫學雜志,2002,1(14):218-219.

    [11]郭宏波,徐秀紅,張玉海.巢蛋白免疫陽性細胞在成人胰腺中的分布[J].臨床和實驗醫學雜志,2002,1(14):218-219.

    [12]Tino Klein,Zhidong Ling,Harry Heimberg,et al. Nestin Is Expressed in Vascular Endothelial Cells in the Adult Human Pancreas[J].J Histochem Cytochem, 2003,51(6):697-706.

    [12]Tino Klein,Zhidong Ling,Harry Heimberg,et al. Nestin Is Expressed in Vascular Endothelial Cells in the Adult Human Pancreas[J].J Histochem Cytochem, 2003,51(6):697-706.

    [13]葉健,何少健,劉瓊東,等.新生昆明小鼠胰腺巢蛋白陽性細胞的自然分化[J].中國組織工程研究與臨床康復,2009,13(14):2680-2684.

    [13]葉健,何少健,劉瓊東,等.新生昆明小鼠胰腺巢蛋白陽性細胞的自然分化[J].中國組織工程研究與臨床康復,2009,13(14):2680-2684.

    [14]張玲,洪天配,胡江,等.胎兒胰腺組織中巢蛋白陽性細胞的分離和體外增殖以及誘導分化[J].中國糖尿病雜志,2003,11(6):414-419.

    [14]張玲,洪天配,胡江,等.胎兒胰腺組織中巢蛋白陽性細胞的分離和體外增殖以及誘導分化[J].中國糖尿病雜志,2003,11(6):414-419.

    [15]Bonner - Weir S, Taneja M, Weir GC, et al.In vitrocultivation of human islets from expanded ductal tissue[J].Proc Natl Acad Sci USA,2000,97 (14): 7999-8004.

    [15]Bonner - Weir S, Taneja M, Weir GC, et al.In vitrocultivation of human islets from expanded ductal tissue[J].Proc Natl Acad Sci USA,2000,97 (14): 7999-8004.

    [16]王宏,胡江,李凌松,等.篩選后的巢蛋白陽性細胞流式鑒定及誘導分化[J].中國醫學科學院學報,2005,27(6):683-688

    [16]王宏,胡江,李凌松,等.篩選后的巢蛋白陽性細胞流式鑒定及誘導分化[J].中國醫學科學院學報,2005,27(6):683-688

    [17]黃海霞,陳玉英,倉輝,等.人胎胰巢蛋白陽性細胞的分離培養及其生物學特性研究[J].實驗生物學報,2003,36(1);25-31.

    [17]黃海霞,陳玉英,倉輝,等.人胎胰巢蛋白陽性細胞的分離培養及其生物學特性研究[J].實驗生物學報,2003,36(1);25-31.

    [18]鄭宗梅,陳東明,李凌松,等.體外培養及其誘導分化人胚胰腺巢蛋白和神經元素3陽性細胞的實驗.中國臨床康復,2005,269(9):62-67.

    [18]鄭宗梅,陳東明,李凌松,等.體外培養及其誘導分化人胚胰腺巢蛋白和神經元素3陽性細胞的實驗.中國臨床康復,2005,269(9):62-67.

    作者簡介:

    作者簡介:

