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大二個人學習計劃范文1大學四年中,大二無疑是最關鍵的一年。從這一年開始,大多數同學都有了比較清晰的學習進程和相對穩定的學習、生活態度。然而,除此之外,我們還應將各部分做得更合理、完善;這樣才能順利地走下去。
對于學習,當務之急就是為英語A級做好十分的準備,若對自己要求更高,計劃就得更為精細、嚴密、合理。
主要內容是:一,結合自身和客觀情況對所需的準備量有大致的把握;
二,充分利用時間、認真執行學習計劃。
值得注意的是:由于剛接觸不久,我們對自己的專業課程還不是特別清楚,有的還產生了些許畏懼和慌忙感。因而,在心情相對平穩的大二,著力培養對專業課程的興趣、學習方法,是很相宜的。我們還應明白,無論什么事一上手時,總是有點陌生的、不安心的,后來慢慢熟悉了,很多道理也就在點點滴滴的領悟中明晰了。盡量克制、避免急噪、恐懼等不良情緒。
態度決定命運,環境影響人生,這我們都聽膩了,但沒幾個正確地看待它。
即將走出“象牙塔”的我們,身肩來自各個方面的責任。因而,在著、這特殊而寶貴的一年里,我們不能再像一個無知而任性的頑孩子,而應該像許多成功的偉人年輕時候那樣,樹立宏大的奮斗目標,踏踏實實地過好每一分鐘。不要以為這一分鐘很不好過,要知道;如果現在放縱自己懶散的習性,以后殘酷的現實會讓你更難過。再說了,只要你現在花個一小時----哪怕10分鐘,真正去體味思考著的樂趣,相信你不久就會再次懷念那美妙的、無與倫比的愉悅。
思考就是生命,就是生活。
主觀、客觀因素往往制約著一個人的成功。所以,我們不可不談環境與自己的關系。對與我們來說,與人交往是最為主要的、影響我們的外界條件。善于把握自己,與人交往的同學會從中享受到很多裨益;相反,那些平時慣于沉默、排外、極易失控的同學則會把它視為無底深淵,讓人沒完沒了地煩惱、憂愁。我以為要搞好人際關系,首先你自己必須是一個性格明朗、講道理、負責任、心胸寬闊的人;其次,你還須明白沒有人是完美的,他們的所有品性皆由自然所造,也可為之所修。因此,我們應學會用發展的眼光看待任何人。只要你夠真、夠純、夠味,總有一天,總有一個人會懂你,到那時你的天空將會出現一道微笑的彩虹。最后,把你和你的“視敵”看清楚,盡量緩和彼此間的矛盾,在沒找到解決問題的途徑之前,周旋無不是最佳方案。
大二個人學習計劃范文2一、考試課、考查課的學習
這學期的考試課比上學期多,任務也加重了一點。我們現在學的知識偏文的多一些,對于我這個理科生來說有一點困難,但困難是用來克服的,我相信我可以學好這些知識,只要我努力了,盜用一下李寧的廣告語:一切皆有可能。
二、通過英語四級考試
英語四級考是本學期的重點。我的英語基礎不太好,單詞量比較少,這可能會給我的考試帶來一定的困難,但是沒有困難何來挑戰、何來動力,所以我要勇敢地迎接挑戰。于是我決定將這學期的主要精力放在英語學習上,每天抽出時間來背單詞、做試卷、聽聽力,提高我的英語成績。
特別是英語聽力,在考試中占的分數比例大,難度高,不能在一時間鍛煉出來,需要時間的積累,不斷地練習。所以我一定要在平時擠出聽聽力的時間,盡量把聽力練好,多拿分數。
三、通過電腦一級考試
對于電腦一級考試,我還是比較有信心的。雖然電腦水平不高,但一些基礎的東西還是可以的。所以我準備把學校發的基礎題看一下,上機操作幾遍,熟悉一下操作平臺就差不多了。
四、體能鍛煉
在我們警校體能的要求非常高,體能的分數在總成績里也占了很大的比例。這是一個不容忽視的環節。春天到了,正是鍛煉身體的好時機。一定要抓住這個時機,多去操場跑跑跳跳,活動筋骨、強健體魄。
五、社團活動
上學期我加入了“心橋手語社”,這學期手語社會組織考“手語初級證書”。學手語,是我很早以前就有的夢想,如今夢想得以實現,我倍加珍惜。手語對我們以后的公安工作也有很大的幫助,有利于我們和聾啞人交流,方便工作地開展。
我有信心能把這些計劃付諸實踐,努力,加油!
大二個人學習計劃范文31、努力把英語四級考出來。
2、把組織部的相關工作做好。
3、把專業知識學精,多學習一些柴油機方面的知識。
4、多學習一些船舶英語和日常交際英語。
5、多練習CAD,努力看懂圖紙。
6、學習一些管理,社交,金融,營銷的知識。
7、把船舶鉗工拿下。
8、多學習一些會聲會影和PS等的軟件。
9、了解自己的專業趨向,找準職位集中學習,了解理想的公司。
10、學習男生的氣質和修養。
11、學習一些醫學常識。
12、每天一節網上公開課。
大二個人學習計劃范文4時間總在不經意間流逝,轉眼已是大二學期了,不能再盲目覺得自己是新生,要慢慢摸索大學之路該如何走,應該有明確的計劃。
讀大學不再是讀課本的知識,要學的很廣泛。如自修之道、基本知識、實踐貫通、積極主動、掌握時間,還有非常重要的一點就是為人處事。
要從思考中確立自我,學習中尋求真知,交流中鍛煉表達,交友中品味成熟,實踐中懂得價值,興趣中攫取快樂,最求中獲得力量。
大學是個廣闊的舞臺,其實每個學生都是主角。如何在這個舞臺上盡顯光彩:就需自修能力了。要學會挖掘合適的學習方法,舉一反三。這樣才能適應瞬息萬變的現代社會。這學期呢我有一些小安排:
第一是X月份的C語言考試,借助網絡和圖書館來復習準備。
第二是X月份的英語四級和以上方法差不多,就加上每晚的一個聽力小訓練和單詞記憶。
相信每個專業的課程安排都有一定的科學依據,所以除其重點發展方向科目加強鉆研外其他基礎知識要做適當的了解,為以后工作生活奠定基礎。
死記硬背永遠學不精,學不透。在實踐中學習,花一定時間來思考所學內容間的聯系是很實用的。比如我們的音頻技術、網頁制作與網站建設還有上學期的Flash完全可以聯合起來學習,而這些操作性強的科目明顯需要勤加練習。我們的電腦已為我們提供了絕對的實踐可能。興趣是一切學習的動力源泉。明確自己的興趣應是每位學子的第一步。
除了自身感興趣的可以學習,還有興趣的培養。對那些想學而畏懼的學科就需培養興趣。比如計算機方面的東西我很感興趣可也很畏懼。所以我在一步步調整心態,讓興趣占領主導地位。韓語是我很想學的小語種,我也在計劃中慢慢自學。
積極主動往往會贏得更多機會,不管是學習還是校園各種活動,應該適量參加,這是對自己最好的鍛煉機會,同樣是積極心態的激發點。所以盡量去參加一些有意義的活動。時間永遠是最寶貴的`。一寸光陰一寸金,又何止呢!愛睡懶覺是我浪費時間的最大因素,此學期開始我已在漸漸克服當中。