    甘西西(1962-),女,漢,湖北咸豐,浙江海洋學院醫學院,高級講師。

    甘西西(1962-),女,漢,湖北咸豐,浙江海洋學院醫學院,高級講師。

    久久久久国产精品激情,色偷偷噜噜噜亚洲男人看片app,97视频免费在线观看.,操聏xxx日韩xxxx欧美xxxx,日韩欧美国产免费一二三区,日韩精品永久免费观看,国内精品一线二线三线,欧美亚洲精品二区,国产破处大片在线免费观看,精品女人内射国产99
    日韩中文字幕剧情在线播放 欧美一级做a爰片性色毛片 精品久久av专区 99久久无色码中文字幕,一本久… 黑色丝袜美腿图片 日韩精品高清一二三区 亚州av一区二区三区性色 激情综合网五月婷婷 中文字幕无乱码人妻丝袜一区二区 成人影院一区二区三区 国产色婷婷亚洲精品网站 日本熟妇乱子伦 久久人妻网69av 秋霞免费观看 91精品成人av 国产高清av毛片夜夜夜 劲爆欧美成人影院 欧美乱妇高清无乱码在线观看 黑人xxxx一区二区 cao死我吧在线视频 久久精品99中文字幕 av成人久久电影 亚洲欧美专区中文字幕 99久久精品国产亚洲av 交换夫妇韩国 亚洲视频青春草 能看的懂的永久视频在线观看免费 秋霞视频av 7777久久亚洲中文蜜桃 国产人妻麻豆精品 美女被扒开内裤猛入 蜜桃欧美精品在线 嘟嘟嘟www在线观看播放视频 亚洲大码av在线播放 免费在线观看黄色一级电影 最近2019中文字幕8在线看版 国产精品成人久久 国语对白做爰xxx 国内精品久久影院 精品一区二区,在线观看 www.欧美.亚洲.日本在线观看 av在线观看免费一区二区三区 精品国产乱码一区二区三区乱 欧美老熟妇欲乱高清视频免费 av观看在线高清 高清在线完整版免费观看 潮喷大痉挛绝顶失禁2 免费人成在线小视频 插逼网站免费播放 一区二区三区日本艳情电影 成人黄片久久久免费观看 欧美日韩免费综合视频 一操国产熟女 国产精品成人欧美一区 国产一区二区精品福利地址 天堂av亚洲 黑人美女av大全 男女边摸边吃奶边做视频免费看 成人精品一区二区免费n 999视频国产精品 亚洲av免费在线播 免费日本黄色视频网站 欧美视频日韩专区在线 夜夜贪欢夜夜爽少妇免费 最近中文字幕2019年中文字幕 亚洲av乱码一区二区三区了 欧美成人色的网址 可以看黄色的视频网站 精品人妻一区二区在线 色哟哟在线观看免费视频 99久天堂av在线播放软件 亚洲av国产精品蜜臀 一二三四韩国免费视频 亚洲av最近观看 av观看视频免费 一二三四在线社区观看 国产精品韩国一区二区三区 日韩精品永久免费观看 亚洲在线观看视频网站 在线观看的国产视频 国产av色网站 强行内射美女视频网站 www.91av在线观看.com 素人在线一区二区三区 人人妻人人澡人人爽人人精品免费 日本区在线观看 在线观看av免费不卡 午夜国产不卡小视频 宅男噜噜噜66国产在线观看 在线观看色黄网站 国产精品成人在线免费视频 亚洲国产二区v在线观看 欧美日韩国产精品综合 亚洲精品久久影院 国产精品a区二区三区在线 亚洲五月天丁香综合 五月婷婷六月丁香免费视频 成人黄片视频大全 日韩亚洲不卡av 啦啦啦www在线视频免费观看 国产精品吗久久久久久 亚洲精品在线观看视频免费观看 欧美黄色三级在线播放 连续中出白浆 国产精品偷伦视频播放,拳交 国产 日本 欧美一级片在线观看 最新国产在线播放一区二区 亚洲免费午夜av在线 免费女人18毛片水真多 日本经典影片视频 亚洲免费av加勒比资源 制服丝袜avvv 一区二区三区久久精品 亚洲av刺激片 久久国产精品性色aⅴ人妻 熟妇高潮呻吟视频 好男人免费观看高清视频 久久人人爽人人爽人人小说 黄色亚洲av电影 久久婷婷亚洲综合 蜜臀av国内精品久久 亚洲中文字幕在线视频免费 永久黄网站色视免费观看 成人欧美一区二区三区a级片 玩弄放荡人妻少妇小说 古装级毛片18以上观看免费 欧美老熟妇欲乱高清视频免费 国产久久精品一区二区三区 在线欧美色噜噜 成人午夜免费在线播放 久久这里有精品15一区二区三区 91麻豆 国产 又粗又长又硬又爽黄色视频 人妻少妇有码专区 黑人操亚洲女人黄片 少妇人妻精品一区二区三区免费 国产精品传媒影院 99国产精品久久久久久久成人 国产极品乱码久久久久一区二区 美女免费网站观看视频 98国产精品午夜免费福利视频 少妇被粗大进出爽叫 国产露脸野战在线视频 av一区四区在线观看 日本免费色视频 欧美日韩亚洲国产一区二区 a级毛片免费观看完整 女人十八水真多毛片 亚洲另类欧美二区 午夜影院一级黄 久久精品2019中文字幕 岛国大片免费观看不卡 亚洲精品久久影院 少妇被我搞到高潮视频 女人十八水真多毛片 国产露脸野战在线视频 伊人久久亚洲精品中文字幕 国内精品久久影院 饥渴少妇av 久久精品国产三级午夜 欧美成人wxv 亚洲av电影在线观看二区 91影院免费体验在线观看 国产福利精品视频一区二区 黄色视频免费观看欧美 精品伦在线观看 国产亚洲精品久久777777 亚洲av免费在线播 超嫩国产在线观看 国产9精品久久久久成人精品 亚洲av日韩aⅴ欧美精品 桃花社区在线观看完整版 中文有码在线不卡av av在线观看蜜桃视频 久久成人αv国产精品一区区 精品国产乱码一区二区三区乱 亚洲精品欧美精品成人 菠萝网站在线观看 麻豆激情视频网址 熟妇高潮呻吟视频 国产高清av毛片夜夜夜 五十六十熟妇熟女 一区二区三区无卡高清视频 97久久,久久人妻精品一区| 成人女同av免费观看网站 国产成年女人看毛片视频 日韩专区欧美精品 跪求在线观看av网站 97se亚洲综合一区 在线观看美女黄aa 日本av在线影院 三级高清黄色 日韩一级特黄高清免费 日韩视频免费在线观看内射 xxxx性bbbb欧美porn 亚洲国产日韩欧美高清 国产黄色片一级 国产真实野外在线视频 精品一卡2卡三卡4卡乱码免费下载 成人免费不卡的av 劲爆欧美成人影院 女18毛片a级毛片 少妇视频免费在线 五月婷婷,六月丁香 开心色婷婷综合 一区二区三区日本艳情电影 欧美一区二区av视频 国产午夜男女爽爽爽爽爽视频 大香伊蕉av在线 不卡的日韩av 欧美色视频在线看 久久久精品3d动漫一区二区三区 久久精品禁一区二区三区 欧美日韩国产精品综合 国产美女主播喷水视频播放 亚欧成人毛片一区二区三区四区 成人看片黄a免费看动漫 欧美成人wxv 国产成人高清精品亚洲一区 www在线区视频观看一区啊日 欧美日韩国产一区二区的 免费久久黄片 亚洲黄色综合 人妻被黑人粗大猛烈高h视频 国产成人垃圾片一区二区三区 日韩视频在线第二区 欧美激情视频国产精品 人妻中文字幕在线一区中文二区 国产美女视频内射 免费a级做爰片在线观看爱电影 www.亚洲久久爱 最新麻豆av在线 精品久久av专区 国产乱人伦偷精品海角视频海角 女人18毛片在线观看 大学生一级毛片高清版 亚洲情色av一区二区 91综合精品国产丝袜美腿 小sao货cao得你视频 黄片视频有哪些 欧美日韩高清不卡视频 一本综合久久97 国产又大又黄的免费视频 中日韩一级av中文字幕 精品少妇人妻a√免费久久 国产一区二区三区久久精品91 女生喷射精水视频 亚洲国产日韩欧美精品电影 久久国产精品人妻aⅴ麻豆免费看 国产一区二区三区欧美亚洲 久久精品国产亚洲av网站 亚洲av成人www新版精品久久 日韩av 大片在线 夜夜伊人久久成人av 丝袜制服 变态另类 中国精品久久久久国产 狠狠综合久久88亚洲喷潮 在线观看的国产视频 久久www免费人成看片小草 国产精品乱来视频 国产99久久精品无 精品国产亚洲二区 国产精品传媒影院 久久香蕉久久九九九av 精品伦在线观看 日韩 欧美 91 99国产精品丝袜久久久久久软件 色婷婷av天堂 成人免费黄色视频网址 午夜国产不卡小视频 欧美日韩亚洲丝袜 91av大片在线观看 最近中文字幕完整版免费2019 国产精品精久久 黑人美女av大全 欧美性videostv另类极品 日韩av 大片在线 老司机精品电影网 欧美专区亚洲国产 成人一卡2卡3卡4卡2021 制服诱惑一区两区 国产成人一卡2卡3卡4卡 亚洲av日韩aⅴ欧美精品 av成人在线观看网站 亚洲最大的成人网色 亚洲av色在线观看国产 欧美另类丰满熟妇乱xxxⅹ 久久影院2021 99精品国产av 边操边摸奶视频 精品国产在线观看一区 欧美视频日韩专区在线 亚洲精品一区最新 男女羞羞的视频在线观看 伊人久久大香线蕉成人 91最新亚洲中文字幕在线 亚洲中文字幕在线视频免费 香蕉视频污下载网址 久久久久久久久国产极品 成人精品久久久久久久一区二区 久久精品毛片 寂寞女人在线观看高清视频 国产经典a区久久久一区二区三区 成人欧美一区二区三区a级片 一级片免费在线观看的 国产αv久久成人一区二区三区 天堂资源网资源在线 免费在线观看黄色一级电影 日韩电影欧美精品 日韩精品美女久久久久av福利 se婷婷www麻豆不卡av 一区二区三区精品99 久久久久久不卡久久久 伦理午夜电影院 中文字幕第一页一区av 国产18禁无遮挡网站 超嫩国产在线观看 www99视频在线免费看 扒开腿就操视频 性少妇sex欧美 国产igao激情在线观看 av av免费在线 免费看少妇人妻偷人精品一区二区 av免费人妻日韩 暴雨梨花电视剧全集在线观看高清 亚洲一区二区三区日本综合欧美 亚洲av一二在线观看 人人妻人人澡人人爽人人精品免费 国产公妇伦在线观看 免费在线看18禁网站 不满人妻一区 久久午夜视频网 99久久久婷婷国产综合亚洲 在线观看美女黄aa 亚洲国产成人影院在线 亚洲综合av一 男女午夜视频免费观看 免费女人18毛片水真多 av日韩av在线 日韩 欧美 国产 免费 亚洲av日韩av在线综合 亚洲精品久久久久久成人软件 日日摸夜夜添夜夜添a国产三级 免费女人18毛片水真多 亚洲av色在线观看国产 午夜做a爰片久久毛片 97人人模天天爽 国产极品嫩嫩免费观看 超碰国产精品久久超碰国产99 蜜桃精品视频免费观看 www.中文字幕第一页 午夜免费啪啪无毒不卡 亚洲影院激情久久 五月六月婷婷在线视频 97久久精品国产麻豆 一二三四韩国免费视频 亚洲视频最新免费 高清国产成人在线 黄色免费a级毛片 波多野结衣人妻无吗 日韩最新av网站在线播放 亚洲电影在线不卡av 国产午夜福利在线播放视频 理论片韩国在线观看 97人人人人妻 国产videos久久 宅男噜噜噜66国产在线观看 老司机精品福利视频免费观看 国产毛卡片卡2卡3卡4卡 furry巨大粗爽黄网站 97久久精品国产麻豆 欧美成人国产精品第一区 在线观看免费高清成人av 最近的2019中文字幕免费视频 国产91成人精品亚洲精品 人妻少妇av一区二区三区密 久久久久国产av麻豆 中文字幕第一页一区av 久久亚洲精品系列网站 欧美成人一级大片视频 欧美日韩国产一级在线 国产成人精品中文字幕 精品福利国产一区 善良妈妈的朋友在线观看中文字幕 精品国产午夜福利全集在线观看 亚洲精品久久久久久成人软件 精品在线国产亚洲 黄的网站视频在线观看 日韩一区二区三区免费在线看片 欧美激情第一熟女hd 国产 日本 欧美一级片在线观看 国产在线免费精品视频 成人免费不卡的av 亚洲啪啪综合色 老司机精品福利视频免费观看 久久久中文字幕久久 古代一级毛片大全 嘟嘟嘟www在线观看播放视频 欧美综合乱码视频在线观看 国内精品卡一卡2卡3 在线观看的国产视频 日韩av免费一区二区在线观看 日日摸日日碰夜夜 亚洲av美国av亚洲av图片 一区二区三区日本艳情电影 综合国产av大全 av一级毛片在线免费看 国产在线精品自产拍 国产午夜中出人妇在线观看 在线丁香视频 午夜福利精品更新 国产乱码精品一区二区三区优点 色永久免费视频 女人十八毛片a级毛片视频 日韩欧美熟女在线视频 国产在线精品自产拍 欧美日韩在线激情视频 日本三级2017在线观看高清 a级毛片免费视频 日日爽天天爽夜夜爽 黄色深情视频在线播放免费网站 久久www免费人成看片小草 国产精品三级快看 国产91丝袜在 五十六十熟妇熟女 一级a爱欧美毛片免费 а√天堂8资源中文在线官网 综合国产av大全 亚洲精品视频免费在线观看网站 最近中文字幕2019年中文字幕 国产精品一区二区最新在线观看 跪求在线观看av网站 九九久久精品国产婷婷 国产精品福利高清hd 女18毛片a级毛片 午夜精品一区二区三区电影 午夜福利免费影视 久久久久亚洲欧美 国产黄色片久久 免费看黄片18禁免费网站 日韩欧美在线1区 亚洲av免费高清不卡 精品少妇人妻a√免费久久 久久精品国产72国产精, 国产精品a区二区三区在线 三级免费久久观看 女人18毛片在线观看 久久视频三级 性欧美精品久久久久久久午夜一区 精品欧美一区二区三区黑人电影 国产午夜福利在线播放视频 青青草原亚洲免费 免费观看 国产精品 jzzijzzij亚洲成熟熟女少妇 99久久成人精品国产果冻传媒 好男人免费观看高清视频 国产露脸野战在线视频 国产乱码精品一区 在线观看亚洲av 午夜视频在线观看国产18 天堂av色网大全集 黄色成人毛片网 free性videoxxx欧美色 桃花影视在线 日本亚洲色图视频www 亚洲精品一区二区久久 国产公妇伦在线观看 骚妇一级免费视频 精华液一区二区三区别在哪 强行内射美女视频网站 a级毛片免费视频 精品人妻一区二区在线 策驰影院在线网站观看 中文在线天堂官网网站 香蕉视频污下载网址 97久久精品国产麻豆 91久久嫩草影院一区二区 jzzijzzij亚洲成熟熟女少妇 夜夜伊人久久成人av 午夜精品久久久久久久久日韩 最近中文字幕完整版免费2019 成人黄色片在线观看 亚洲成人日韩 欧美激情视频国产精品 永久黄网站色视免费观看 精品欧美一区二区三区黑人电影 在线观看波多野结衣一区 欧美精品激情一区 国产成人一卡2卡3卡4卡 精品99婷婷 国产成人高清免费视频网站 国产9精品久久久久成人精品 伊人久久大香线蕉成人 国产 日本 欧美一级片在线观看 久久www免费人成看片小草 大学生一级毛片高清版 久久久久久久久女人体 亚洲国产偷拍av 国产精品一区二区+在线播放 久久人妻网69av 99国产精品丝袜久久久久久软件 欧美网色视频 国产欧美精品三区 免费看少妇人妻偷人精品一区二区 黄色深情视频在线播放免费网站 国产精品黄片试看 强行内射美女视频网站 女生看毛片吗 在线观看色黄网站 久久久久国产av麻豆 中国少妇精品久久久av 美女在线播放 91精品啪在线观看国产色 嫩草影院日韩av videossex极品 国产精品久久久久精品免费免费 日本h片免费 国产一区二区青草久久 9久久婷婷国产综合精品性色 99精品久久久久网免费 国产午夜福利精品推荐在线观看 国产午夜福利精品推荐在线观看 策驰影院在线网站观看 中文字幕91久久 人人人妻人人澡人人爽视频一区 www.sex6sex.com av岛国电影在线播放 日韩欧美国产一区二区精品 黄色毛片大全免费看 97久久久国产精品消防器材特色 蜜桃日本免费观看mv免费版8网 日女人视频毛片 好色人妻一区二区 日本av在线影院 4388x亚洲最大成人网 在线天堂www在线中文下载 午夜福利精品更新 亚洲欧美日韩精品国产 www.