大學就是一個小型社會。為人處世很重要,這也是我要重點學習的。在此我先要學的是寬容,這是我高三到現在一直追尋學習的,還沒有達到我想要的最佳狀態,所以還在繼續。還有就是與人交流,這是我最不擅長的?,F在我在強迫著自己打破以前的心態,盡量去與人交流,從一個微笑,一聲問好開始。要做的太多,更需要的是持之以恒,有的在進行著,有的在準備當中即將開始。在這片美麗的土地上即以播下夢想的種子,就一定會用心去灌溉。
大二個人學習計劃范文51、很快的大一過去了,大二學期已經來了,從這個學期開始我學習目標要明確,實現目標也有保證。
我要短時間內達到一個小目標。長時間達到一個大目標。在長短計劃指導下,使學習一步步地由小目標走向大目標。
2、恰當安排各項學習任務,使學習有秩序地進行,有了計劃可以把自己的學習管理好。
到一定時候對照計劃檢查總結一下自己的學習,看看有什么優點和缺點,優點發揚,缺點克服,使學習不斷進步,這個學期馬上就要考計算機證了,所以我們應該多練習題目,英語也要考級,所以單詞也不能馬虎,要多記,上課聽講,多做往年習題,提高自己各方面的成績。
3、對培養良好的學習習慣大有幫助。
良好習慣養成以后,就能自然而然地按照一定的秩序去學習。有了計劃,也有利于鍛煉克服困難、不怕失敗的精神,無論碰到什么困難挫折也要堅持完成計劃,達到規定的學習目標。
4、提高計劃觀念和計劃能力,使自己成為能夠有條理地安排學習,生活、工作的人。
這種計劃觀念和計劃能力,學生都應該學習和具備,這對一生都有好處。
5、分析自己的學習特點,同學們可以仔細回顧一下自己的學習情況,找出學習特點。
各人的學習特點不一樣:有的記憶力強,學過知識不易忘記;有的理解力好,老師說一遍就能聽懂;有的動作快但經常錯;有的動作慢卻很仔細。如在數學學習中有的理解力強、應用題學習好;有的善于進行口算,算得比較快,有的記憶力好,公式定義記得比較牢;有的想象力豐富,善于在圖形變換中找出規律。所以幾何學習比較好……
6、分析自己的學習現狀,一是和全班同學比,確定看自己在班級中成績的位置,還常用"好、較好、中、較差、差"來評價。
二是和自己數學成績的過去情況比,看它的發展趨勢,通常用"進步大、有進步、照常、有退步、退步大"來評價。
在新學期里學習要更加努力,獎學金要拿,爭取拿一等。在專項訓練自己突出能力、掌握一些基本的專業技能的同時,也在日常生活中應該注意多余比別人交流,提高自己的處事和交際能力并樹立健康的贏取愛好,鍛煉好身體。這會對以后的工作和生活很重要。
積極配合老師的教學,緊跟老師的教學進度,遇到問題要多與同學或老師交流,盡快解決。端正自己的學習態度,認真按質按量完成老師交待的任務,不敷衍了事。注意加強自己的薄弱科目的學習,不偏科。 除了學習還應該注意,加強自我身體鍛煉,
健康的勝利是學習效率的有理保證。 定期檢查自己的計劃的實行情況,以監督保證計劃的正常實施。
大學第二年學習計劃制定一
大學生活過去一半,過了大一的懵懂與青澀,也過了大二的張揚與躁動。似乎接下來的大學生活只能這樣按部就班的過下去,開學前期的漫無目的,以及考試前的死命突擊。其實,為了有一個美好的大學生活,以及將來走的更穩更高,大三大四可以有一個很大的作為。抓住每一天,認真學習認真生活,韜光養晦。
總結起大二的生活,可以從以下幾個方面來說。
第一,作息時間沒有大一規律??赡苁侨说亩栊运拢蛘咦约簺]有自制力。在好多個周末的早上總是一覺睡到大上午,白白浪費了大好的時光。因為晚上睡覺都很晚,直接導致睡眠不足,早上起不來。形成了一種惡性循環。
第二,沒有好好堅持鍛煉身體。晚自習的取消,待在宿舍,離操場遠等等因素導致了自己沒能好好堅持下來。
第三,沉溺玩手機。對手機的依賴性越來越大。其實,大多是玩些無聊的東西。白白的浪費了自己的時間,還加重了自己的惰性,又形成了一種惡性循環。
第四,自制力不強。好多不健康的東西明知故犯,與自己與他人都是不好的。一定要杜絕,切勿貪一時之快。
第五,作為班級班長,自己的領導能力,溝通能力以及化解矛盾的能力等等方面有待提高。
第六,守護好自己的愛情。要在這個過程中讓兩個人都學會愛。
提高自己。
為了更好地大學生活,特對以后的大學生活做一個或具體或粗略的規劃。
第一,一定要珍惜自己的時間。抓住一切時間來學習,不要在最能吃苦的年紀選擇了安逸。合理安排自己的作息時間,不要熬夜太多。保證每天有精力。
第二,每天不論多晚多累,一定要去跑步。跑20xx米,堅持一個學期,保持好的身形為以后的競爭作資本。一定要注意自己的外表打扮,不能拖沓。
第三,嚴格控制自己玩手機的時間與內容。不在學習的時候玩手機,不看對自己成長無益的內容。
第四,作為班級班長,要學會周旋,學會辦事,做任何事要有自己的判斷力,不能人云亦云,要學會自己考慮問題與解決問題。喜怒不形于色。做一個有能力的人。
第五,好好愛。一起成長。
(學習篇)
總結起自己的學習狀態,最大的一點是自己有很大的畏難情緒。不能很好地堅持下來,不能按捺浮躁的心情去做好手頭上的事。具體的來說,有以下幾個方面的問題。
1,不能靜下心來研究問題,學習態度太浮夸。
2,上課不能好好聽課,習慣于玩手機。 3,參加競賽什么的態度沒掌握好。
規劃:
1,一定要對自己所學的專業有比自己身邊人有更加深入的研究。這樣才能脫穎而出,所以,平時一定要多鉆研。
總之,一定要好好的規劃,好好把握剩下來的兩年。
大學第二年學習計劃制定二
在人的一生當中,4年的時間不能說很長,但對于一個青年大學生來說,這寶貴的4年卻是匆忙而短暫的,因為青春可貴,大學是接下來人生發展的基礎,所以,珍惜大學4年的生活,好好奮斗,意義非凡。
大學第一年學習生活已經過去了,總結過去,既有欣慰,也有遺憾,欣慰的我用一年的時間換來了自身的成長,大一的我積極樂觀,學習上認真,努力,工作上踏踏實實,不斷的向別人學習。付出總有收獲,我用自身的經歷驗證了這句話。
大一生活當然也有遺憾,在成績上我并沒有取得我想象中的結果,沒有做到成為佼佼者。但不管怎樣,我還會繼續奮斗,像當初那樣。進入大二,我會把英語放在重中之重的位置,英語基礎本來就薄弱的我想要在大二有所突破,想要攻破四級必須比別人付出更多,我要把每一天的清晨、每一天的自習時間充分利用起來,避開閑人的冷嘲熱諷,因為我就是我,我走我的路,我有我的目標,我的理想,為理想而奮斗沒有錯。另外,我要對我的學習方法進行改進,我想科學的學習方法能更快突破成績,科學的學習方法能夠事半功倍。
我的目標很明確——通過12月份的全國英語四級考試,不管有多少困難,我都不會放棄。學生工作也是我大二學習生活的一個重點,在很多人眼中,學習部在學生會所有部門中是最重要的,具有代表性,對我來說不僅是自豪,也是一份壓力,但我對自己有信心,我相信學習部在接下來的一年會做的更好,加油! 計劃是計劃,實踐是實踐,讓實踐踏著計劃的步伐走!
大學第二年學習計劃制定三
大學生活一年過去了,發現大學學習生活與中學很不同,要逐漸學會轉型,適應大學的學習生活。中學教師作用非常大,學生跟著學,大學則通常每天二科目時間,課后有很多的學習過程是發生在課堂之外由學習者自主去完成的,大學的教學具有很強的獨立性和開放性,所以獨立學習、學會學習的習慣養成在大學非常的重要。
上一學年由于學習任務沒有規劃好,學習目的不太明確等原因,導致了自己在學習過程中遇到了很多的`問題,從而大大降低了學習的效率。針對上一學年自己在學習上存在的許多需要改進地方,也結合自己本學期的課程特點,和學習任務的安排,為了更好的提高學習效率,充分利用有限的學習時間,取得更大的進步,現制定出大二第一學期學習計劃,具體如下。
在新學期里學習要更加努力,獎學金要拿,爭取拿一等。在專項訓練自己突出能力、掌握一些基本的專業技能的同時,也在日常生活中應該注意多余比別人交流,提高自己的處事和交際能力并樹立健康的贏取愛好,鍛煉好身體。這會對以后的工作和生活很重要。
積極配合老師的教學,緊跟老師的教學進度,遇到問題要多與同學或老師交流,盡快解決。端正自己的學習態度,認真按質按量完成老師交待的任務,不敷衍了事。注意加強自己的薄弱科目的學習,不偏科。 除了學習還應該注意,加強自我身體鍛煉,
健康的勝利是學習效率的有理保證。 定期檢查自己的計劃的實行情況,以監督保證計劃的正常實施。
這學期,我將在專業上更加強學習,專業知識顯的更為重要,要為了自己的未來著想,多去學校圖書館看些書,以更好的充電,填補自己各方面的知識空缺,增加知識面,增加個人修養。
那么,究竟要怎樣做,才能有效達到上列標準呢?這實在是「老生常談而且「見仁見智的問題。不過,為了拋磚引玉,乃不揣簡陋,就管見所及提出下列十項建議,敬請專家惠予指正。
第一, 袪除學習英語的心理障礙。最常見的障礙有兩種,一是決心不強,二是信心不夠。其實,要想學好英文或其他任何學科,非得先下定決心學好它不可。有人學英文已有七、八年甚至十幾年的歷史,卻仍未「學好,固然可以歸咎許多因素,但最根本的原因之一恐怕是沒有下定堅強的「學好英文的決心。由于這個緣故,學習態度往往就顯得相當被動或消極。我曾教過「大一英文課,常??吹讲簧賹W生修英文似乎只為了應付考試,賺幾個學分而已。這些學生只喜歡念考試范圍以內的東西,范圍以外則沒有多大興趣。如有這種學習動機與態度,卻想「學好英文,恐怕花再長的時間也很難如愿以償。
收稿日期:2011-10-26
作者簡介:曹偉(1981―),男,湖北荊州人,工程師,主要從事園林景觀規劃設計方面的工作。
中圖分類號:TU986.1
文獻標識碼:A
文章編號:1674-9944(2011)11-0037-03
1引言
當前,中國大學校園的新校區景觀建設方興未艾。各地新校園一般都規模龐大,建設速度驚人,在幾年內就投入使用。但其建成使用后的實際情況并不理想,甚至有些與原有設想相距甚遠。因此如何解決校園高速建設和資金投入緊張等因素同景觀設計所要求效果之間的矛盾,把握其中可變與永續的要素,探討大學校園景觀其自身的有機生長和建設發展的規律,就成了亟待解決的問題。筆者以江南大學新校區的二次景觀規劃為例。
江南大學新校區坐落于太湖之濱的江南名城――江蘇省無錫市,地處蠡湖大道以西、高浪路以南、震澤路以北、緣溪路以東地塊。新校區規劃總用地約230hm2,目前已基本建成占地208.3hm2、建筑面積95萬m2的新校園。
2當前校園總體規劃分析
校園從規劃建設伊始至今,時間跨度很大,其中北區主體景觀最先建成完工,其它景觀建設則按部就班進行。在整個營建過程之中,基本確立了具有明顯江南水鄉秀美風光的氣質和高品位的學術文化內涵,生態優勢明顯,但局部地方因多方面的原因略有遺憾。
2.1現狀優勢分析
主要景觀軸線明確,導向性較強,功能布局合理,形成了具有濃郁地域特色和獨特校園風景的水鄉小鎮街道景觀體系;開創了現代精神意義的曲水流觴景觀,融古于今,既提升了學校自身的文化品位又強化了學校濃厚的學術氛圍;初步構成了校園綠色生態網絡,給師生提供了大量戶外學習、交流、觀賞、游憩的景觀空間。
2.2現狀劣勢分析
(1)由于建設周期的緣故,采取了分期分批設計、施工的模式,致使校園景觀的完整性欠缺,逐漸偏離當初的景觀總體規劃目標。如景觀材料、植物品種選擇、空間的節奏變化和豐富性等缺乏一貫的有機聯系。
(2)校園景觀空間與太湖風景區、長廣溪綠化帶、西山的相互咬合、滲透、有機融合性還很弱,透景線廊道的處理也有待深化、提煉。如校園整體地勢較為平坦,局部豎向地形沒有和西山山體形成互動,未更有效達到借西山之景來形成山環水繞的山水格局。
(3)現有部分景觀過分注重面的表現(主要指臨時綠化),采用遮擋的方式,較為封閉,阻礙了人的視覺可達性,造成景觀的層次和深度缺乏,使人在視覺上審美疲勞。
(4)校園水系的常水位的穩定性問題。常水位標高和設計之初有變化,致使部分親水平臺、樹木遭水淹沒。校園中植物品種重復性過高,品種豐富度偏弱;整體植物的數量偏少、規格偏小,局部重要景觀節點缺乏相應的高大喬木和優美造景樹的支撐和點綴。
3二次景觀規劃構思
從校園建設規劃伊始所倡導的“指狀布局規劃模式”入手,對校園的景觀結構加以重新梳理、整合、并使之明確定性,然后在結構和總體景觀思想的指引之下,整體實施方案和施工圖設計(含景觀修建、補建、新建項目),力爭一步到位,避免景觀盲區的產生,最終達到終極目標――創造一個人文與生態交融共生,傳統與現代互為滲透,充滿情感的校園景觀。
3.1設計原則和重點
3.1.1交往觀
以“交往”作為校園景觀的本質意義,進一步營造具有歸屬感的生活學習環境,從而創造富有活力的不同氛圍的特色交往空間。另外,也相當注重綠地的高參與性和開放性,達成人與自然的交流,人與歷史文化的交流。
3.1.2尺度觀
確保各類空間的尺度和諧統一,互為滲透,營造宜人情境場所。
3.1.3文化觀
景觀設計中韻含恬淡深遠的人文色彩環境特征,體現江南文化的博大精深和兼容并蓄的特質;同時體現學校深厚的歷史文化傳統即校史文化以及具有本校特色的新校園文化。
3.1.4生態觀
以生態、可持續發展為第一訴求,營造日久彌新的生態校園。因地制宜地配置植物群落,多采用節水性植物,形成可持續生長的生態環境特征。同時,充分利用校園水系和外界聯通的有利條件,通過水生動植物的養育及多樣性駁岸等的綜合設計來提高校園水系的自然生態,進一步構建和諧的親水環境。
3.2空間布局和特色
整個校園二次景觀規劃布局(見圖1)由 “一心、兩軸、三帶、四點、五路、六園、七院、一環”的空間脈絡結構組成,它既具有點、線、面有機組合的空間形式,也蘊含多層次、多內涵的風景韻味。
圖1校園景觀規劃布局
3.2.1一心:中心湖區
小蠡湖地處全校的中心,四周環繞各院系教學樓、圖書館等高校重要建筑物,集全校的教育文化、人文精神傳承、信息交流和生態風景共享等中心于一體。
3.2.2兩軸
(1)東西軸。從東大門到行政樓再到圖書館,是學校及其重要的禮儀文化景觀軸線,是學校對外宣傳、展示的形象窗口。
(2)南北軸。由北校門到南校門,縱貫整個校園南北,串聯了學生宿舍區、教工生活區、體育運動區、教學區、圖書館等空間,是學校的南北大動脈。它是最能反映校園文化肌理、地域風情的一條曲水流觴濱水步行景觀軸。