亚洲av免费观看 日韩最新av网站在线播放 亚洲 欧美 婷婷 国产成年女人看毛片视频 女人18毛a级毛片免费观看 女人被男人日视频在线 性生交性生活大片免费看 免费两个人看的视频 少妇福利影院 男女边摸边喝奶边拍视频 五月天色婷婷丁香 国产毛卡片卡2卡3卡4卡 亚洲另类色区 丰满人妻一区二区三区色 亚洲国产偷拍av 一个人免费观看在线高清 裸体裸乳被免费观看 久久久久久久精品老熟妇 欧美成人h版在线观看 日韩福利永久 久久香蕉国产一区 av日韩在线观看网址 高清国产成人在线 精品国产三级a∨在线电影 日韩视频免费在线观看内射 亚洲国产日韩一区精品 www.亚洲av免费观看 永久黄网站色视免费观看 国产午夜男女爽爽爽爽爽视频 国产精品专区免费视频 三级免费久久观看 无遮无挡18禁啪啪成人男男 在线观看波多野结衣一区 国产亚洲女人久久久久毛片 免费的黄色视频九九 在线观看色黄网站 久久久久久久久女人体 韩国三级大全在线观看 亚洲av电影在线观看二区 女人十八水真多毛片 中文字幕在线永久视频小 999视频国产精品 中文字幕日韩欧美在线网 久久99久久96这里只有精品 最近中文字幕2019年中文字幕 全网免费在线观看一级片 黄片视频十分钟 国产一卡二卡三卡四卡五卡 奶涨边摸边做爰视频 人人人妻人人澡人人爽视频一区 欧美成人午夜免费观看 黑人美女av大全 国产乱在线伦视频 你个小sao货把你cao烂 久久成人在线精品 欧美日韩免费综合视频 一区二区三区资源在线观看 国产成人精品中文字幕 骚妇一级免费视频 亚洲视频精彩免费看 国产极品嫩嫩免费观看 国产性―交一乱―色―情人免费看 国产又粗又猛又爽又黄的视频99 一区二区三区无卡高清视频 成人永久视频 国产成人亚洲精品三区四区 国产精品久久久久精品免费免费 欧美,日韩二区,三区 一本色道av在线播放 久久久久久不卡久久久 亚洲欧美国产日韩在线观看 国产精品久久久久精品电影区 中国精品久久久久国产 女人被男人日视频在线 女人爽到高潮视频免费直播1 久久精品禁一区二区三区 香蕉久久青青91竹桃蜜色国产 男人插入女人下面在线观看视频 免看a级毛片 伊人久久大香线蕉成人 黄色成人欧美 国产老妇伦国产熟女老妇久 精品高清国产在线观看 日日操天天干夜夜撸 av观看视频免费 国产精品久久久一本精品 在线,亚洲欧美在线综合一区 最近的2019中文字幕免费视频 善良妈妈的朋友在线观看中文字幕 国产成人垃圾片一区二区三区 最新国产在线播放一区二区 免费完整av片在线播放 亚洲精品久久久久久成人软件 性欧美白人极品1819hd 漂亮人妻被黑人久久精品 一级a做片免费观看久久国产电影 韩国伦理电影全集 黑色丝袜美腿图片 午夜影院一级黄 高清国产成人在线 99久久精品久久久久久清纯,久久久 久久不卡的av 久久久久精品免费看黄色_级片 亚洲www 7777久久久久久久 亚州av一区二区三区性色 香蕉视频网站下载免费 亚洲va天堂va欧美ⅴa在线网 久久久久国产三级网址 日本在线一区在线 精品女人内射国产99 cao死我吧在线视频 99久久久精品免费视频 亚洲激情av男人的天堂 亚洲精品久久久久久成人软件 ◇亚洲毛片在线手机看网站 99精品久久免费精品久久 劲爆欧美成人影院 cao死我吧在线视频 精品国产伦一区二区三区小说 亚洲va天堂va欧美ⅴa在线网 av观看视频免费 桃花影视在线 一区二区三区熟少妇 电信卡能跨省补卡吗 亚洲av18p 欧美日韩视频在线观看不卡 韩国伦理电影国语 亚洲av18p 女人被男人日视频在线 国产卡一卡二卡三 男女刺激视频在线播放 好男人精品视频在线观看 人妻在线系列一区二区三 国产毛片不卡 午夜桃花在线 cao死我吧在线视频 国产高清 在线 秋霞免费观看 啪啪啪高潮免费视频 欧美日韩国产二区 国产三级国产三级在线精品 2o19永久视频在线观看 美女视频黄频大全大免费 亚洲成人动漫天堂 五月六月婷婷在线视频 高清国产成人在线 五月婷婷,六月丁香 国产成人精品性色在线观看 国产一区视频视频 久久久久久精品a级毛片蜜桃 日本高清免费色视频 www99视频在线免费看 丰满少妇女人a毛片视频 国产精品丝袜久久久久久久 9元移动花卡怎么样 护士一级特黄特色大片 av亚洲动漫 久久久久久久久久久成人av 我看免费的一级片免费播放 91香蕉视频色下载 亚洲毛片av一区二区三区 无遮挡很黄刺激很色网站免费 国产av现在看 男女激情猛烈视频免费观看 亚洲黄色在线播放av 9久久婷婷国产综合精品性色 交换夫妇韩国 亚洲性夜夜射 av视频在线观看网站免费 日韩欧美一级特黄大片 欧美成人国产精品第一区 黄色片网站高清 亚洲最大中文字幕在线 美女人妻被插入久久 美女脱了内裤被男人想看视频 我看免费的一级片免费播放 波多野结衣人成在线视频 国产欧美日韩综合在线成 荐片播放器ios版 亚洲va天堂va欧美ⅴa在线网 在线播放欧美国产日韩 se婷婷www麻豆不卡av 狠狠综合久久88亚洲喷潮 97在线高清视频 少妇人妻精品一区二区三区免费 国产成人亚洲精品三区四区 久久久久成人网 亚州av一区二区三区性色 久久久国产精品 亚州av一区二区三区性色 97碰视频在线观看 久久久久久久久久大片 一级a做片免费观看久久国产电影 亚洲av电影在线看一区 免费a级做爰片在线观看爱电影 久久99久久96这里只有精品 在线观看免费高清成人av 日本a在线视频 在线日韩欧美观看 无遮挡很黄刺激很色网站免费 策驰影院在线网站观看 日日撸夜夜操视频 欧美xx黑人xx 日本二区三区免费在线 一级不卡黄色视频 乱人伦国产视频 精品国产在线观看一区 1区和2区乱码 中国精品久久久久国产 日韩福利永久 精品久久久久久久久人妻 国产亚洲精品一级在线观看 国产精品久久久久av女爽 久久久国产亚洲精品日韩 亚洲精品视频免费在线观看网站 精品人妻一区二区在线 边插边吃奶视频 欧美成人色的网址 人妻少妇av一区二区三区密 日韩国产亚洲av播放 免费看的黄色片子 亚洲精品一区二区久久 连续中出白浆 国产性―交一乱―色―情人免费看 国产在线免费精品视频 黄色片子在线免费观看 亚洲全球日韩av影视 美女的视频是黄的免费 久久久精品3d动漫一区二区三区 24小时日本免费看 中国老妇女乳头视频 亚洲天堂男人高清 久久99精品久久久97夜夜嗨 成人国产精品一级毛片 成人精品1区二区 亚洲精品在线观看视频免费观看 午夜做a爰片久久毛片 久久精品国产三级午夜 美女人妻被插入久久 国产肥熟女视频一区二区三区 国产毛毛片一区二区三区 国产毛片不卡 一个人免费在线观看高清 日日爽天天爽夜夜爽 久久香蕉国产一区 日韩 国产 欧美一区二区三区 亚洲av色一区 国产人妻麻豆精品 日本午夜视频www 超嫩国产在线观看 国产成人精品中文字幕 少妇被粗大进出爽叫 琪琪色av中文字幕 欧美zozo人牲交 av观看视频免费 久久久中文字幕久久 国产亚洲欧美一区91 99久天堂av在线播放软件 91影院免费体验在线观看 一二三四在线视频社区 一二三四高清在线看免费视频 天堂在线中文在线资源 亚洲国产二区v在线观看 欧美视频日韩专区在线 永久黄网站色视免费观看 欧美日韩亚洲综合图区 在线丁香视频 国产一区二区三区久久精品91 亚洲av电影在线看一区 久久精品禁一区二区三区 成人永久视频 国产99久久精品无 一级不卡黄色视频 国产69精品久久孕妇 少妇人妻精品一区二区三区免费 欧美日韩精品久久久免费看 宅男66噜在线永久免费观看 日日撸夜夜操视频 欧美自拍亚洲精品动图 91最新亚洲中文字幕在线 国产亚洲精品一级在线观看 美女黑色丝袜高跟鞋 欧美狂野性生活视频 成人在线欧美精品 午夜男女性刺激视频 日韩欧美国产免费一二三区 日本在线一区在线 亚洲专区香蕉 一区二区三区国产av在线观看 欧美黑人巨大在线 久久久久久久精品老熟妇 久久国产精品亚洲av麻豆 97久久久国产精品消防器材特色 国产av 男人天堂 久久香蕉国产一区 免费的黄色视频九九 国产精品成人久久 国产卡一卡二卡三 久久久在线av 亚洲激情久久精品 天堂在线中文在线资源 国产成人观看免费 精品亚洲国产一区在线 无遮挡很黄刺激很色网站免费 日韩精品高清一二三区 午夜影院一级黄 精品一区二区国产在线 一二三四在线视频社区 521se精品嫩草影院 成人女同av免费观看网站 日韩av潮喷在线观看 亚洲国产欧美日韩-区二区三区 高清日韩一区二区三区视频 四季精品人妻av一区二区三区 亚洲av18p 色哟哟在线观看免费视频 午夜精品久久久久久久久日韩 国产igao激情在线观看 永久av免费观看 亚洲中文字幕在线视频免费 亚洲精品久久影院 久久香蕉国产一区 操聏xxx日韩xxxx欧美xxxx 久久久久国产三级网址 成人卡通中文字幕 99日这里只有精品 美女黄网站永久免费观看软件 国产午夜福利在线播放视频 久久久中文字幕久久 亚洲情色av一区二区 国产jk喷白浆精品视频网站 亚洲va精品在线 97人人人人妻 精品一区二区国产在线 成人免费黄色视频网址 久久成人亚洲一区二区 电信卡能跨省补卡吗 久久久欧美午夜高清 国产精品黑丝高跟在线粉嫩 女人被男人日视频在线 在线国产一区二区三区视频 黄片下载,在线观看 我看免费的一级片免费播放 99久久人人爽爽亚洲精品美女 日本色www视频 jzzijzzij亚洲成熟熟女少妇 成人 欧美 一区 女人十八水真多毛片 黄色片三级在线观看 亚洲中文字幕网站在线观看 99久久人人爽爽亚洲精品美女 亚洲最大的成人网色 日韩欧美熟女在线视频 欲求不满人妻中文字幕视频 中文字幕制服丝袜av久久 91神马影院在线观看 欧美性激情在线免费观看 国产成人精品性色在线观看 国产一区二区三区精品在线播放 国产精品韩国一区二区三区 国产一级a爱在线观看 婴儿边吃奶边哭是怎么回事 搡女人真爽免费视频大全 素人在线一区二区三区 开心色婷婷综合 久久久97精品国产一区蜜桃 国产极品嫩嫩免费观看 av观看视频免费 日本经典影片视频 护士一级特黄特色大片 成人看片黄a免费看动漫 久久成人亚洲一区二区 欧美色视频在线看 国产香蕉精品久久久 99精品国产综合一区亚洲 女生喷射精水视频 少妇高潮动态 夜夜贪欢夜夜爽少妇免费 天堂网中文在线官网 国产精品久久久久av女爽 免费观看 国产精品 国产破处大片在线免费观看 国产91成人精品 好色先生成人av在线 人插人人添人 国产视频一区二区三区四区在线播放 日韩一区二区三区免费在线看片 欧美日韩亚洲综合图区 黑色丝袜美腿图片 免费观看 国产精品 久久 精品6 久久久久亚洲欧美 中文字幕75在线精品视频 东京热av麻豆中文字幕 午夜aⅴ在线观看 日韩人妻在线影院图片 欧美性激情在线免费观看 丰满人妻一区二区三区色 久久亚洲精品系列网站 97人人人人妻 成人 欧美 一区 久久久久成人网 久久婷婷亚洲综合 久久久久久久福利精品 一级a一级爰片免费视频 五十六十熟妇熟女 av亚洲动漫 国产福利精品视频一区二区 女人被男人日视频在线 中文字幕91久久 欧美一级做a爰片性色毛片 亚洲视频精彩免费看 内射毛片视频在线 两个人看的www日本 美国黄色a级毛片 av在线观看蜜桃视频 国产午夜精品影院 在线欧美色噜噜 爱爱动态图啪啪 成人精品久久久久久久久 女人18毛片在线观看 gv977.com 久久久久女人精品毛片少妇 成人午夜精品久久久久久久小说 久久www免费人成看片小草 欧美精品国产精品日韩电影 成人 欧美 一区 中文字幕第五页久久 2023中字幕永久免费 亚洲精品欧美视频 国产精品a区二区三区在线 av中文字幕第一页二页 女人十八毛片a级毛片视频 亚洲精品一区最新 男女羞羞视频网址免费观看 亚洲精品高清自拍 亚洲伊人aa 亚洲免费av加勒比资源 啪啪啪高潮免费视频 饥渴少妇av 一毛一片a级毛片 免费的a级片 欧美成人色的网址 aaaa大片少妇高潮免费看 欧美日韩亚洲丝袜 国产精品传媒影院 女生高潮喷水的视频 欧美精品激情一区 国产香蕉精品久久久 61精品人妻一区二区三区 素人在线一区二区三区 91久久嫩草影院一区二区 福利片在线观看 小视频 国产成人欧美一区大片 一区二区三区精品99 黄片免费久久久 国产精品成人在线免费视频 蜜桃欧美精品在线 交换夫妇韩国 亚洲国产二区v在线观看 欧美日韩国产一级在线 欧美人人澡人人妻人人添