3.2.3三帶
(1)生活水街景觀帶。橫貫校園北區的學生宿舍、食堂、商店、書店等生活化建筑群,是校園中人氣最旺、最能體現大學生日常生活情景的風景帶。通過對“小橋、埠頭、花廊、長亭、山石”等質樸景觀元素的再提煉,呈現一幅充滿活力的江南水鄉小鎮的生活畫卷。
(2)休閑親水步行景觀帶。北承小蠡湖之煙波,南通護校河之寬廣,是校園南區的主要河流,沿河分布著西區教學科研樓、學生宿舍、食堂、活動中心等校園建筑群,人流量很大。該景觀帶是人們日常休閑放松、戶外自修、游覽觀光的生態步行親水活動場所。
(3)幽幽水巷景觀帶。西接雪浪潭東連護校河,構建南區一條重要的東西向水系風光帶。
3.2.4四點
(1)東入口廣場。作為校園的主入口,景觀追尋一種雍容大氣、開放自由的氣質,不作太多的繁復修飾,以大樹、草坪、山石、鮮花為主要構景元素,簡練深遠。
(2)北入口廣場。作為校園目前和外界聯系最為緊密的入口空間,景觀追尋的是一種帶有地域文化烙印的風貌,具有江南學府博大精深的魅力。
(3)小蠡湖之影波臺。作為圖書館的和小蠡湖以及南北軸線的交匯點,繼續強化其作為校園的最佳觀景平臺的作用。
(4)雪浪潭之桃花塢。作為曲水河、東行河和新紅河的交匯大水面,構建一處具有相當景觀特色和詩情畫意的濱水空間,成為進入南入口之后的重要景觀節點。
3.2.5五路
五路分別是中央大道、三江路、兩江路、泰山路、峨眉山路,呈“中”字型分布,形成校園的主要交通綠色廊道。
3.2.6六園
六園由校友名人園、森林拓展園、西塘濕地園、遺址展示園、人文藝術園、風雅傳道園組成。它們是具有明顯的景觀、教化、參與意義的特色風景園,是江南大學所獨有的綠色寶庫。
3.2.7七院
七院即教學東區組團、教學西區組團、北區學生庭院組團、南區學生庭院組團、教工庭院組團、體育公園區組團和工業遺產區組團。它們多為內向型景觀庭院,是校園師生生活學習的場所。
3.2.8一環
一環指的是護校河與城市界面的景觀環,是城市和校園過渡的綠色虛空間。
3.3實施措施和重點
在上述規劃布局的指引下,統籌兼顧,按照景觀的重要性和迫切性把校園建設的先后劃分為A、B、C 3個層次。
(1)A級為“一心、兩軸、四點”,其關系到學校的總體景觀風貌和學術文化內涵的建立,是和外界交流的主要形象通道,因此景觀實施必須優先考慮。
(2)B級為“三帶、六園”,其作為江南大學獨有的風景,是具有相當景觀魅力和校園文化品位的,它的建立,會讓江大迅速躋身世界優美高校的行列。
(3)C級為“一環、五路、七院”,在構建完整的生態景觀體系之下,其主要作為校園的發展類景觀,和校園一起慢慢成長?!笆陿淠?百年樹人”,它將見證江大的發展歷程。
2011年11月綠色科技第11期
4結語
大學校園景觀設計,復雜過任何一幢單體教學樓的設計,是一項系統工程,而不僅僅只是停留在藍圖上的美好景象,應當作為學校建設的重點內容,確保設計、施工和養護管理三者并重,缺一不可,要用有機生長的觀點對待這項宏偉工程,并在實際過程中抓住每一個細部環節,只有這樣才能實現最終的理想目標。
參考文獻:
【關鍵詞】 二烯丙基二硫化物
Effect of Diallyl Disulfide on Expression and Secretion of VEGF in HL-60 Leukemic Cells
Abstract
The study was aimed to investigate the expression of VEGF mRNA and VEGF protein in HL-60 cells treated with diallyl disulfide (DADS),and to explore the antileukemic mechanism of DADS in respect of VEGF production.Semi-quantitative RT-PCR and ELISA were used to detect the expression of VEGF mRNA and secretion of VEGF protein in HL-60 cell lines treated by DADS respectively. The results showed that the expression of VEGF mRNA and secretion of VEGF protein were found in HL-60 cells.The expression of VEGF mRNA and secretion of VEGF protein in HL-60 cells could be down regulated by treatment with 0.625,1.25,and 2.5 μg/mL DADS for 48 and 72 hours and the effects had a dose dependent relationship(r>0.9,P
Key words
diallyl disulfide; HL-60 cell; leukemia; vascular endothelial growth factor
全反式維甲酸(ATRA)已成為治療急性早幼粒白血病的首選藥物,但也有其局限性,并且還會發生維甲酸綜合征不良反應,因此尋找毒副作用低的抗白血病的藥物仍是當前研究的重要課題。已有研究證明,大蒜中的一種脂溶性的有效成分二烯丙基二硫化物(diallyl disulfide,DADS)對乳腺癌、皮膚癌、肝癌、肺癌、胃癌、食管癌、結腸癌和白血病等細胞均有抑制作用[1-3],但其作用機制尚未明了。本研究初步探討DADS對HL-60白血病細胞株抑制作用的可能機制。
材料和方法
細胞系及試劑
人急性粒細胞性白血病細胞系HL-60細胞,由中南大學湘雅醫學院細胞中心提供。RPMI 1640培養液為美國Gibco公司產品。胎牛血清為杭州四季青生物工程公司產品。DADS為美國Fluka公司產品,相對分子質量為146.28,純度為80% [含10%-20% 二烯丙基硫醚(DAS) ] ;Tween 80為華美公司產品;全反式維甲酸為美國Sigma 公司產品,相對分子質量為300.44,純度≥98 % 。TRIZOL購自美國Gibco BRL公司;cDNA合成試劑盒、dNTP、 TaqDNA聚合酶均購自晶美生物技術有限公司,為美國Fermentas公司產品;電泳用瓊脂糖為德國Promega公司產品;RULERTM DNA 100 bp ladder產品購自晶美公司;VEGF ELISA試劑盒購自晶美生物公司。VEGF引物由上海博亞生物工程服務有限公司合成,引物序列參見文獻[1 ] 。VEGF(Genbank 登錄號: NM-003376) 上游引物: 5′-TCGGGCCTCCGAAACCATGA-3′,下游引物: 5′-CCTGGTGAG-AGATCTGGTTC-3′,根據mRNA剪切位點的不同,擴增產物為516、588、648 bp長度片段。β-actin (Genbank 登錄號: NM-001101)上游引物: 5′-ATCTGGCACCACACCTTCTACAATGAGCTGCG-3′,下游引物: 5′-CGTCATACTCCTGCTTGCTGATCCACAT-CTGC-3′,擴增產物837 bp 。