    五月天丁香六月| 亚洲日本黄色大片| 双女超薄丝袜脚交调教| 男女免费视频观看在线| 色哟哟麻豆系列| 男人添女人下部高潮全| 免费人成视频网站在线18| 激情 人妻 偷乱在线视频| 中文字幕a久久| 欧美黄色片一级视频| 色视频在线看欧美| 成人动漫黄色在线观看| 国产一区二区三区精品免费观看| 91成人自拍视频_日本欧美精品视频在| 国产亚洲tv看精品| 国产伦码精品一区二区| 色噜噜精品一区二区三区av| 超级国产人人偷人人干| 久久网址电影成人| 中文字幕欧美日韩专区| 日本av在线观看高清| 香蕉avtv| 成人黄色全视频在线观看视频在线播放| 中国av电影一区二区三区| 欧美亚洲精品乱字幕| 欧美日本道1区2区3区| 男人插女人阴道的视频免费在线观看91| 久久综合中文字幕| 一区二区国产视频精品| 国产亚洲视频一区二区在线观看| 日韩国产欧美91| 国产全部av免费在线| 深夜a级毛片免费| 草久青春在线观看| 国产成人久久精品二三区麻豆主演| 亚洲成av人一区二区电影| 日本岛国永远免费| 成人精品一区二区久久久| 玖玖玖精品内射| 九九re热国产精品| av——天堂网| 黄色免费日韩视频| 欧美日韩精品三区| 午夜福利二区| 国产产一区二区三区久久毛片国语 | 2021精品卡一卡二卡3卡免费| 久久99精品综合九九九久久久| 大香蕉av片在线观看| 激情福利美女视频| 少妇人妻av专码视频| 国产av欧美avav天堂| 在线亚洲电影av| 午夜大香蕉免费看| 欧美精品国产精品日韩电影| 人妻少妇视频专区免费| 又大又爽又粗又长| 狠狠爱成人在线视频| 亚洲最大成人网一区二区三区| 人妻久久久久久中文字幕| 国产av制服丝袜诱惑| 最新中文字幕日本久久久| 亚洲久久成人在线| 国产精品视频亚洲一区二区三区| 国产亚洲精品久久久久久一级| 少妇熟女国产| 久久九九亚洲精品视频| 国产乱妇乱子视频在播放| 人人妻日日夜夜| 亚洲福利在线午夜| 日韩综合av中文字幕av| 在线视频 国产 乱| 吟呻人妻一区二区三区| 美女高潮视频三级| 97视频高清在线| 亚洲高清av观看| 亚洲v欧美v日韩| 男女边吃奶边操边啪啪| 国语成人黄色视频| 成人快播在线播放| 久久国产精品亚洲av国网站| 日本中文不卡人成在线视频| 欧美精品久久久久久久久久久| 欧美精品一区二区在线观看视频| xxx欧美野战| av麻豆网址| 国内精品久久久久久久影视一| 99国产精品久久久久99| 为你提供国产精品久久久久久久久| 久久亚洲精品系列网站| 最近2019年中文字幕网| 欧美在线观看免费不卡精品视频| 美女黄视频黄片欧美亚洲| 亚洲一区伊人| 日本国产欧美视频| 一区二区色av| 欧美精品视频在线播放一区二区| 国产精品一区二区视频免费| 美女被日啊啊啊| 大香蕉97爽爽夜夜| 国产97超碰久久精品| 欧美18处交| 97日韩人妻一区二区三区久久| 亚洲 欧美 婷婷| 99超在线视频| 欧美激情一区二区二区高清视频| 亚洲成人色婷婷在线| 黑色丝袜在丝袜国产福利| 日韩成人色视频在线播放| 国产精品99久久久久久宅男性色| 不卡av在线播放网站| 在线一区二区三区国产精品| 交换朋友夫妻客厅互换4韩国| 亚洲伊人久久久久久久| 99精品国产人妻蜜桃国产| 亚洲av成人在线网站| 男女十八禁啪啪啪无遮挡网站| 国产视频色大全| 国产精品久久精品第一页| 日本老妇人交配| 午夜福利精品在线观看| 性人久久久久久久久| 黄色aa大片| 丝袜玉足交好爽| 蜜桃视频免费www| 少妇毛片毛片| 福利男女视频| 91亚洲欧美日韩精品久久奇米色| 国产馆熟女一区二区| 男女嘿咻无遮挡免费观看| 婷婷国产精品久久蜜臀| 爽 紧 大 粗 水多| 国产精品亚洲成人| 香蕉久久人人97超碰caoporen| 欧美成人精品欧美一级乱黄一区| 精品亚洲成av人片在线观看| 国产精品一区二区三区韩国| 亚洲精品网站播放| 色司机福利视频| 97精品高清一区二区三区| 在线的日韩av| 免费18禁,网站| 日本天堂影视在线观看mv| 午夜福利精品在线播放| a毛片基地免费全部视频| 国产综合在线亚洲| 婷婷色六月丁香亚洲综合| a自拍黄片视频| 男女18禁无遮挡| 熟女人妻aⅴ一区二区三区网| 亚洲精品av成人影院| 亚洲最大的免费中文字幕| 天堂资源中文8在线下载| 久草热久草综合视频在线观看| 少妇熟女国产| 啦啦啦www在线观看免费观看| 欧美日本亚洲国产性感的黄色片| 国产91精品高清一区二区三区| 亚洲va欧美va人人爽成人影院| 日韩视频高清免费观看| 看一级免费黄色毛片| 大片电影在线免费观看全集 | 久久精品 一区| 91人妻人人妻| 边摸边吃奶边做叫床视频| 欧美一卡2卡三卡4卡无卡免费| 91中文字幕第一页| 国产一区,二区在线视频| 久久人妻av免费看| 久久久久久久黄片| 夜夜躁很很躁日日躁2022| 瀚海精品商务酒店| 日本xbxb视频在线观看| 国产馆熟女一区二区| 久久午夜午码鲁丝片午夜精品 | 五月婷婷六月丁香综合激情| 欧美精品系列一区二区三区| 久久久成人亚洲| 人妻熟妇久久久久久精品无| 欧美亚洲电影一区| 精品国产乱码久久久久大片| 交换年轻夫妇播放| 最新黄色网址av| 一本色道av久久精品在线| 看日韩高清av| 国产日韩亚洲另类| 国产人妻精品区一区二区三区| 好色先生成人av在线| 女生的呻吟视频| 国产精品乱码久久久| 三级电影院一区二区三区| 嫩草影院永久地址免费观看| 18禁av片免费看网站| 色哟哟在线视频免费观看| av青青草原一区| 午夜特黄a级毛片免费看| 超级教师高清免费观看完整版| 99国产精品丝袜久久久久久蜜桃| 中文字幕久久久久久久久久| av动漫在线亚洲| 理论在线电影最新午夜影院| 亚洲精品久久久久久婷婷| 中文字幕制服丝袜av久久| 精品亚洲欧美日韩网站| 午夜福利视频在线观看国产| 国产免费av国片精品一区二区| 精品视频中文字幕在线观看| 日本在线一二三| 在线播放制服丝袜av| 亚洲成人中文字幕久久 | 日韩1区二区视频| 欧美黄片在线视频免费| 情侣露天野战视频在线播放| 国产欧美一区二区精品性色tv| 国产一卡二卡有限公司| 国产精品天堂网av| 国产性―交一乱―色―情人免费看| 免费看的亚洲av| 樱花草视频在线观看.www| 欧美狂野性生活视频| 五月天丁香影院| 日韩免费中文字幕免费观看视频| 国产精品伦子一区二区三区| 手机169福利盒子永久| 日本一级爽快片淫片100| 中文字幕一区日韩精品欧美丝袜| 亚洲av男人天堂手机在线版| 男女淫交免费观看的视频| 国产丝袜脚网站| 真正的国产av| 一级片视频观看| 久久香蕉精品视频国产 | 亚洲电影av天堂| sao虎视频网站入口网址| 看美女的大乳头| 国产91蜜桃麻豆精品一区二区| 久草热久草综合视频在线观看| 国产一区二区综合在线视频| 久热爱精品视频在线| 成年女人wwxx免费| 欧美成人一级大片视频| www.色大姐.com| 亚洲无遮挡裸体视频| 成人在线播放黄色视频| 一级女人18片毛片免费视频v| 欧美日本国产一区在线| 欧美性感美女一区二区三区| 噜噜视频在线播放免费| 国产精品欧美成人| 亚洲精品久久久| 在线精品国产亚洲av麻豆| 99久久精品久久久久婷婷婷婷| 98精品视频一区二区三区| 成人性生交大片免费看10| 啦啦啦在线观看免费www| 美女成人黄色片| 性xxxfreexxx中国少妇| 亚洲乱码av中文在线播放| 黄的网站在线观看| 国产三级精品三级在线观看| 三级国产精品一区| lry精华液| 偷拍亚洲另类丝袜| 一本一本久久aa国产精品| 男在上女在下黄色视频| 老鸭窝在线观看的| 日韩av免费电影av免费| 欧美成人三区| 精品亚洲第一页| 女人17毛片水真多| 久久久久夜夜精品视频| 蜜桃电影视频| 国产视频永久网址| 日批国产精品视频免费观看| 亚洲欧美另类少妇18| 全免费a级毛片在线观看| 精液怎么变黄色| av 免费在线观看网站| 久久成人国产亚洲| 国产黄片视频现在免费观看| seyu人人爽人人| 精品国产免费第一区二区三区日韩| 男插女下体免费视频试看| 男女搞逼视频在线观看| .....天堂网www在线资源| 国产高清精品在线视频| 一个人免费看的www视频高清| 极品美女啪啪到高潮免费看| 未满十八岁禁看软件免费| 欧美性片在线观看69式| 最新黄色网址av| 夫妻免费生活片| 美腿丝袜v在线第一页| 99精品国产福利片在线观看| 欧美亚洲国产看看| 六月丁香久草| 久久久9色精品国产一区二区三区| 国产一区二区波多野结衣| 中文字幕人妻va一区二区| 精品久久人妻av| 精品国产网站在线免费观看| 91成人精品视频在线| 精品久久精品久久精品久久国产 | 夏洛特烦恼在线看高清免费观看 | 中国美女激情免费视频| 欧美激情ⅹxx免费视频播放器| 蜜桃av久久久久免费网站| 久久亚洲精品欧美精品| 午夜福利免费永久看视频| av av免费在线| 伦乱在线观看| 成人一区二区高清视频| 欧美精品久久久久午夜福利| 制服丝袜亚洲精品激情欧美| 国模一区二区三区白浆| 国产成人亚洲18综合| 亚洲国产很多精品一区二区三区| 黄色污网站免费观看| 青青青国产精品国产精品久久久久 | 午夜国产精品福利在线| 成人欧美大片免费观看| 国语自产拍在线视频中文| 五月天丁香影院| 久久久亚洲成人一区二区三区| 久久99国产精品成人| 日韩亚洲高清一区二区三区| 国产av天堂亚洲国产av麻豆| 国产精品久久免费中字幕| 在线免费观看av一二区| 久久久99久久高清国产不卡| 天堂 在线最新版| 国产精品久久久久久麻豆欧美| 免费一看一级毛片全播放| 亚洲欧美另类激情一区| 97免费观看视频在线观看| av片在线不卡观看| 麻豆国产精品久久天堂| 最新丝袜喷水网站| 不要舔了要高潮了| 久久久久精品久久99| 无遮挡羞羞的视频在线观看| 成年禁看永久视频免费在线播放| 国产高中生在线视频| 免费看成年美女洗澡网站| 久久精品99国产亚洲a麻豆| 在线观看免费网站黄色视频| 亚洲中文蜜桃av| 日本在线 一区| 嘿咻嘿咻动态图| 青青草原午夜| 最近中文字幕2019免费版2019 | 观看一级片播放| 性辱女警在线播放| 亚洲有在线观看| 国内毛片毛片毛片毛片高清| 免费在线观看一级s片| 国产精品一区二区三区四区不卡| 中日韩精品视频一区二区三区| 成人欧美一区二区三区黑人3p| 亚洲av乱码久久精品蜜桃国产| 国精品偷自拍| 劲爆欧美成人影院| 亚洲av男人天堂手机在线版| 国产porn在线精品| 在线国产激情视频| 国产在线观看黄色视频| 婷婷中文av在线| 在线日本高清日本免费| 亚洲精品久久久久久下一站| 亚洲av成人www新版精品久久| 一区二区三区乱码人妻| 别揉我奶头免费视频www| 一级a做爱片免费观看| 丝袜精品人妻久久久久久久| 国产一区二区精品电影在线观看| 一本色道久久综合亚洲精品小说| 黄色大片,大片| 99re在线都是精品视频| 国产99色精品| 国产伦黄站高清视频| 成人黄色亚洲视频| 精品日韩欧美国产| 国产床上激情视频| 日本精品午夜视频| 国产精品国产香蕉在线观看网 | 夜夜爽天夜夜爽夜夜夜夜| 亚洲中文字幕一区二区三区日韩| 午夜两性激情视频| 97久久99久久久久99久久97| 国产对白叫床清晰在线播放中| 亚洲男人天堂网!| 日韩中文字幕中文有码| 亚洲av电影在线看一区| 亚洲av成人一区二区电影在线| 99国精品自拍偷| 国产精品成人免费视频不卡| 女人与狍牲交一级毛片| 国产在线视精品在一区| 免费毛片a级毛片免费观看800| 久久久久人妻一区精品果冻 | 国产野战福利视频一区| 北原夏美在线观看网站| 香蕉在线观看精品视频| 美女性感视频在线观看| 99国精品午夜福利视频不卡99 | 日本黄色网址视频| 亚洲人免费在线播放| 国产精品国码av| 欧美精品国产精品日韩电影| 美日韩视频二区| 97婷婷亚洲综合狠狠| 2021年国产精品自线在拍| 亚洲一区二区三区免费看av| 98精品国产高清在线| 午夜热门精品一区二区三区的区别| 久久人妻精品一区5555| 性欧美俄罗斯精品| 日韩欧美亚洲第一久久| 人妻最新视频| 国产丰满性熟妇ⅹxxooozz| 国产午夜男女乱淫真视频播放| 裸体一级毛片免费看| 高清国产熟女| 男女视频高清免费观看| 又粗又爽又黄少妇| 老司机成人av免费视频| 夜夜艹日日爽| 久久99精品久久久久久国产免费| 国产伦理自偷自拍| 免费观看 国产精品| 亚洲天堂av网在线| 日韩人体av免费播放| 国产网友自拍视频在线看 porn| 国产又粗又猛又黄有色的视频 | 亚洲欧美激情综合首页| av亚洲一区二区三区| 在线亚洲精品91| 麻豆国产亚洲| 91亚洲精品蜜桃| 7777久久亚洲中文字幕蜜桃 | 欧美精品免费观看二区| 国产午夜精品线观看| 亚洲av看片在线| 四季av在线一区二区三区| 欧美∧亚洲∧日韩精品综合| 国产免视频在线观看| 国产黄色 在线观看| 一二三四在线社区视频| 亚洲jdav简单av在线观看| 日本最色视频免费| 午夜激爽视频在线播放网站| 人妻校园春色一区二区| 终极教师电影在线观看| 91视频免费亚洲| 亚洲欧美另类激情一区| 欧美日韩视频在线| 欧美成人色吧| 激情视频在线一区二区三区| 一年片在线观看完整版免费| 国产剧色在线| 精品欧美日韩在线播放| 中文字幕奈奈被公侵犯| 日韩v亚洲v欧美v精品性天堂| 成人激情免费视频网站| 久久影院国产综合| 免费久久黄色一级片| 国产成人在线免费观看av| 精品国产av久久久久久久| 97在线观看视频网站| 欧美日韩国产电影综合| 久久久久久久毛片精品美女| 免费不卡黄色视频观看| 久久99精品麻豆婷婷久久| 日韩欧美二区在线观看| 色婷婷欧美综合| 熟妇丰满av| 无遮挡黄色免费网站| 亚洲毛片不卡av在线播放一区二区 | 亚洲成人有码区| 97超碰在线免费视频观看| 好男人视频在线观看免费高清| 亚洲国产精品va在线观看嘿嘿 | 777gn亚洲综合国产| 国产欧美久久亚洲| 久久国产高跟丝袜| 免费在线观看黄色下载| 秋霞高清av| av永久免费观看网址| 喷水喷潮电影| 免费人成视频在线观看网址| 婷婷视频一区二区三区| 亚洲天堂麻豆av网| 中文在线观看一区| 久久久久久精品免费高潮| 日韩av三级网| 成人美女黄网站18禁无遮拦| 日韩中文字幕精品在线观看视频| 国产18久久久久久| 新国产精品视频福利免费| 国产精品亚洲影院久久久| 一边做一边亲一边摸好爽视频| 午夜影院一级黄| 黄色日本视频网址| 女人天堂欧美视频| 中文字幕无线码一区在线观看| 女人牲交的视频| ww.久久国产免费| 在线观看亚洲国产色| 成人黄网站无遮挡免费| 亚洲av一卡| 最新亚洲av网站免费观看| 东京热,男人的av天堂| 久久久精品人妻一区二区三区漫画| 一二三四在线观看免费视频中文版| 内射毛片内射国产夫妻少| 国产精品国产三级久久久久电影| 国产美女在线高潮精品| 国产亚洲l区2区在线观看| 国产午夜小视频福利站| 国产一级特大黄av毛片| 国产成人一卡2卡3卡4卡| 青草草在线视频免费观看19| 激情五月婷婷激情综合| 中文字幕成人在线视频| 白嫩嫩的奶头视频| 日韩精品一区二区三区免费在线观看| 亚洲国产另类久久精品网站| 国产在线看黄色视频| а√天堂资源地址在线中文| 亚洲精品乱码久久久久久日本91| 玩弄放荡人妻少妇小说| 中文字幕亚洲精品乱码在线看| 十八禁成人软件| 老司机视频福利在线| 国产精品久久精品女日| 教师的诱惑免费观看| 老色国产精品美女久久久久av爽| 国产91露脸中文字幕在线 | 日韩在线视频第一区第二区| 少妇爽到高潮喷水的爱片| 亚洲手机在线av| 欧美人与动人物牲交免费观看| 国产porn在线精品| 国产亚洲av一区二区三区在线| 无人区码一码二码三码区别欧美| 久久成人黄色视频免费| 亚洲精品综合欧美一区| 最近的2019中文字幕免费下载| 91国产高清在线观看| 精品导航无良导航樱桃导航入口 | 99久久婷婷国产自综合青草| 亚洲av乱码一区二区三区网站| a一级爱做a免费视频观看| 2019年国产精品看视频| 国产免费久久精品99reswag蜜桃| 真人男女做爰无遮挡在线观看| 香蕉国产综合久久| 亚洲欧美日韩国产中文| 玖玖资源网中文字幕| 亚洲精品久久中文字幕二区| 国产高清夫妻在线| 国产精品免费久久久久久久久久| 精品欧美国产日韩| 国产午夜不卡视频| 日韩毛片精品| 国产成人精选在线观看| 国产乱人伦偷精品海角视频海角| 免费人妻美乳一区二区三区 | 午夜福利麻豆久久| 被公侵犯中文字幕在线观看| 97在线免费视频观看| 国产男女视频在线看| 精品国产不卡一区二区三区| 欧美性爰在线观看| 黑丝高跟在线| 国产成人精品免费一区二区| 久久99精品久久久久久清纯| 欧美a级毛片免费观看| 国产成人91精品免费网站| 欧美成人色吧| 老熟妇勾引视频| 经典三级久久久久| 丰满的熟女av| 激情欧美亚洲一区二区三区| 国产精品黄色视频网站| 在线观看国产内射视频| 久久久精品国产欧美av| 久久亚洲精品yy1111| 婷婷亚洲日本色图| 成年女人高清免费视频播放| good电影亚洲av一区二区| 亚洲综合av网站| 国产一区二区在线观看a| 波多野结衣高清免费| 亚洲福利影院一区久久| 2020国自产拍精品网站| 熟女国产一区二区| av日韩av在线| 久久久久99999热热热国产自拍| 国产视频亚洲专区在线观看| 精品一线二线| 亚洲欧美精品二区| 人妻少妇 久久网| 黄片a级毛片免费观看| 欧美巨大精品欧美一区二区| 人妻少妇被猛烈进入中文字幕电影| 久久久欧美品激情| 夜夜天天爽啊| 久久精品成人免费视频一区二区| 一区二区三区四区国产在线成人| 大香蕉 久久久久久| 欧洲亚洲av色图| 99精品国产99久| 成年人永久免费视频| 在线看片免费人成视频播放| 男人日女人视频在线| 男女啪啪嘿咻gif动态图免费| 国产三级视频在线播放网站在线| 午夜av不卡在线久| 91精品人妻人人做人碰人人爽| 美女视频免费全是黄| 久久这里有精品15一区二区三区 | fc2ppv在线亚洲精品国产| 青春草在线社区视频 | 特级丰满少妇一级aaa爱毛片| 免费视频久久久久久久| 最近的中文字幕在线看视频人妻| 三级国产精品一区二区| 国产精品成人动漫在线观看| 黑色丝袜美腿图片| avtt天堂网国产精品| 黄片播放免费| 亚洲精品影院一区二区在线| 成人性生交大片免费看中文| 女子被狂操高潮啊的视频在线看| 可以在线观看的亚洲av电影| 国产亚洲精品在线观看| 国产麻豆麻豆| 久久人妻系列精品| 爱草视频在线观看免费| 欧美色综合片| 国产又色又爽又黄的视频免费看| 久久精品免费国产大片| 精品—区二区三区免费毛片| 毛片黄色片一级| 国产美女永久免费观看视频| 两个人的视频www免费观看| 国产精品一区二区在线| 观看在线www网站| 黄色床上三十分钟| 国产 日韩 欧美在线| 99久久躁狠狠躁夜夜躁| 国产精品视频看| 国产精品一区二区+在线播放| 久久久久久久波多野结衣高潮| 国产女主播喷水高潮视频| 精品高潮呻吟久久久久久久 | 美女色黄网站免费观看| 亚洲无遮挡裸体视频| 欧美人善zozσ性伦交| 午夜夫妻视频| 亚洲牛夜久久久久久| 久久久久国产一级高清毛片| h色漫在线观看| 老女人一级毛片视频| 成人黄色亚洲视频| 好色av免费| 被黑人插到高潮视频| 99re在线视频6| 成年网站在线在线播放| 免费国产黄视频大全| 亚洲天堂h精品在线观看| 欧美午夜福利影片| av在线 亚洲 天堂| 瀚海精品商务酒店| 亚洲综合网视频观看| 亚洲午夜不卡免费日本午夜福利| 亚洲乱码在线中文字幕| 伊人一本到本勒蕉在线| 亚洲av在线午夜| 亚洲1卡av| 网站av免费在线观看| 天天干夜夜久久| 日韩av免费高清在线观看| 最新国产线视频在线观看| 在线看天堂网a| 五月姐姐丁香| 午夜亚洲国产理论片中文| 亚洲精品熟女国产国产老熟女| 在线观看免费的av网站| 日韩av中文字幕在线视频| 男人舔女人奶头的视频| 啦啦啦www视频在线观看免费| 久久电影第一页| 蜜臀久久99精品久久久酒店| av在线观看天堂网| 国产精品一区二区探花| 欧美一级作爱片免费看| 午夜鲁丝片高清| 大香蕉aa97| 成年禁看永久视频免费在线播放| 婷婷91麻豆精品国产| 亚洲欧洲成人a∨在线不卡| 香蕉久久99综合一区二区三区 | 男人视频在线播放 | 5060午夜福利精品一区| 成人制服丝袜av在线| 亚洲精品9999久久久久麻豆| 日本精品99一区二区不卡| 中文av在线字幕| 国产精品欧美一区二区三区m | 免费久久黄片大全| 久操视频在线精品| 日本人免费xxxxx| 一二三四在线观看免费中文动漫| 中文字幕码精品视频网站| 国产精品野战视频网站| 亚洲国产精品嫩草影院久久爱| 国产激情久久久老熟女| 国产黄a三级三级三看三级| 免费观看性生活视频片| 久久久亚洲熟女高清| 亚洲一区清纯| 久久精品影院免费观看| 青春草成人免费视频| 欧美视频激情一区| 精品亚洲av久久久久| 男人和女人做黄视频| 国产网站激情在线观看视频| 美女精品亚洲| 精品国产一区二区三区蜜殿| 亚洲最大中文字幕在线| 久久久久久久高清免费| 久久精品久久超碰| 激情图片在线播放| 久久九九久精品国产日韩经典| 最近更新亚洲中文字幕高清在线| 亚洲精品视频手机在线| 干出白浆11p| 亚洲av有码在线播放| 内射毛片在线| 在线国产一区二区三区视频| 久久精品夜色| 88网站在线观看| 看黄色的浏览器| 内射毛片内射国产夫妻少| 日本欧美成人精品有码| 凹凸国产熟女视频在线| 日韩av在线观看视频| 又黄又爽又国产无遮挡美女网站| 婷婷91麻豆精品国产| 国产精品96久久久久久av| 全国最新av网址| 69精品久久久久9999小说| 国产激情久久久久99蜜桃小说 | 亚洲成人免费毛片| 老司机免费午夜福利视频| 久久狼人天堂| 亚洲毛片不卡av在线播放二区| 亚洲自拍自偷成人网| 亚洲人成欧美中文字幕午夜| 日本免费av看片| 国产成人精品专区| 欧美日韩高清色| 91超碰中文字幕| 法医秦明第一部免费高清在线观看 | 在线观看诱惑国产精品| 国产精品国产亚洲伊人久久| 国产一区二区精品久久久不卡蜜臀| 婷婷国产精品久久蜜臀| 熟女人妻五十路免费影院| 美女xxoo好爽动态gif网站| 制服诱惑一区两区| 日韩精品91一区二区| 亚洲免费人成在线视频| 国产亚洲精久久| 日本高清ww视频在线播放观看| 韩国三级大全在线观看| 久久一区二区毛片| 夜福利久久久久久| av在线高清网站| 日韩二区三区在线观看| 在线看黄a免费观看网站| 久久成人综合网一区二区三区| 欧美日韩国产二区| 最近中文字幕2019高清免费| 亚洲国产精品一二三| 欧美日本道1区2区3区| 亚洲国产片高清在线观看| 亚洲精品日韩一区二区小说在线| 欧美日韩国产一区二区二| 亚洲国产欧洲久久| 扒开美女内裤狂揉下部观看| 日韩精品漫画免费观看| 电影天堂资源高清免费| 亚洲av噜噜在线网站| 精品国产黑色丝袜高跟| 激情少妇在线播放| 成人黄色在线播放网站| 久久久久亚洲乱码| 久久re在线观看视频| 欧美一级大片免费在线观看| 亚洲一区国产一区av在线观看| 蜜臀av亚洲精品久久久久| 局内人在线观看网站| 性欧美成人播放777777| 亚洲av久久天堂亚洲| 日韩大片一区二区| 成人噜噜噜噜| 久色国产在线视频| 波多野结衣凌辱人妻| 大胆欧美成人艺术| 成人免费久久久精品| 黄色好看还是绿色好看| 床上激情在线观看黄| 国产精品吗久久久久久| 免费看黄色视频99| 国产女主播喷水高潮视频| 进进出出冒白浆| 大宋宫词在线观看免费高清不卡| 中文久久久不卡av| 国产乱码1区2区| 免费网站在线观看a| 成年人午夜免费视频网址| 在线大香蕉av| 国产成人精品综合久久久久99| 成人在线观看美女视频| 国产午夜亚洲精品不卡网站| 黑人巨大精品欧美一区二区4k| 中文字幕在线永久免费在线视频 | 999亚洲熟妇熟女ⅹxxx| 一级黄片免费视频看看| 亚洲色图 在线播放| 日韩中文字幕在线精品| 国产精品线成人| 国产成人精品综合久久久久99 | 男女啊啊啊免费视频网站| 日韩有码专区视频| 亚洲欧美日韩综合在线尤物 | 又粗又长又爽视频| 国产乱对白视频| 久久久久精品av麻豆| 亚洲欧美在线麻豆| 欧美精品成人a免费观看| 91人人精品人人爽| 伊人影院国产精品| 亚洲国产午夜电影精选| 香蕉视频av在线| 亚洲精品国产一区二区在线观看| 精品精品国产精品| 国产精品毛片av久久66网站| 欧亚精品卡一卡二卡三737| 美女高潮喷水久久免费观看| 欧美猛交xxxx乱大交| 女性高潮视频在线观看| av亚洲情色电影| 亚洲人成免费在线视频| 欧美精品三区四区| 亚洲一区视频在线免费播放| 久久久久夜夜精品视频| 久久人成人国内精品| 欧美日韩精品视频在线观一区二区| 中字幕一区二区三区乱码| 亚洲中文字幕久在线| 人人澡人人妻人人爽人人| 女子高潮喷水视频| 国产午夜福利视频一区二区不卡| 亚洲国产精品免费在线| 欧美色视频网站| 教室疯狂高潮呻吟摸揉视频网站| 啦啦免费的在线视频| 99精品免费久久久久久| 中日韩精品一区二区有码| 东京热av男人的天堂免费| 久久99这里有频精品16| 国产精品专区免费视频| 两个人在线看的www| 成人欧美精品一区二区三区| 色呦呦.m3u8| ~级片网站免费观看完整版| 中国老妇另类性xxx| 超碰在线观看人妻| 美女在线观看黄| 后入视频在线观看免费| 最新国产av国片精品| 亚洲国产尤物在线观看| 欧美日韩亚州在线播放| 亚洲国产精品色一区二区三区麻豆| 中文字幕第一页精品一区| 黄片a级毛片免费观看| 久久 精品 亚洲| 伊人亚洲22| 国产清纯在线影院| 久久人人添人人爽| 免费的在线视频播放| 欧美性videostv另类极品| gogo大胆啪啪啪| 很黄的日本电影| 日韩最新av网站在线播放| 国产成人精品一区二三区2022| 在线高清不卡中文字幕| 一二三四在线观看免费看| 奶涨边摸边做爰视频| 中文字幕亚洲精品乱码在线看 | 97人人添人人澡人人爽| 视频一区 熟女人妻| 天堂在线中文在线8| 精品日产卡一卡4卡5| 91精品国产全国免费观看| 国产免费黄爽视频| 欧洲一卡2卡三卡4卡免费网站| 日韩av高清在线看片| ww成人免费视频www| 国产精品久久久久久熟岳| 欧美乱码精品视频一区二区三区| 亚洲视频一区二区国产综合| 国产精品97久久av色婷婷网| 91中文字幕电影| 韩国伦理电影久久| 亚洲ⅴa久久久久久精品综合| 欧美成人精品一区二区三区欧美在线| 国产免费福利精品| 欧洲色在线播放| 99国产精品久久久久久久床豆 | 色哟哟中文字幕在线观看| 久久国产原创精品| 天堂中文在线最新版| 日韩福利永久| 久久久久亚洲av成人毛片| 在线一区日本视频| 亚洲欧洲综合成人av一区| 日日干夜夜舔| 毛片一区二区三区在线| 18禁网站无遮挡网站| 成人午夜在线免费播放| 国产勾引视频在线观看| 性色av网站| 亚洲牛夜久久久久久| 国产真实伦对白在线播放| 日本一区二区网站视频在线观看| 荐片播放器ios版| 中文久久字幕精品人妻| 国产成人一卡2卡3卡4卡| 欧美日韩亚洲国产视频二区| 国产成人免费无遮挡视频在线观看| 私处外阴痒白带呈黄色| 精品福利国产视频| 亚洲av天堂在线电影| 激情婷婷综合欧美| 少妇太爽了在线观看| 毛片在线观看a级| 狠狠亚洲婷婷综合久久一区二区| 国产欧美丝袜高跟在线| 欧美日韩国产麻豆| 亚洲男人天堂网!| 国产成人精品免费一区二区| 日本成人mv| 国产欧美日韩一区二区三区四区五区| 美女张开腿做爽爽| 蜜臀av亚洲精品久久久久| 免费视频的黄片| 文字幕精品一区二区三区老狼| 亚洲新久久精品| 精品亚洲av麻豆一区在线| 国产美女喷水视频免费观看| 黄色av丝袜网站| 9av国产熟女| 又黄又粗又爽免费观看男女| 久久精品国产日韩不卡| 欧美精品成人看| 男人操女人的黄片| 精品人妻一区二区在线| 边插边吃奶视频| 少妇被我搞到高潮视频| 国产免费成人影院| 97在线观看视频网站| 中文字幕乱码骚妇| 最近2019中文字幕8在线看版 | 亚洲av看片在线| 成人av高清在线免费观看| 国产毛片短视频| 国产精品免费在线免费观看| 别揉我奶头嗯啊视频在线| 国产欧美一区二区三区精品视频| 国产偷_久久精品水蜜桃| 成年禁看永久视频免费在线播放 | 国产一区二区在线观看ww| 中文字幕1234久久| 在线欧美精品视频一区二区三区| av三级女优黄色日韩制服丝袜在线| 夜夜天天爽啊| 欧美性sex18—19性| 美色综合天天久久综合精品 | 免费黄色在线看网站| 车上震动a级作爱视频| 免费看,香蕉视频.com| 国产一区二区精品福利地址| 免费一级毛片视频在线播放| 精品熟女在线一区二区三区| 在线岛国爱片| 午夜一区福利片| 自拍av视频在线| 久久久久久高清一级毛片| 黄色成人网久久久久久久| 51页精品亚洲| 中文字幕一区二区不卡人妻| 国产精品性久久| 亚洲欧美日韩综合在线尤物| 日韩电影av天堂| 亚洲天堂女人av| 新版天堂2中文在线| 欧美日韩高清色| 色哟哟哟在线观看www| 黄色av丝袜网站| 91人人妻人人做人人爽秋霞影院 | 制服诱惑国产一区二区| 青青青国产精品国产精品久久久久 | 国产av不卡影片| 老女人一级毛片视频| 国产三级精品三级网站| 亚洲精品国产精品麻豆9| 久久国产一区二区精品| 18福利在线视频| 国产欧美日韩久久99精品| 免费高清在线观看中文| 能看大片的免费播放器下载| 久久久久久久久久久成人av| 国产又猛又粗又爽又黄视频| 免费人成视频人在线观看| 最近的2019中文字幕hd| 久久精品国产亚洲av香蕉情| 亚洲精品久久成人影院| 老司机深夜福利在线免费观看 | 亚洲一区少妇熟女| 嘿咻欧美视频免费观看| 日韩精品欧美少妇福利另类| 2卡3卡4卡av| 丝袜国产精品喷水91| 色综合久久久久久久久8噜啦噜| 美女被狂操到高潮| 欧美专区亚洲国产| 国产一区精品| 99网站在线观看| 免费永久观看网站tubi| 插女人视频大全-高清免费毛片| av在线播放亚洲不卡| 欧美性另类精品| 精品一卡2卡三卡4卡网站| 欧美精品久久久久久久潘金莲| www少妇av| 91国产在线高清| 99re6热在线视频| 大奶子美女被乱操| 国内精品一线二线三线| 久久国产精品大香蕉| 亚洲成va人片在线观看免费| 欧美中文无线码| 精品 自拍 偷拍| 天天看片在线播放| 热 线九九精品免费视频| 精品人妻免费视频| 光棍天堂在线看片中文字幕| 啦啦啦最新视频观看在线| 久久国产精品情侣| 黄色大片免费播放器| 免费一级做a爰片性色毛片7| 精品国产免费久久久一区二区| 夜夜精品久久久| 高潮呻吟喷水视频| 跪求在线观看网站| www.