細胞培養及細胞處理
將HL-60 細胞懸浮培養于含10 %胎牛血清的RPMI 1640培養液中,于37℃、5 % CO2、飽和濕度的培養箱中培養,2-3天傳代1次。取對數生長期的細胞,調整細胞懸液終濃度為2×106/ml 。實驗設為6組,1-3 組為不同濃度(0.625、1.25、2.5 μg/ ml) DADS組,4 組為試劑對照(RPMI 1640)對照組;5 組為溶媒Tween 80對照組;6 組為ATRA(濃度為1.5μg/ ml)陽性對照組。每組2瓶。每50 ml培養瓶加入細胞數為5×106的細胞懸液、不同濃度的藥物、 RPMI 1640培養液,每瓶培養體積為5 ml,放置于37℃、 5% CO2、飽和濕度的培養箱中培養48、72小時。收集各時相細胞上清液,保存于1.5 ml EP管中,-20 ℃保存。 各時相細胞5×106個裝入1.5 ml EP管中,-70℃保存,待抽提總RNA。
細胞培養上清液VEGF蛋白水平的測定
VEGF蛋白水平采用定量ELISA法測定。酶標儀上讀取每孔的OD450值(5分鐘內)取復孔濃度的平均值。
細胞VEGF mRNA表達的RT-PCR檢測
細胞總RNA提取
按TRIZOL一步法提取細胞總RNA。電泳鑒定RNA的質量,紫外分光光度儀定量。
逆轉錄反應
取上述制備的RNA樣品1 μl進行逆轉錄,20 μl逆轉錄體系包括:總RNA樣品1 μl,Oligo(dT)18 0.5 μg/μl×1 μl,用DEPC水補至體積12 μl 后,70 ℃變性5分鐘,冰上驟冷,加入5×Rt緩沖液4 μl,dNTP 10 mmol/L×2 μl,RiboLockTM Ribonuclease inhibitor 20 U/μl×1 μl,37℃溫育5分鐘,加入RevertAidTMM-MuLV Reverse Transcriptase 200 U/μl×1 μl,42℃溫育60分鐘。結束反應后,70℃變性10分鐘,冰上驟冷10分鐘,用于擴增或-20℃保存。
逆轉錄反應產物擴增
取上述逆轉錄反應產物2.0 μl,于20 μl反應體系中行PCR擴增。 反應體系(20 μl)包括:10 ×PCR 緩沖液2.0 μl,25 mmol/L MgCl2 1.6 μl,10 mmol/L dNTP 0.4 μl,5 U/μl Taq DNA 聚合酶0.4 μl,VEGF上游及下游引物各0.2 μl或β-actin上游及下游引物各0.2 μl,逆轉錄產物cDNA 2.0 μl,滅菌雙蒸水補足20 μl 。瞬時離心,置于PCR 擴增儀上,預變性95℃ 2分30秒后,94℃變性40秒,60℃退火40秒,72℃延伸40秒,共32個循環,最后72℃ 5分鐘結束反應,4℃保存。
PCR擴增反應產物瓊脂糖凝膠電泳
15 g/L瓊脂糖凝膠加入終濃度為0.5 μg/ml的溴化乙錠,取上述PCR 擴增反應產物5 μl、溴酚藍上樣指示劑1 μl,加入到凝膠的點樣孔中,每次取6 μl電泳,在100 V電壓電泳約1小時。取出凝膠,在紫外反射透射凝膠圖像分析儀上觀察電泳結果并照相。通過掃描取復管電泳條帶灰度的平均值,根據VEGF 與β-actin灰度比值,進行目的基因表達的半定量分析。
統計學分析
所有數據均以均數±標準差( ±SD)表示。采用SPSS 11.0計算機軟件對所得數據進行分析,兩樣本間比較用配對t檢驗,多組樣本均數間比較用單因素方差分析,雙因素相關分析,兩兩之間多重比較:方差齊用LSD檢驗、方差不齊用Dunnett T3檢驗。P>0.05為差異無統計學意義,P
結果
二烯丙基二硫化物對HL-60 細胞分泌VEGF蛋白的影響
結果如表1所示。3種濃度DADS及全反式維甲酸作用48 小時和72 小時后細胞上清液中VEGF濃度與空白對照比較,顯著減低(P<0.01),表明0.625、1.25 和2.5 μg/ml的DADS及1.5 μg/ml全反式維甲酸作用HL-60細胞48小時和72小時可抑制HL-60 細胞分泌VEGF。3種DADS藥物濃度之間比較,差異具有顯著性(P<0.01),干預同一時間點后DADS抑制HL-60細胞分泌VEGF的作用隨濃度的升高而增大(r絕對值均>0.9,P<0.01),但Tween 80對HL-60 細胞分泌VEGF無影響(P>0.05)。全反式維甲酸與3種藥物濃度之間比較差異顯著(P<0.01)。Table 1.VEGF protein in HL-60 cell lines treated by DADS(略)
DADS對HL-60 細胞VEGF mRNA表達的影響
3種濃度的DADS作用于白血病HL-60細胞48小時、72小時后,細胞VEGF mRNA與內參照β-action條帶灰度比值結果如表2所示。從表2中可以看出,0.625、1.25、2.5 μg/ml的DADS作用HL-60細胞48小時、72小時,VEGF灰度比值與對照組相比顯著降低(P﹤0.01),即0.625、1.25、2.5 μg/ml的DADS處理HL-60細胞48小時和72小時,可明顯下調HL-60細胞VEGF mRNA的表達(P﹤0.01)。各藥物濃度組差異顯著(P﹤0.01),VEGF mRNA相對表達量與DADS濃度負相關(r絕對值均>0.9,P<0.01),即其下調HL-60細胞VEGF mRNA的表達隨濃度的升高而增大。作用HL-60細胞72小時全反式維甲酸與1.25 μg/ml的DADS下調HL-60細胞VEGF mRNA的表達作用相近(P>0.05)。Table 2.Expression of VEGF mRNA in HL-60 cells treated with DADS (略)
PCR產物瓊脂糖凝膠電泳部分結果
結果如圖1、2所示,HL-60細胞表達VEGF mRNA的3種片段,即516 bp、588 bp和648 bp,分別是3種異構體VEGF121、VEGF145、VEGF165 mRNA的擴增產物,HL-60細胞以VEGF121的表達最強。在同一時間點上隨作用藥物濃度的升高,VEGF條帶與β-actin條帶豐度比值下降。
討 論
VEGF可以刺激新生血管的產生,通過自分泌和旁分泌途徑促進自身的增殖,VEGF可能作為一種旁分泌因子影響著白血病細胞自身的生物學效應[4]。大量的臨床研究證明,VEGF在各類型的白血病細胞中均有高表達,且是影響白血病發生發展及預后的獨立因素之一,尋找能抗VEGF產生的藥物在白血病的治療中就具有十分重要的意義。