久久久国产精品| 亚洲欧美另类丝袜人妖| 五月婷婷色综合激情五月| 国产91人妻一区二区三区麻豆| 国产午夜精品一区不卡人妻| 日韩欧美专区第一页| 本道综合精品久久久久| 国产美女免费观看视频| 欧美 国产 日韩 一区二区三区| 2019中文在线字幕免费| 给我免费播放片高清在线观看tv | 亚洲欧洲日韩aⅴ| 国产一区二区三区亚洲欧美| 免费福利精品一区二区在线观看| 线上观看免费视频| 97网站在线视频| 国产成人啪精品视频免费app| 国产高中生视频在线| 欧美专区在线观看| 99这里只有精品20| 岛国大片免费观看不卡| 小sao货大ji巴cao死你啊| 97在线免费视频观看| 日日摸日日添夜夜爽97| 亚洲精品一区二区高清在线播放| 美女永久免费观看网站视频| .国产精品久久久久| 精品久久久久中文字幕人妻最新| 亚洲欧美国产成人| 国产欧美日韩久久99精品| 在线日韩欧美观看| 在线电影 av| 欧美情色av片| 成人久久久一区二区三区| 在线观看免费国产一区二区视频| 狠狠狠婷婷综合网| 欧美日本高清视频在线不卡区| 成人av在线播放网址| 插逼视频在线免费观看| 国产在视频一区二区三区四区乱码| 国产麻豆精品传媒av国产| 最新版天堂资源在线| 嫩草影院在线精东91| 日韩av福利免费在线观看| 日韩精品久久久久久久蜜臀| 久久成人网麻豆| 激情少妇在线播放| 丝袜制服诱惑中文字幕| 精品第一区二区在线观看| 亚洲日本视频| 一二三四视频社区电影在线观看| 熟女人妻のav波多野结衣电影| 精品少妇人妻av免费看| www.天堂av一区二区三区| 久久久av岛国精品少妇| 亚洲人成岛国大片在线看欧美一区| 久久国产精品_国产精品| 亚洲精品久久一区二区中文字幕| 国产成人在线免费观看av| 一个人在线观看www高清视频| 男女激情视频无遮挡在线观看网址| 国产在线观看黄色视频| 欧美亚洲国产看看| 成人一区二区三区国产精品| 噜噜色噜噜干| 欧美综合乱码视频在线观看| 国产精品视频在线观看免费| 欧美久久极品视频| 在线成人av免费视频播放| 亚洲欧美成人vr| www.色大姐.com| 六月丁香官网| 日韩欧美高清视频在线观看| 最近最新高清2019中文字幕| 在线免费看完整版视频| 亚洲欧美日韩天堂网| 国产黑丝袜美女| 一级毛片视频熟女人| 国产免费线观看视频| aaa毛片在线播放| 在线观看日本三级黄| av色图天堂网| 蜜桃高清在线观看| 99久久国产精品女av| 免费福利精品一区二区在线观看 | av在线播放色| av在线伦理片| 亚洲女同精品一区二区久久| 邵氏一级毛片在线播放 | 久久久久亚洲日本韩国中文字幕| 国内精品伊人久久久影视| 久久www成人看片免费不卡| 国产综合色精品| 色噜噜噜噜噜噜噜噜噜噜噜噜av | 99这里只有精品20| 久久伊人免费视频电影| 久久精品国产只有精品96| 久久 网 精品| 一二三四免费高清观看中文| 国产精品——色哟哟| 黄色在线网站不卡一本免费观看| 日韩欧美久久久| 香港黄a三级三级三级看三级| av老鸭窝在线播放| 精品网站一区色视频在线观看 | 亚洲精品乱码久久久久久写真| 女人18级毛片| 久草精品在线| 青青草原在线尤物| 国产日韩欧美电影| 99热亚洲国产精品| 天堂中文在线最新版在线| 欧美精品成人a在线观看| 一个人的日本| 欧美日韩一区二区三区视频大全| 这里只有久久精品在线| 999精品毛片一区二区三区| 成年女性脉搏| 欧美刺激独立网站国产刺激| 中国一级毛片真人免费播放成人| 狂野欧美性猛交xxxx| 国产aaaa片在线观看| 国产黄色视频在线播| 美女主播在线观看| 在线成人av免费视频播放| 成人免费观看激情视频| 国产成人免费精品久久久免费| 国产精品人成在线观看免费| 亚洲电影av天堂| 丰满肉感的熟妇疯狂耸动| 成年女人视频在线免费观看| 亚洲av极品在线观看| 亚洲所有的av免费观看| 国产亚洲电影一区二区| 男人女人激情的视频| 午夜福利正片免费看| 黄色片网站在线| 亚洲av在线观看.| av片永久免费| 久久精品麻豆日日躁夜夜p| 亚洲欧洲国产动漫| 边吸奶边插逼| 黑人巨大精品欧美一区二区4k| 亚洲av大片免费观看| 亚洲欧美日韩爱| 越南一级毛片免费播放| 一区二区三区四区在线视频免费| 26uuu在线亚洲欧美| 高潮少妇水多毛多av| 国产高清精品久久久久宅男| 青青草在线播放视频| 亚洲另类丝袜诱惑| 国产伦理片一区二区三区| 嗯啊 别揉我奶头 免费视频| www.yiren69| 叉开腿做爽爽视频| 日本h片免费| 日本精品一区二区电影在线观看| 免费观看黄高清在线观看| 最近中文字幕2019年中文字幕| 99婷婷久久国产| 亚洲一区少妇熟女| 久久久久国产av麻豆| 在线社区视频| 91黄片在线免费看| 在线wwwav| 麻豆精品av国产一| 亚洲avab| 超碰97人妻天天干| 3344在线看片免费观看视频| 性情午夜视频| 国产精品欧美成人| 揉我奶头啊嗯18禁视频| 天堂国产卡2卡3卡4卡5| 亚洲欧美日韩在线日韩一区| 国产午夜福利在线视频观看| 免费av在线播放免费| av少妇影院| 男人日女人视频免费看| 欧美精品成人a在线观看网站| 老司机深夜福利免费视频| 日韩高清在线观看一区二区三区| 车上震动a级吃奶作爱视频| 久久国产精品久久| 青青草视频在线观看免费下载| 一个在线观看的视频www| 黄色动漫网站在线观看| 欧美日韩国产免费一区二区三| 在线欧美日韩免费观看| 国产一级黄色片在线观看| 亚洲欧美日韩精品久久| 三级黄视频在线观看免费| 国产真实乱子伦在线视频免费观看| 国产精品高清不卡| 精品视频中文字幕在线观看| 亚洲五月六月丁香色| 国产 日韩 欧美 精品 在线| 青青草免费公开视频播放| 大香蕉在线网址视频| 好男人高清在线观看免费观看国语| 国产精品久久久久久86| 亚洲电影毛片在线| 国产精品熟女一区二区三区视频| 男人边吃奶边摸下面| 国产精品久久久久久女| 久久 精品 亚洲| 亚洲欧美日韩国产一区二区电影| 两个人一上一下的打扑克的视频| 又粗又长又硬又爽黄色视频| 亚洲欧美日韩精品国产| 精品亚洲熟女一区二区三区| 夜夜艹日日爽| 亚洲一卡在线观看视频| 欧美人与动牲交a精品| 一二三四中文版免费观看视频| 国产成人色在线视频| 亚洲国产综合婷婷在线| 看黄色毛片看| 大片视频免费播放器| 国产日韩欧美中字| 国产成人免费精品久久久免费| 成年女人大片在线观看| 扒下她的小内裤揉弄免费视频| 日韩视频高清免费观看| 97久久超碰成人精品网页91| av影视大全狼人精品久久久| 国产成人久久精品流白浆图片| 欧美日韩国产免费一区二区三| 久久国产精品大香蕉| 国产精品免费观看99| 美女潮喷喷水视频影视大全| 国产精品女人一区二区三区| 国产av久久久久久久| av 免费在线观看网站| 最近中文字幕在线中文高清版p| 最新国产精品久久久久久| 黄色小视频不下载免费在线观看| 欧美专区亚洲国产| 黄色片子在线免费观看| 午夜精品久久久久蜜桃| 在线亚洲av一级毛片| 精华+精华液| 国产精品女人一区二区三区 | 国产精品久久久久一区| 亚洲人成网站www| 69麻豆天美精东蜜桃传媒| 国产亚洲精品一级在线观看| 国产精品视频一区观看| 香蕉 久久 成人| 插逼网站免费播放| 老鸭窝免费视频观看网| 久久人人做人人爱人人精品| 精品久久婷婷| 日韩av免费一区二区在线观看| 亚洲高清在线观看成人| 尤物视频老司机| 欧美精品一区二区三区…| 亚洲av影视大全套一区二区| 女人高潮呻吟的视频| 国产的一级黄色大片| 午夜有码电影| 内射毛片在线| 亚洲大尺度av在线| aaa毛片在线播放| 久久久久久国产三级| 欧美精品欧美zozo人与动牲交| 久久久伦理av| 婷婷激情亚洲| 国产麻豆免费视频av| 97久久久久久人妻精品区一| xxx性欧美在线观看| 国产成年aⅴ人片在线观看网站| wwwsssa日本免费| 性xx视频在线观看| bdsm欧美激情另类| 丰满人妻一区二区三区10| 亚洲人成色777777在线看| maomiav人妻一区二区| 香蕉久久人人97超碰caoporen| 亚洲国产成人va在线观看| 中文字幕日韩欧美在线网| 大香伊蕉av在线| av最新在线天堂网| bxbx成人精品一区二区三区| 欧美av电影一区二区三区尤物| 日韩黄上片床视频大全| 国产最好的av国产大片| 中文字幕欧美亚洲精品一区| 99精品国产免费久久久久久97| 日韩三级黄色录像| 毛片免费全部免费播放| 精品香蕉视频在线更新| 欧美成人精品3欧美一级乱黑| 扒开美女内裤狂揉下部观看| 人妻少妇久久精品一区二区| 两个奶头一起吃才爽h视频| 国语精品91自产拍在线观看二区| 激情国产探花在线| 亚洲综合久久成人一区| 风骚熟妇午夜视频| 美色综合天天久久综合精品| 欧美日本国产韩国在线不卡| 欧美性性猛交xxxx| 国产精品主播午夜福利视频| 欧美日韩亚洲成人一区二区| 国产精品久久久久久成人热| 国产成人精品免费播放视频不卡| 93精品久久久久久久99蜜桃| 日本a在线视频| 丁香六月五月婷婷综合| 夜夜操夜夜干夜夜爽| 色综合国产小视频| 亚洲avav天堂av在线| 国产91欧美综合在线| 99re在线都是精品视频| 国产精品福利社区| 成人黄色在线观看网站| 在线看片免费人成视频播放| 亚洲视频欧美日韩在线| 亚洲岛国av在线播放| 成人性生交大片免费看10| 精品自在线拍| 精华乳精华液精华霜| 国精产品999免费'国产精品久久av| 桃花影视在线| 久久久久亚洲av成人啪| 少妇人妻真实偷人| 91精品国产全国免费观看| 免费人妻美乳一区二区三区| 亚洲av色图一区二区| 精品黄片999| 国产二区三区在线观看视频| 久久久久久久久久久久久一区二区三区| 欧美熟妇天堂视频| 神马午夜第七影院| 国产精品国产三级国产av′| 亚洲天堂久久久| 精子变成黄色的是怎么回事| 日韩高清中文字幕| 国产帅哥免费无遮挡| 国产精品乱码1区2区3区| 国产精品a一区二区在线| 久久爱av极品盛宴| 日韩欧美av视频在线观看| 免费18禁,网站| 国产女黄色视频| 东北小伙搡老熟女老女人| 色呦呦网在线| 熟妇高潮精品一区二区三区| 久久精品国产亚洲av香| 亚洲男人天堂免费观看| 精品国产网站在线免费观看| 国产美女喷水视频免费观看| 黄99视频在线观看| www.sexsex18.com| 欧美老熟女b毛多| 对白高潮刺激国产| 女性同性恋毛片| 国产精品久久久久久久久久中字幕| av日韩在线观看网址| 人妻夜夜躁日日爽| 人人妻人人澡人人爽视频耻辱| 少妇喷水高潮免费看| 不卡中文字幕日本| 全部大片免费在线观看| 黄黑皮头发染什么颜色好看| 国产老妇女野战视频| 日本在线 一区| 欧美性视频在线观看精品| 国产av麻豆精品| 国产成人久久精品流白浆图片| 99国内免费精品久久久久久久久| av成人在线观看网站| 亚洲天堂女人av| 国产rv乱码一区二区三区小说| 天堂а√在线地址中文| 欧美日韩亚洲精品视频专区| 日韩欧美久久久| 特级毛片全部免费播放在线看| 国产又粗又硬又长又爽又黄视频| 资源天堂中文在线| 亚洲午夜久久av男人的天堂| 在线观看 欧美日韩| 国产偷闻女邻居av在线观看| 亚洲 av 麻豆| 韩国朋友夫妇交换电影| av潮喷大喷水在线观看| 人人狠狠综合| 国产a久久久久久精品| 午夜电影在线观看一区二区三区| 免费看美女高潮| 亚洲一区三区成人| 男女羞羞无遮挡网站在线观看| 超碰人妻天天摸| 男人女人高潮视频| 久久电影人人爽| 国产嫩草影院成人18禁| 98精品视频一区二区三区| 国产av在线播放一区二区| 成人国产aaaaaa片视频软件| 熟女少妇婷婷| 韩国伦理电影全集| 一个人www日本| cum4k白浆精品| 蜜桃成品人免费视频| 成人三区在线观看| 亚洲欧美日韩在线视频一区二区三区| 日韩亚洲综合色| 国产a级毛片1久久久久久精品 | 国语国产胖老妇热久久| 免费视频观看免费两性| 亚洲精品爽片| 可以直接在线观看的av网站| 欧美草逼黑人| 欧美精品二区三区| 国产av精品一区二区6| 狠狠躁日日躁夜夜躁影院0000| 午夜色网av在线| 国产精品久久久久久久精品| 久久久成人av一区二区三区| 大尺度美女视频在线观看| 亚洲成人av影院在线观看| 成人性三级欧美在线观看| 欧美孕妇交xxx| 贤者之爱全集在线| 久久国产高跟丝袜| 两个人在一起做那个的视频| 欧洲亚洲国产精品| 国产三级毛片大全| 时间短,精液呈黄色| 久久久久久久精品免费av| av成人免费播放| 日本高清你懂得| 国产精品三级999av在线网 | 性感高跟丝袜av一一一| 扯美女的内裤| 最新黄色网址av| 亚洲高清中文字幕专区| 久久国产热这里有精品| 国产亚洲精品手机在线| 九色l91porny丨国产| 久久久成人国产精品| www.四虎69av.com| 亚洲精品久久久久久成人软件| 99国产精品免费视频| 丝袜国产精品喷水91| 黄片一级免费下载| 亚洲精品一区二区三区电影| 国产午夜精品视频一区二区三区 | 美女被高潮网站| 91人妻久久久久久9| 国产精品五月婷婷六月丁香| 亚洲视频免费人成| 特级毛片a级毛片免费播放s| 在线成人中文字幕| 欧美一级免费观看成人| 中文 字幕在线观看| 91久久香蕉国产熟女看| 亚洲jdav简单av在线观看| 欧美成人高清一区| 日韩人妻一区二区三| 99热99精品在线| 伊人自偷自拍| 日本亚洲无m| 国产很黄视频| 国产精品av高清| 一二三区av成人| 日本a午夜视频在线| 秋霞亚洲av成人| 亚洲一区清纯| 99re视频在线观看17| 成人在线观看美女视频| 美女高潮30分钟| 黄色毛片大全免费看| 午夜无卡码视频| av日韩在线观看网址| 成人黄色视频在线观看| 在线看成人avv片| 成人短视频免费| 亚洲五码中文字幕| 91av在线麻豆| 中文字幕人妻xxxxxxx| 一区二区国产视频精品| 美女在啪啪啪动态图| 熟女人妻视频网| 国产免费播放一区二区三区 | 免费观看性生活视频片| 久久国产精品上线免费看| 一区二区三区 久久久| 亚洲国产偷拍av| 亚洲成人黄色在线播放| 老司机午夜福利免费在线观看| 国产美女免费观看视频| 毛片免费看不卡网站| 亚洲国产一区二区在线免费| 天堂网av东京热| 日韩精品一区二区av免费观看| 国产欧洲av精品网站尤物| 国产av无区亚洲av麻豆| 九九视频成人| 黄色成人动漫视频在线观看| 免费很黄的视频| 日本精品久久久久精品三级18| 香蕉影视av在线| 三级免费久久观看| 少妇喷水高潮免费看| 超碰在线青青草原| 韩国电影一区二区三区在线观看| 日本高清视频在线www色| 99热这里只有精品 5| 国产精品久久av观看| 高潮国产白浆抽搐| 午夜精品一区二区三区电影| 国产免费av一区二区在线观看| 色哟哟哟在线观看www| 67pao国产成视频永久在线观看| 被多个黑人粗壮猛烈进出视频| 久久久久亚洲乱码| wwww男人天堂| 国产成人久久精品流白浆图片| 中国av电影一区二区三区| 色噜噜国产av| 国产欧美精品第一页| 99亚洲精精品蜜桃大全蜜桃中文字幕| 成人一区二区在线av观看 | wwwxxxxxx撒尿| 欧美成人激情网站| 亚洲av噜噜在线网站| 成人在线电影亚洲| 秋霞av国产| 亚洲精品麻豆av一区二区| 亚洲人妻系列一区二区| 午夜福利一区三| 九九电影网精品免费观看在线观看| 在线观看波多野结衣一区| 边摸边吃奶边做爰视频| 亚洲国产制服丝袜在线播放| 久久久欧洲熟妇熟女| 亚洲精品久久中文字幕| 夜夜爽天夜夜爽夜夜夜夜| 久久国产乱子伦精品| 舔少妇逼三级av片| 国产激情久久久久成熟影院| 野战视频在线观看| 国产一级av片在线播放观看| 一区二区三区久久久久久| 国产香港av| 亚洲最大a人片在线观看| 2019中文在线字幕免费| 免费av香蕉| 久久成人精品久久久久| 性色av网站| 超碰久久大香蕉| 啪啪丝袜脚网站| 性生交性生活大片免费看| а√天堂最新| 男人扒开添女人下边免费视频| 亚洲美女视频网站在线观看黄 | 欧美精品一区二区二区| 被黑人插到高潮视频| 好男人在线视频www观看| 国产精品免费不卡av| 欧美日韩99精品| 天天噜噜噜在线视频| 91综合精品国产丝袜长腿美女| 美女被日国产免费| 爱爱动态图啪啪| 侵犯中文字幕人妻系列| 亚洲人嘘嘘撒尿| 精品国产免费第一区二区三区日韩| 日韩v欧美v亚洲v| 亚洲三级自拍视频| 国产女人视频在线观看| 国产又大又黄又爽免费视频| 精品国产乱码久久久久久l区2 | 精品国产在线观看一区| 性欧美18-19sex性高清播放| 欧美精品区二区| 99久久这里只有精品免费| 多人伦交性欧美精品欧| 青青草原在线国产| 欧美中文字幕日韩在线| 在线看天堂网a| 久久久妇女免费观看| 日韩深夜av| 美国人与动性xxxxx视频| 欧美xxxx色视频在线观看免费| 这里只有久久精品在线| aaaa大片少妇高潮免费看| 亚洲香蕉精品一区二区三区| 欧美成人www在线| 韩国av一区二区三区| 成年美女毛片| 成年男性毛片| 国产又粗又猛又爽黄老大爷| 久久妇女高潮喷水多| 亚洲精品中文字幕一区二区三区| 人妻精品一区二区视频免费| 日本亚洲毛片基地99久久| 午夜福利影视一区二区三区| 精品久久aⅴ人妻中文字幕| 午夜福利高清免费| 三级国产精品一区| 日韩亚洲欧美中出| 久久精品国产96精品亚洲| 国产另类在线观看网站| 91精品久久人人妻人人做| 国产午夜福利视频一区二区不卡| 欧美一区日韩国产| 午夜做a爰片久久毛片| videos久久| 亚洲国产欧美福利在线| 国产bt久久| 国产熟女五十路一区二区| 亚洲欧美人成网站在线观看看| 在线播放日韩欧美| 久久久在线观看一区二区三区| 交换朋友夫妻客厅互换4韩国| 国产精品久久99久久| 亚洲国产精品久久人人澡| 久久精品亚洲国产电影网va| 99热这里只有精品88| √天堂中文在线8最新版| 最新的国产成人精品2022| 国内精品美女av久久| 男人舔女人高潮免费视频| 国产av亚洲av资源| 桃花源在线观看完整版| 最近2019中文字幕8在线看版| 国偷一区二区三区| 91av在线观看国产| 午夜精品久久久久久久久日韩 | 欧美性黑人粗又大aaaaa片| 在线观看www片免费高清视频| 24小时日本免费看| 一区二区国产三区亚洲人| 连续中出白浆| 中文字幕人妻高清乱码| 午夜做a爰片久久毛片| 亚洲精品在线观看视频免费观看 | av麻豆网址| 国产一级午夜黄色片| 无遮挡很黄刺激很色网站免费| 在线视频 国产 乱| 亚洲国产下载| 适合夜里一个人看的片| 国产午夜精品理论片a级| 国产成人精品久久久久精品| 成年人视频在线视频免费| 国产精品亚洲片夜色在线r| 国产午夜精品一区二区三区在线观看| 一二三四 在线播放| 性久久久久久久久波多野结衣| 国产成人一区二区三区免费视频91 | 欧美牲交xxxxx| 色噜噜日韩精品欧美一区| 日韩视频亚洲视频| 免费一级毛片在线播| 毛片女人十八以上观看| av 免费在线观看网站| 亚洲国产一区二区三区在线视频| 最新国产成人一区二区| 丰满少妇被粗大的猛烈进出免| 精品一区二区三区av天堂| 久久久久精品国产人妻一区| 亚洲精品久久中文字幕| 久久久久国产av麻豆| 性久久精品视频免费| 日韩黄色大片播放| 大香伊蕉在人线国产av下载| a级毛片观看视频| 国产一区二区三区在线观看入口| 久久亚洲av午夜精品福利一区 | 精品国产亚洲av麻豆小草| 国产乱码精品一区| 免费女性爱av| 50部h版大片在线观看| 亚洲一区二区三区在线视频观看| 嘿咻欧美视频免费观看| 午夜福利激情不卡| 无人区大片免费播放| 国产人与zoxxxx另类| 未满十八禁看网站免费| 两个人看的视频www免费| 黑人3p少妇在线视频| 麻豆色婷婷综合在线播放| 精品一区二区三区在线观看av免费| 91超碰中文字幕| 国产精品二三在线免费观看| 国产精品视频免费网址| 久久久久精品免费看黄色_级片| 亚洲欧美日韩国产综合第一产区 | 美女被草高潮视频在线观看| 欧美性另类精品| 性做爰片视频播| 国产精品av影院| 五月色婷婷久久综合亚瑟影院| 一级a做片在线观看| 欧洲av色综合| 久久久精品欧美成人av| 久久中国人免费的片| 日韩精品午夜理论片在线| 啦啦啦在线观看视频1| 少妇被爽到高潮喷水在线观看| 永久黄网站色视免费观看| 最新亚洲av影院| 中出清纯少妇人妻| 免费人成视频网站在线18| 国产熟女五十路一区二区| 午夜福利免费影视| 专区一卡2卡3卡| com.av动漫| 国产极品尤物粉嫩次在线观看| 亚洲3dh5码精品成人| 不卡午夜福利视频| 成人在线观看免费下载| 免费国产一级毛片| 国产黄色视频大全免费| 亚洲美女黄色视频在线| 成年男性毛片| 欧美成人免费电影在线观看| 最新版天堂资源网在线| 久久精品超碰人人免费| 军统女人在电影三级成人| 免费观看性生交大片女神| 女人17毛片水真多| 亚洲人成在线一区| 女人被男人操高潮的视频| 亚洲电影成人av在线观看| 日本亚洲欧美不卡| 国产色拍在线| 黄片软件在线观看黄| 日韩欧美国产亚洲一区| 国产一区二区三区四区毛片| 欧美,日韩亚洲| 国产丝袜脚网站| 日韩精品99久久久久久av| 久久久久欧美精品小说| 在线播放免费人成动漫视频| 欧美中文字幕日韩在线| 五月综合激情婷婷六月色窝| 国产男女猛视频在线观看网站| 蜜桃久久999| 激情戏在线观看一区二区三区| 成人在线视频一区二区三区| 免费观看完整在线观看| 久久久午夜福利久久视频| 国产又黄又粗又爽视频| 免费青青草原| 美女高清霸气视频免费观看| 欧美三级三区| 亚洲一区二区三区av电影| 一本久久a精品一区二区| 中文字幕乱码亚洲∧v日本| 韩国伦理三级网站| 一级a做爱片免费观看| 开心五月激情综合婷婷色| 18禁黄色无遮挡免费| 亚洲熟妇av一区二区三区宅男| 国产一区二区在线观看电影| 自偷自拍 亚洲色图| 国产精品明星亚洲片在线| 午夜视频老司机久久| av天堂av亚洲啪啪久久| 人妻精品少妇一区| 国产精选黄色视频在线观看| 国产精品99一区二区在线观看| 午夜av高潮| 欧美第一页影院| av动漫在线h| 日本免费在线视频一区| 色偷偷88888欧美精品久久久| 欧美猛交xxxx乱大交| 久久国产色av免费观看| 亚洲大尺度av在线| 善良妈妈的朋友在线观看中文字幕 | 国产老妇女野战视频| 欧美黑人性暴力猛交| 18禁无遮挡网| 成人小视频在线观看久| 亚洲国产精品久久av成人| 亚洲国产午夜福利在线看| 午夜特黄a级毛片免费看| 亚洲国产日韩综合久久精品视频 | 一出一进一爽一粗一大视频免费的| 国产成人亚洲精品不卡一区| w亚洲毛片基地| 内射亚洲少妇b| 国产一区二区好的精华液| 日韩欧美在线精品一区| 青草草在线免费视频| 欧美视频不卡一区视频在线观看| 中日韩中文字幕综合在线| 久久久精品欧美少妇| 国产成人亚洲精品av| 人妻夜夜躁日日爽| 亚洲精品久久中文字幕二区| 在线观看国产免费a∨网站| 成人黄色免费视屏| 全免费毛片在线播放| 欧美一卡2卡3卡无卡免费| 色偷拍亚洲偷自拍| 18在线观看国产| 久久久久久久精品aaa片黄| 国产成人精品av久久| 中文字幕一区侵犯人妻| 亚洲天堂色综合网| 游戏王卡片力量6青眼白龙卡组| 姐弟乱论在线观看| 欧美大片资源日韩精品| 国产亚洲成av人片在线观看导航| 久久99国产综合精合精品| 国产精品一区二区av片| xxxx撒尿| 在线观看中文不卡视频| 亚洲av最大码| 5858s夜夜| 亚洲综合最大av网站| 欧美色爽28p| 久久人妻av免费看| 亚洲的日韩男人天堂久久| 成人一卡2卡3卡4卡2021| 东京亚洲区卡不| 丰满少妇女人a毛片视频| 成年女人免费视频播放体验区| 高清一级大毛片| 欧美精品欧美zozo人与动牲交| 国内精品久久久久国产盗摄| 波多野结衣网站一区二区三区| 中文字幕一区精品视频| 国产边吃边摸边做的视频| maomiav人妻一区二区| 国产开裆丝袜喷水| 久久久午夜福利久久视频| chinese国产麻豆| 大陆国产精品毛片精东传媒| 18禁网站在线永久免费观看| 久久久久中文字幕99| 国产 日韩 欧美 免费| 成人短视频免费| a级毛片高清免费网站| 亚洲av在线免费播放| 欧美xxx黑人xxx性爽xxx| 成人性生交大片免费5| 中文字幕人妻熟女av| 国产av熟女一区二区三区蜜桃| 午夜福利影片在线观看| 欧美性videostv另类极品| 国产成人精品免费视频| 在哪里可以看黄片视频| 精品久久一卡2卡三卡4卡分| 在线观看亚洲中文字幕av| 久久麻豆国产国产av| 成年人午夜免费观看视频| 免费毛片在线看片免费| 婷婷免费中文字幕| 国产欧美日韩激情91色| 91麻豆国产在线| 在线观看视频国产的| 午夜福利影院在线免费观看| 喷水喷潮电影| 800精品国产导航| 日日爽夜夜做| 日韩少妇熟女| 亚洲精品国产精品乱码不| 久久久久亚洲av| 4438网站在线观看| 美女人妻被插入久久| 国产激情一区二区三区电影在线播放| 午夜人妻精品理论片中文字幕| 国产亚洲精品av久久久久| 国产高清三级在线观看| 成人精品人妻一区二区三区 | 欧州在线一区二区| 国产美女被内射视频全部免费看| 久久久久久精品人妻免费网站不| 久久国产精品情侣| 熟女老妇607080bbw| 香蕉国产婷婷久久久| 亚洲av码国产精品色蜜桃在线| 精品三级国产三级在线专| 国产av综合av亚洲av| 刘亦菲一级毛片视频| 狂轰滥炸的爱短剧免费高清完整版 | 两个人免费视频下载| 91午夜福利国产在线观看| 清纯国语对白videoshdcom| 国产视频二区三区在线观看| 1024视频黄色成人| 韩国大尺度边吃胸边摸| 痴汉中文字幕在线观看| 不卡的av电影在线| 久久亚洲精品无吗av网| 免费三级夫妇交换| 大学生一级毛片高清版| 图片区小说区在线视频| 蜜臀久久99精品久久久久久小说| 福利视频精品| 久久国产精品人妻一区二区| 久久99精品久久久久久国产图片| 日举a级特黄免费毛片基地| 香蕉视频免费看国产精品| 97人妻人人揉人人躁88av| 巨乳人妻的诱惑在线播放| 嫩草影院永久在线| 人人妻人人爽人人澡少妇| 国产亚洲精品久久久久久久久久国| 一区二区三区国产在线视频| 亚洲av制服丝袜在线观看| 久久久久精品色| 一级毛片免费av| 成人免费在线观看中文字幕| 中文文字幕文字幕永久免费| 亚洲欧美日韩久久精品| 国产精品三p一区二区视频| 国产一区二区三区草草影院| 亚洲男人天堂久久久久久久| 亚洲国产熟女露脸自拍| 亚洲va精品在线| 欧美精品线观看| 国产精品久久久久久久久网站合集| 亚洲美女av二区在线观看| 国产欧美日韩在线一区| 亚洲av麻久久国产| 欧美激情视频一二| 永久作爱视频在线播放免费| 91青春草视频在线观看| 精华液和精华| 九九线精品视频| 免费观看涩涩成人无遮挡| 国产美女被内射视频全部免费看| 亚洲精品在线免费播放| 日本免费的大片| 欧美成人撸啊撸| 国产三级精品三级| 色哟哟免费在线观看入口| 国产超级碰碰碰人人妻97| 久久久久精品影院| 91人妻精品一区二区三区蜜桃| 中文字幕久久久人妻| 嘿咻欧美视频免费观看| 97精品高清一区二区三区| 色老板最新在线播放一区二区三区| av天堂久久天堂av| 色哟哟久久就| 免费的av视频在线观看| 