DADS是大蒜中一種有效的脂溶性成份,具有抑制白血病細胞生長、誘導白血病細胞分化、促進白血病細胞凋亡作用。為進一步探討DADS抑制白血病細胞增殖的機制,我們用ELISA法檢測了不同濃度DADS作用48小時、72小時后白血病細胞培養液中VEGF的含量,用RT-PCR法檢測VEGF mRNA相對量的變化,從而從蛋白及轉錄水平上探討DADS對白血病細胞分泌VEGF及VEGF mRNA表達的影響。結果表明:經DADS處理過的HL-60 細胞,其VEGF的表達及分泌被抑制(P<0.01),因而認為其抑制白血病細胞生長途徑之一可能是抑制人HL-60細胞VEGF基因的表達。我們的這一結果與2001年國內學者高艷景等[5]的研究相似,他們用大蒜素(主要成分為二烯丙三硫占40 %以上,其次為DADS [6])處理人肝癌細胞株BEL7402 8小時,結果發現大蒜素有明顯抑制人肝癌細胞VEGF mRNA表達的作用,與對照組相比,VEGF mRNA表達水平降低了約66.36 %(P
DADS抑制白血病細胞分泌VEGF的機制可能與DADS的誘導分化作用有關。DADS誘導白血病細胞分化,使白血病細胞部分轉變成正常單個核細胞,從而導致分泌血管內皮細胞生長因子的能力下降。在VEGF的調控中腫瘤抑制基因的失活或突變可導致VEGF 在腫瘤細胞中的過度表達,如VHL基因、p53基因的失活。而癌基因ras、raf或src 的突變或擴增可啟動VEGF 轉錄,使表達上調[8,9]。Ras 基因突變頻繁發生于許多癌癥中,這種突變可永久性地啟動信號轉導通路而引起腫瘤發生。在NIH313 細胞株與突變H-ras 基因轉染模擬體外致瘤實驗中,口服DADS可呈劑量依賴性抑制NIH313細胞生長,阻礙可測量腫瘤的形成。這種抑制作用與DADS抑制了腫瘤細胞膜相關P21 蛋白有關,從而抑制了Ras P21 蛋白活化,進而抑制了ras基因的突變[10]。因此,我們認為DADS能降低HL-60白血病細胞VEGF的分泌及表達可能與它抑制基因的突變有關。在本實驗中,我們分析DADS對HL-60細胞分泌VEGF的影響時,選擇的藥物濃度低于4 μg/ml。 Kwon 等[3]報道,DADS在約25 μmol/L (4 μg/ml) 時開始誘導凋亡,即我們選擇的藥物濃度低于DADS誘導凋亡的濃度,結果提示DADS可抑制腫瘤細胞表達血管內皮細胞生長因子,因此我們認為,DADS在低濃度時降低HL-60細胞VEGF的表達與其誘導凋亡的關系可能不大。DADS抑制VEGF的促血管新生可能是DADS抗腫瘤的又一種可能機制。
我們的實驗表明,化學保護劑DADS可抑制白血病細胞VEGF的表達及分泌,從而可削弱VEGF對血管內皮細胞的旁分泌作用,因而具有抗血管新生的活性。由于DADS無明顯的骨髓抑制作用,但具有抗血管新生的活性,故推測其與放療、化療相結合,將會增強放療、化療的療效,減少后者的用量,降低毒性,有助于白血病的治療。但是我們的研究僅限于體外腫瘤細胞系的實驗,整體動物體內及人體內的治療效果尚有待進一步驗證。另外,DADS下調白血病細胞VEGF分泌及表達的機制尚未明確,需進一步研究闡明。
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兒童急性B淋巴細胞白血?。˙-ALL)在兒童白血病中發病率較高,B-ALL在兒童急性淋巴細胞白血病(ALL)中占80%~85%[1],臨床預后比其他急性白血病較好。但在B-ALL中有一種變異高表達CD13的急性白血病,我們稱之為B淋巴細胞白血病變異表達CD13,這種疾病臨床預后較差,化療時副作用大,并發癥嚴重,因此,采取合適的護理對策,不但可減輕患兒的痛苦,還能達到滿意的化療效果。近年來我科共收治13例兒童急性B淋巴細胞白血病變異表達CD13的患兒,現將護理體會報道如下。
1 臨床資料
選擇2007年5月~2012年5月我院收治的13例患兒,其中男8例,女5例。年齡1~5歲4例,6~12歲9例。均通過骨髓穿刺確診為兒童急性B淋巴細胞白血病變異表達CD13。其主要診斷依據為符合急性B淋巴細胞白血病免疫表型且具有典型異常高表達髓系標志CD13的特點,在流式細胞技術檢驗中主要表達的抗體有CD19,CD34,CD38,HLA-DR,CD20,CD22,TdT及CD13,其形態學特點有細胞胞體大小不等,染色質疏松,核仁明顯1~2個,胞質多數不整齊,邊緣易見突出,部分漿中有可疑細小顆粒。本組13例患兒中對初治的4例采用環磷酰胺+長春新堿+柔紅霉素+潑尼松+左旋門冬酰胺酶(CODPL)方案,雖然并發癥較少但臨床緩解率較低,預后較差,化療效果不滿意;后治的9例患兒改用CODPL加小劑量阿糖胞苷治療,臨床緩解率比采用CODPL方案較高,但缺點是化療周期長,化療副作用大,并發癥嚴重,其中并發支氣管肺炎4例,重度感染2例,消化道出血1例,口腔潰瘍1例,化療藥靜脈炎1例。
2 護 理
2.1 心理疏導及干預 白血病的治療是一個很長的過程,目前國內治療的療程要求達到5年。在這漫長的過程中,有效穩定患兒及家長的情緒,使其自覺接受治療是保證醫療效果的關鍵,還可起到藥物所不能達到的作用。對于6歲左右的幼小患兒,因本身的知識所限,其負性情緒如焦慮等反應就較少,這類患兒要盡量讓家長陪伴,提供有趣的書籍和玩具等,分散其對穿刺所致的疼痛、化療所致各種反應的注意力,還應更多地關注家長的心理變化并進行心理指導[2],因為家長的情緒變化與患兒的心理和治療效果呈直接關系,要讓家長樹立信心,積極配和治療,并告之化療是治療白血病的重要手段,讓家長了解所用的化療藥物、劑量、副作用及可能出現的不良反應(如合并感染、出血、 血尿、脫發等),并講解定期化驗(血象,骨髓、肝、腎功能,腦脊液等)的必要性,以及患兒所處的治療階段。對于11歲左右的患兒,雖然對白血病的危害性還未感到恐懼,但卻很容易受住院治療、化療藥物所致胃腸道反應及脫發后自我形象改變等因素的影響,所以我們要告訴患兒及其家長,脫發只是暫時現象,待化療結束后,頭發會慢慢長出來[3]。我們通過以上一系列的心理護理措施,13例患兒全部積極接受治療,保證了治療方案的有效進行。
2.2 感染的觀察與護理 急性白血病患兒本來自身抵抗力低,再加上使用化療藥物,白細胞總數及中性粒細胞數就會明顯降低,當粒細胞<0.5×109/L時,感染的發生率增高,而粒細胞<0.1×109/L時,敗血癥及其他嚴重感染更易出現。本組患兒中有8例存在不同程度的發熱,4例支氣管肺炎,2例重度感染,1例口腔潰瘍,以上感染的患兒除應用廣譜抗生素外,重度感染的患兒還加用了萬古霉素聯合治療,萬古霉素雖抗菌力強但毒副作用也大,使用時注意嚴格控制滴速在1 h以上,嚴密觀察有無血尿等腎毒性表現,定期監測聽力,發現耳鳴、眩暈等癥狀及時處理。護理時要嚴格執行消毒隔離制度,保證護理人員的手衛生,病室空氣流通,地面及床頭桌椅均用84消毒液擦拭,做好保護性隔離。對于高熱患兒要進行體溫監測,給予適當的降溫處理,多飲水,保證水分的攝入。對于合并支氣管肺炎患兒可霧化吸入生理鹽水+鹽酸氨溴索,進行消炎、鎮咳、祛痰等對癥治療。對于發生口腔潰瘍的患兒我們用生理鹽水棉球做口腔護理,每天2~3次,在潰瘍面涂冰硼散,每天3~4次,漱口液可選用碳酸氫鈉與呋喃西林漱口液交替漱口,如疼痛嚴重,可用1%普魯卡因2 ml+慶大霉素8萬U+地塞米松2 mg+生理鹽水100 ml溶液含漱,以減輕疼痛[4]。皮膚護理時要注意大小便后及時清潔會陰處及肛周皮膚以防感染。以上感染病例均得到有效控制,臨床癥狀消失。