99精品免费久久久久久| 2021中文字幕超清在线观看| 韩国19禁片完整在线观看| 岛国自拍小视频在线观看不卡 | 少妇福利影院| 久久免费99精品| 国产午夜男女乱淫真视频播放| 国产一区二区在线免费观看| 日韩激情国产尤物| 日韩av变态另类在线观看| 成人黄色片在线观看| 熟妇大紫奶头狠操| 啊啊啊啊艹死我吧在线视频 | 免费一级欧美特黄特色大片| 成人欧美一区二区三区视频网页| 999国产精品视频| 亚洲av播放免费| 中文字幕av一本| 国产精品1000部粉嫩在线观看| 欧美日韩亚洲在线另类| 青青草原青青色| 玩弄极品少妇人妻老师电影| 可以免费观看的av毛片熟女| 97人妻超级碰碰碰| 91久久嫩草影院一区二区| 成人亚洲久久| 亚洲精品自拍av| 亚洲综合av色婷婷久久| 国产精品久久久久久成人热| 精品自在线拍| 成人精品h小说| 日韩免费在线黄色视频| 国产精品99久久久久久宅男性色| 97视频在线视频播放| 最近2019年中文字幕6| 日韩内射高清视频| 国产一级永久免费视频| 国产伦精品免费一区二区三区免费| 护士一级特黄特色大片| 亚洲av.com在线观看| 欧美黑人巨大极品video| 中文高清字幕在线观看| ~级片网站免费观看完整版| 性情午夜视频| 美女免费观看在线观看| 国产成人精品综合久久久小说专区| 欧洲亚洲av色图| 亚洲欧洲综合成人av一区| 国产,日韩,欧美,综合,一区| 久久久久久精品毛片a级| 一线二线三线国产精品| 91久久婷婷亚洲精品成人| 色老板免费视频国产| 免费精品视频99| 男女下面进入的视频在线| 亚洲国产精品系列的观看| 国产黄色视频欣赏| 在线播放制服丝袜av| 亚洲精品999| 国产无遮挡裸体女视频在线| 91综合精品国产丝袜长腿美女| 夫妇交换刺激做爰在线观看| 国产在线一区二区精品| 中文字幕天堂网在线| 高潮久久久久久久av| 国产精品久久久久久网| 国产性色强伦免费视频一| 免费观看视频xxxxx日本| 黑执事第一季免费高清在线观看| 成人性生交大片免费9| 国产美女在线福利| 丁香综合激情五月| h色视频在线免费观看| 国产欧美日韩精品一区免费| 中文字幕人妻一区二区三区网站| 大片免免费观看视频在线| 午夜福利精品kkk在线观看| 黄片全程免费在线观看| 91麻豆成人精品九色| 精品色综合亚洲精品| 国产av亚洲自拍| 高清大片免费在线观看 | 精彩视频在线入口| 女人爽到高潮视频免费直播1| 欧美日韩一区二区黑人综合| 亚洲第一精品网站| 国产精品a∨一区二区三区不卡| 熟女吧国产精品| 国产 亚洲精品| 2020国自产拍精品网站| 亚洲欧美综合成人一区| 欧美成人午夜生活片| 亚洲综合色婷婷六月丁香宅男大增| 国产午夜不卡免费| 人人添人人妻人人爽夜欢视av | 国产午夜精品一区二区三区小说| 久久久久久久久国产极品| 国产网站激情在线观看视频| 亚洲永久免费高清视频| 亚洲av男人天堂手机在线版| 欧美情色大片| 404网站在线观看| 男人插女人阴道的视频免费在线观看91| 成人av在线观看一二三区| 手机版av网址| 久久99国产乱子伦精品免| 别揉我的奶头啊嗯视频| 火影ssr卡多少钱| 熟女一区二区三区啪啪| 亚洲av极品在线观看| 俄国精品一区二区三区在线观看| 亚洲av网站免费观看| 国产精品极品美女在线观看| 精液呈黄色正常吗| 亚洲精品一区最新| 国产精品不卡区一区二| 在线看黄a免费观看网站| 中文天堂在线最新版www| 最近最好看中文字幕免费| 美女只穿内裤视频| 中文人妻字幕蜜桃久久久久久久| 人人妻日日夜夜| 亚洲欧美人色综合婷婷久久| 毛片免费看不卡网站| 欧美日韩国产高清一区在线观看| 黑人舔女人视频| av在线播放亚洲不卡| 国产视频二区三区在线观看| 久久成人午夜| 亚洲av天堂久久精品9966| 一级片免下载观看| 久久久妇女免费观看| 亚洲中文字幕在线中出| 午夜一区福利片| 91精品国产综合久久婷婷| 久久9精品区_欧美日韩| 国产精品三p一区二区视频| 日本一级一级a爰片免费| 黄色片av下载| 亚洲综合国产精品一区12p| a级一级毛片免费在线| 两个日本免费完整版| 国产精品欧美系列| 国产一区二区三区欧美亚洲| 九色国产av天堂| 人妻少妇免费播放| 国产欧美一区二区精品性色tv| 毛片a级免费观看| 国产偷闻女邻居av在线观看| 日韩伊人岛国精品视频| 99国产精品白浆免费观看| 国产精品福利社区| 国产精品成人久久| 欧美激情精品久久久久久人妖| 草青青免费观看视频| 亚洲av综合网在线观看| 97华人在线视频| 真实电影韩国在线观看| 免费黄片视频大全| 丰满少妇hd在线观看免费| 99精品久久免费精品久久 | 二级毛片视频| 青草草在线免费视频| 一二三四社区在线中文视频3| 少妇啪在线播放| 18禁国产精品久久久久久久久久久| 日产精品卡2卡三卡4最新| 国产 亚洲精品| a一区二区三区乱码在线亚洲| 成人免费高清视频一区二区| 精品一区二区乱码在线| 天天躁日日躁狠狠躁电影| 日本免费一区二区av电影| 永久免费成人在线观看视频| 成人免费视频欧美精品| 香港经典av三级观看| 人人妻人人做人人爽夜欢视频 | 中文字幕福利人妻| 日本三级2017在线观看高清| a级毛片观看视频| a级毛片毛片免费观的看久tv| 国产精品亚洲二区第一页| 精品麻豆av在线一区| 欧美城激情视频| 游戏王卡片力量6青眼白龙卡组| 免费不卡黄色视频观看| 国产在线视精品在一区| 国产又粗又猛又大爽又| 9久久婷婷国产综合精品性色| 蜜桃中文字幕| 下载免费看黄片的视频| 亚洲三级欧美三级日韩三级| 高清视频在线观看不卡| 久久亚洲欧美精品| 日本免费a一区二区三区| 永久在线观看免费视频官网 | 久久精品人妻a级毛片| 国产精品久久久久99清纯| 亚洲国产精品一二三| 99热这里只有精品29| 精华乳精华液精华霜| 亚洲精品av成人影院| 久久精品国产96精品亚洲| 女性同性恋毛片| 尤物视频老司机| 中国免费黄片久久| 182国产精品久久| 久久久精品只有这里| 色哟哟精品免费在线观看| 色哟哟免费在线观看入口| 日韩精品美女久久久久av福利| 国产精品51麻豆cm传媒| sao货腿张开ji巴cao死你视频| 老司机内射视频| 美女黄视频黄片欧美亚洲| 激情久久亚洲网| 国产精品久在线免费观看| 国产精品丝袜久久久久99 | 黄片真实视频| 亚洲精品色婷婷在线观看69| 黄色视频在线观看高清无遮挡高潮网站| 一二三区av成人| 999亚洲熟妇熟女ⅹxxx| 成人黄色福利视频| 激情人伦精品视频在线观看网站| 91电影中文字幕| 精品国内欧美日韩电影| 特别黄的免费大片30分钟左右| 黑人巨大进入亚洲女人在线观看| 插阴视频免费在线观看| 午夜老司机免费视频| 国产毛卡一卡2卡三卡的区别| 久久久久亚洲av成人网人人| 午夜一级片免费看片| 永久在线观看免费视频官网| 精品少妇一区二区三区视频午夜| 亚洲欧美精品一区二区日黑人| 亚洲大尺度av在线| 十大禁止黄色| 女生长腿毛了怎么办?快速消除 | 欧美电影在线一区二区三区| 国产在线电影一区二区三区| 九九精品在线观看| 欧美日韩一区二区三区精品在线看| 新一级毛片在线免费观看| av亚洲动漫| 日韩综合欧美精品亚洲| 丝袜变态另类在线| 久久久噜噜噜久久久午夜| 国产欧美日韩亚洲区| 小便嘘嘘pissing| 日日摸夜夜添夜夜添欧美蜜桃| 思思99热久久精品2019线6| 欧美精品一区二区三区www | 蜜桃av久久久久免费网站| 一本色道久久久888| 伊人亚洲22| 亚洲五月天色图在线电影| 中文字幕亚洲成人影院| 日韩熟女亚洲老熟女| 国产又猛又粗又爽又黄视频| 日韩欧美亚洲成人中文字幕| 亚洲情色制服丝袜| 亚洲欧美国产日韩av| 亚洲一卡二卡三卡4卡| 男女做爰高清无遮挡在线视频 | 国产黄色 在线观看| 男人的天堂激情网| 久久久91影院| 日本高清视频在线播放一区| 大香蕉av视频在线| 精品日韩欧美国产| 国产亚洲av一区二区三区在线| 欧美牲交a欧美牲交| 久久福利国产av| 色偷偷噜噜噜亚洲男人| 日本午夜黄色精品视频| 国产18videosex性| 中国a级毛片在线看| 少妇被我搞到高潮视频| 国产精品亚洲av综合久一区二区三区| 91麻豆国产在线| 亚洲精品成人在线观看| 欧美黑人特逼| 久久精品视频专区| 国产毛卡一卡2卡三卡的区别| 国产黄片av在线免费看| 国产片精品av在线午夜| 欧美黑人操中国女人| 成人午夜网站视频| 中文在线观看网站| 亚洲av网一区二区三区| 国产欧美熟女自拍| 狠狠躁夜夜躁人爽碰88| 男人女人激情的视频| 国产真实偷乱视频在线观看| aⅴ超薄肉色丝袜交足视频| 久久国产一区二区三区四区精| 亚洲av 看片一区二区三区| 欧美sexxxxxvideos| 亚洲国产高清精品影片| 精品亚洲永久免费精品| 欧美骚妇视频| 欧美日韩国产@v| 亚洲久久精品网| 久久亚洲熟妇熟女ⅹx| 国产一级内射片在线免费| 女同久久精品国产99国产精品| 中文字幕日韩精品免费小视频| 欧美一区二区三区经典精品| 国内精品人妻在线中文字幕 | 久久午夜影院在线观看| 亚洲欧美国产综合精品| 美女视频国产片色| 91人妻日日操| 日本xx色视频| 人妻诱惑影院| 国产伦精品一区二区三区照片 | 国产福利一区二视频播放24p| 美女大尺度免费观看网站| 欧美刺激独立网站国产刺激| 久久香蕉精品网站| 国产视频在线一区二区三区四区| 在线观看免费观看完整版| av老鸭窝在线播放| 韩国精品影院| 熟女丰满老熟女熟妇22p| 一二三四在线播放免费观看高清视频大全| 中文有码字幕在线观看| 国产免费播放一区二区三区 | 日韩中文成人影院| 蜜桃精品国产一区二区三区av| ,国产精品久久久久久免费| 91久久人澡人人添人人爽潮喷| 国产18禁无遮挡网站| 漂亮的老师2在线观看免费全集| 我要看免费的三级毛片| 无遮挡羞18禁黄漫画网站免费| 欧美亚洲韩国aa在线| 无人区乱码一区二区三| 亚洲精品在线播放,| 无人区大片免费播放| 久热精品在线免费观看| 黄频免费观看在线| 欧美婷婷丁香| 20岁女人毛片水真多十八毛片 | 午夜一级久久久免费视频| 性欧美人善交| 亚洲精品欧美专区视频| 91亚洲国产成人久久精| 亚洲片免费在线观看| 美女被男人操的视频在线免费观看| 女人穿那黑色丝袜最性感| 国模人体艺术一区二区| 国产99久久精品区一区二| 亚洲 综合 久久 精品| 日本一区二区三区在线资源| 高级教师全集在线观看| 日韩黄色av片| 岛国自拍视频| 精品国产乱码久久久久女人| 亚洲综合99久久| 被多个黑人粗壮猛烈进出视频| 精品久久人人爽| a级毛片免费观看完整| 风骚少妇人妻| 非洲黑人操亚洲美女| 日韩码一区二区| 亚洲av电影在线观看二区| 在线一区日本视频| 日韩资源高清| av久久天堂久久天堂av综合| 久久精品99中文字幕| 古装伦理三级在线| 欧美日韩不卡视频播放| 黑人黄色免费| 岛国午夜视频一区三区| 亚洲精品 av| av天堂av亚洲| 中文字幕乱码人妻久久精品| 人人妻人人澡人人爽人人免费| 男女动态啪啪图| 2卡3卡4卡av| 亚洲av免费一区二区三区| 欧美日韩一区二区三区免费观看| 亚洲乱人乱码精品麻豆av| 性欧美极品xxxx欧美一区| 国产麻豆剧传媒精品国产av| 特级丰满少妇一级aaa爱毛片 | 人妻中文制服| 美国成年毛片| 欧美,亚洲,国产精品| 国产成人精品中文字幕| 亚洲毛片不卡av在线播放一区二区| 午夜福利免费福利成人影院在线观看| 久久久久老子影院| 吃奶边添边摸边做边爱在线视频| hav精品亚洲欧美| 国产精品久久久久久久久蜜桃软件| 日韩av免费av| 午夜黄片播放视频| 亚洲av福利动漫| 成人精品人妻一区二区| aaaa大片少妇高潮免费看| 视频电影播放| 久久一级片免费播放| 亚洲精品久久网址| 国产精品电影午夜| 91精品国产福利线观看久久`| 一本大香蕉久久av| 久久久精品3d动漫一区二区三区| 久久av免费大片| 国产丰满性熟妇ⅹxxooozz| 亚洲变态另类天堂av手机版| 黑人xxxx作爱视频| 精品国产亚洲av麻豆小草| 欧美激情啪啪国产一区二区| 超碰久久热大香蕉| 国产精品vr婷婷| 激情娇喘呻吟抽搐高潮视频| 国产美女在线福利| 黄色一级大片播放| 99内射视频| 亚洲www 7777久久久久久久| 跪求国产av网址| 成人观看一区二区三区| 国产男男激情gay片在线看| 2021不卡毛卡片| 久久成人亚洲影视| 在线a小视频在线观看网站| 麻豆成人精品视频| 久久久91影院| 在线观看波多野结衣一区| 亚洲视频不卡在线观看dbd| 日韩欧美国产不卡视频在线观看| 日本精品一二三| 亚洲精品蜜桃av| 大香蕉猫咪av成人票| 精品国产乱码久久久久久蜜桃免费 | 日韩伦理电影免费在线观看中文字幕 | 亚洲精品在线播放,| 中文字幕一区侵犯人妻| 亚洲毛片不卡av在线播放二区| 国产精品高潮呻吟av久久黄| 成年女人免费在线看片| 国语在线观看免费视频| 最近中文字幕完整视频高清| 又a又黄免费视频| 国产精品18久久久久久不卡孕妇 | 日韩精品午夜理论片在线| 久久99这里有频精品16| 熟女少妇视频一区二区三区| 吃奶摸下边的免费视频| 美女视频免费很黄| 成人久久久久久久久| 人人妻人人澡人人爽人人精品免费 | 国产伦一区二区三区精品| 亚洲精品 av| 国产高清男人天堂| 天堂网www在线中文字幕| 国产一区二区三区视频大全免费观看| 日日摸夜夜添夜夜添欧美蜜桃| 久久综合九色综合97伊人麻豆| 亚洲看片国产精品| 香蕉黄片免费看| 又爽又黄又无遮挡裸乳网站| 亚洲国产成人麻豆仙踪林| 韩国成人黄色片| 日韩电影在线观看视频一区二区 | 国产精品久久久久精品日日dvd| 日本免费在线一二区| 婴儿边吃奶边哭是怎么回事| 亚洲国产 另类 久久精品| 国产日韩av一区二区三区| 韩国视频一区二区三区| av影片免费在线| 亚洲免费人成在线视频| 久久精品电影免费看| 久久午夜爱爱| 久久久久久毛片一级| 欧美色噜噜噜国产色吧| 成人 欧美 一区| 波多野结衣免费视频一区二区| 男人l进入女人b水喷出来在线视频| 嗯啊 别揉我奶头 免费视频|