2.3 出血的預防及護理 要密切觀察患兒口腔、鼻腔、皮膚黏膜、顱內及胃腸道有無出血現象。定期監測血常規,一般2~3 d 檢測1次,如血小板低于80×109/L,容易出現出血傾向,此時要絕對臥床休息,禁止溫水擦浴、熱敷,注意觀察皮膚及黏膜有無出血點。做各項護理操作時應嚴格執行無菌技術,穿刺要準確無誤,注射治療后要延長穿刺點按壓時間,一般在5 min以上。發熱的患兒應用藥物退熱時,要避免使用復方氨 基 比林、水 楊 酸 類 藥 物,以免加重出血。顱內出血是白血病患者常見的死亡原因之一,應注意觀察患兒意識、瞳孔及生命體征的變化,若患兒突然出現視力模糊、頭暈、頭痛、呼吸急促、噴射性嘔吐,甚至昏迷,則提示有顱內出血的可能,應及時配合醫師搶救。本組有1例下消化道出血患兒,經給予清淡、高熱量、易消化飲食,嚴禁辛辣、堅硬及過熱的食物,并配合應用止血藥物,出血3 d后停止。
2.4 化療藥物應用時的靜脈護理 有些化療藥物,如長春新堿、阿霉素、柔紅霉素等對皮膚刺激性較大,多次注射或藥液滲漏都會引起靜脈周圍組織炎癥或壞死,所以應用時要注意:(1)血管的選擇,要盡量有計劃從遠心端向近心端穿刺,并要求護理人員掌握熟練的靜脈穿刺技巧,避免反復穿刺血管。若藥物劑量過大,刺激性過強,應首先選擇雙上肢粗直的血管注射。每次應更換注射部位,若需要長期注射化療藥物,最好使用PICC置管或靜脈港[5]。(2)靜脈注射前應先用生理鹽水沖洗,確定針頭在靜脈內方可注入藥物;靜脈注射時要邊抽回血邊注藥;藥物輸注完畢后再用生理鹽水10~20 ml沖洗后方可拔出針頭[6],拔針后局部按壓數分鐘,以防藥物外滲或發生血腫。(3)輸注時疑有或已經發生化療藥物外滲,立即停止注入,不宜立即拔針,應由原部位抽取3~5 ml血液以除去部分藥液,拔除注射針,局部冷敷后再用25%硫酸鎂濕敷,也可用普魯卡因局部封閉。(4)本組中有1例已發生靜脈炎的患兒,我們采用患肢抬高制動,礬冰液濕敷,紫外線燈照射,每日1次,每次30 min,28 d后癥狀基本消失。
3 小 結
綜上所述,兒童急性B淋巴細胞白血病變異表達CD13的患兒在做化療時,副作用和并發癥雖然比其他白血病化療時重,但只要我們通過提前預防、注意觀察、積極處理等一系列護理措施,患兒的痛苦就會降低到最小化,從而達到滿意的化療效果。
參考文獻
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中圖分類號:G622 文獻標識碼:B 文章編號:1002-7661(2016)11-133-01
國畫是中華民族的傳統繪畫,具有悠久的歷史,風格獨特,自成體系,是和唐詩、宋詞、書法一樣成為世界文化精華,蘊含了豐富的東方人文精神。大班幼兒通過對國畫的欣賞,讓幼兒從小就能了解祖國傳統繪畫的特點,懂得祖國民族藝術和偉大成就。在欣賞中潛移默化地受到感染,提高藝術修養。對中國畫審美特征的理解會敏銳我們的直覺,欣賞時再結合想象,方能領略作品的文化背景和氣韻、神韻、陶冶情懷。而這一切對于幼兒園的孩子來說,的確有些難度。那么幼兒園的孩子應該如何欣賞中國畫呢?在嘗試對大班幼兒開展國畫欣賞的過程中,我發現了多媒體技術在幼兒學習理解中國畫在立意、構圖、技法等特點方面起到了支持孩子理解和學習的作用。
一、借助聲光視頻等多媒體信息技術感受中國畫的構思
國畫創作,以立意為先,許多繪畫理論家都首先強調這一點,不管是畫山水、畫人物、還是畫花鳥?!耙狻笔菑哪睦飦淼??一是畫家對實現生活的豐富體察、創作經驗的充分積累;另一點便是畫家本人的修養,這樣在創作之先,畫什么,在頭腦中形成了成熟的構思。那我們的孩子該怎樣體會畫家創作的“意”呢?多媒體信息技術就為我們通過了這樣的視覺空間。如:在欣賞宋代以畫梅花著名的《梅》,利用網絡視頻技術,孩子很容易就可以欣賞到佛寺中的冬梅勝景,理解畫家的“畫梅全決,生意為先”的理念。在欣賞李可染《清漓勝境圖》時,教師可以利用漓江視頻理解畫家將漓江勝景集于一圖的“意”以及畫家創作之畫,不落陳套,用意精當,借景以生境,筆少而意多的意境。
二、利用視頻投影技術學習中國畫的造型規律
用于國畫的線條是有生命力的。抑揚頓挫、疏密粗細、快慢虛實、濃淡干濕、無不顯示著畫家的才思、功底。國畫大師黃賓虹先生把繪畫的點線用五個字概括:“平”、“留”、“圓”、“重”、“變”。對于以形象思維占主導的幼兒園孩子來說的確很難理解。所以只讓幼兒欣賞現成的作品還不夠,還要讓幼兒欣賞國畫的創作過程,在欣賞的時候利用視頻分解技術進行分解示范,讓幼兒親眼目睹水、墨、色在宣紙上的滲化交融,使幼兒在干、濕、濃、淡、清構成的水墨淋漓的情趣世界中得到無窮的樂趣,理解留:如屋漏痕,筆在運行中感覺有阻力,在與紙摩擦的阻力中艱澀前行。重:如高山墜石用筆要用勁,要有力度,力透紙背;打點,像高山掉落的石頭那樣有份量。變:變化,筆畫形成多樣性對比,不雷同。
三、巧用網絡繪圖及透視工具理解中國畫的構圖法則
中國畫的構圖一般或作長卷,或作立軸,表現特殊的意境和畫者的主觀情趣。不一定固定在一個立腳點作畫,也不受固定視域的局限,它可以根據畫者的感受和需要,使立腳點移動作畫,把見得到的和見不到的景物統統攝入自己的畫面。這種透視的方法叫做散點透視或多點透視。如:在欣賞北宋名畫、張擇端的《清明上河圖》,用的就是散點透視法?!肚迕魃虾訄D》反映的是北宋城汴梁內外豐富復雜、氣象萬千的景象。它以汴河為中心,從遠處的郊野畫到熱鬧的“虹橋” ;觀者既能看到城內,又可看到郊野;既看得到橋上的行人,又看得到橋下的船;既看得到近處的樓臺樹木,又看得到遠處縱深的街道與河港。而且無論站在哪一段看,景物的比例都是相近的,如果按照照片或是視頻看到的去畫,許多地方是根本無法畫出來的。這時就可以運用到我們的美圖秀秀,黃金透視等網絡工具,將圖片進行切割、透視及重組,孩子就很容易理解清明上河圖的構圖方法的。
四、結合影音技術體會中國畫的意境
中國畫要求筆與墨合、情與景合、現實中無限豐富的景象,繪畫家以強烈的形象感染力。畫家憑借著這種感受,激起描繪這些景象的激情,于是作品作為情景相生的復寫而重現,使情景交融在一起。如欣賞顧生岳《春臨東?!?,這件作品場面十分壯觀,但由于畫面大,人物物件眾多,幼兒很難理解畫家所謳歌沿海漁民為爭高產而春節仍不休息的主題。利用視頻影音技術,讓圖中無數的大小船只動起來,船帆層層疊疊,一眼看不到邊際;船上人頭攢動,眾人都在忙碌之中觀看文藝演出。幼兒體驗畫作所洋溢著一種喜氣洋洋、蓬勃向上的精神,充分了解畫家想要表現和謳歌的漁民生活。
【關鍵詞】 施普善;低氧;高二氧化碳血癥;學習記憶;半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3;海馬;大鼠
Abstract: Objective: To observe the effects of cerebrolysin on the learning-memory function and the changes of caspase-3 expression in the hippocampus of rats model with chronic hypoxia and hypercapnia,and to explore the probable mechanism. Methods: Thirty-two male S-D rats trained by eight-arm radial maze were pided into four groups: rats in the control group without treatment ;rats in chronic hypoxia and hypercapnia group were placed in the special closed cabin with hypoxia and hypercapnia for 8 hr a day, 6 day a week, 4 weeks and injected intraperitoneally with saline ;the rats in two treating group were injected intraperitoneally with 1 mg/kg and 2.5 mg/kg cerebrolysin, respectively. The learning-memory ability was measured using eight-arm radial maze and the expression of caspase-3 in the hippocampus was decteced with Western-blot.Results: Compared with the control group,the learning-memory ability was declined markedly and the expression of caspase-3 was increased significantly in chronic hypoxia and hypercapnia group. Nevertheless, the improvement of learning-memory and the less caspase-3 expression were observed in rats treated by two doses of cerebrolysin. Conclusion: Cerebrolysin may improve the learning-memory ability in rats with hypoxia and hypercapnia, which may be associated with the inhibition of the expressin of caspase-3 in the hippocampus.
Key words: Cerebrolysin;hypoxia;hypercapnia;learning-memory;caspase-3;hippocampus;rats
慢性阻塞性肺疾?。–OPD)患者存在不同程度的認知功能障礙[1],但其機制目前尚不清楚。王小同等[2]在一系列研究中,證實慢性低氧高二氧化碳動物模型大鼠存在空間學習和記憶障礙。施普善含有85%的游離氨基酸和15%低分子量生物活性肽,極易通過血腦屏障,具有神經保護和神經營養作用,已廣泛應用于癡呆、腦卒中、腦外傷等引起的腦功能障礙治療,取得良好的臨床療效。本研究建立慢性低氧高二氧化碳大鼠模型,觀察施普善對其學習記憶功能障礙的治療作用及腦組織caspase-3蛋白表達的變化,并探討其可能的機制。
1 材料和方法
1.1 材料
常壓低氧高二氧化碳艙(溫州醫學院肺心病研究室研制),Medlab生物信號采集處理系統(南京美易科技有限公司),八臂迷宮(溫州醫學院神經藥理研究所),八臂迷宮飼餌(浙江大學醫學院藥學院),施普善(Cerebrolysin,奧地利Ebewe藥廠,批號608260),caspase-3 抗體(Cell Signaling Technology公司),GAPDH優質內參(上??党缮锕こ逃邢薰荆?/p>
1.2 動物分組和模型制備
清潔級SD大鼠(溫州醫學院實驗動物中心提供)44只,體重280~310 g,經八臂迷宮訓練淘汰12只。32只大鼠隨機均分為4組:①對照組;②慢性低氧高二氧化碳組(模型組);③慢性低氧高二氧化碳施普善(1 mL/kg)干預組(施普善1 mL/kg組);④慢性低氧高二氧化碳施普善(2.5 mL/kg)干預組(施普善2.5 mL/kg組)。后3組大鼠適應性飼養3 d后,置于常壓低氧高二氧化碳艙(氧濃度在9%~11%,二氧化碳濃度在5.5%~6.5%,艙內溫度23~26 ℃,濕度50%~70%)內,每天8 h,在入艙前半小時按規定劑量分別予以腹腔注射生理鹽水和施普善;其余16 h放置于正常環境中。每周6 d,連續4周。
1.3 行為學測試
八臂迷宮測試:訓練方法參照文獻[3]方法進行訓練,稱量自由攝食狀態下大鼠的體重,訓練前大鼠禁食1 d,其后限食1 d,使其體重降至原體重的85%左右,在整個訓練期間限食并維持原體重的85%左右。大鼠在迷宮中預適應2 d,每天1次,第1天在八個臂中均撒上餌片任其自由攝食餌片10 min,第2天在固定的四臂中散上餌片(1、2、4、7臂),任其在迷宮中尋找食物10 min。訓練時,在選定的(1、2、4、7)臂中放置餌片,該次序維持到訓練結束不變,將大鼠放于迷宮中央區,用小桶蓋住,在迷宮中適應15 s后提起小桶放出大鼠,大鼠可以自由選擇任意一臂攝取餌片。大鼠進入有餌片的臂并攝取了餌片為一次正確的選擇不做記錄,重新進入放餌片的臂稱為工作記憶錯誤(working memory error,WME),第一次進入不放餌片的臂稱為參考記憶錯誤(reference memory error,RME),兩者之和為總的記憶錯誤(total memory error,TE)。訓練成功的標準:連續5次訓練錯誤選擇次數為≤1次,同時WME必須為零。
1.4 caspase-3測定
大鼠斷頭處死,全腦取出置于冰盤上,依次取出皮層、海馬,去除腦膜和血管,迅速稱重后保存于液氮備用。取部分組織按1:10(密度:體積)加入細胞裂解液,冰上勻漿,13 000 g離心20 min收集上清液,BCA法測定蛋白濃度,等量蛋白(20~50μg)經12%SDS-PAGE電泳后,電轉移至PVDF膜上,5%脫脂奶粉TBST室溫封閉1 h;加入相應一抗(Caspase-3及內參抗體GAPDH,1:1 000)4 ℃孵育過夜,TBST洗膜3次;加入HRP標記的相應二抗(1:10 000)室溫搖床孵育1 h,TBST洗膜3次;ECL試劑作用5 min,X光膠片曝光。沖洗并掃描后結果用quality one軟件分析雜交條帶灰度值,以GAPDH水平為內對照。
1.5 統計學處理方法
組間比較采用單因素方差分析。
2 結果
2.1 各組八臂迷宮測試結果
與對照組比,模型組大鼠WME錯誤次數和TE明顯增多,差異有顯著性(P
2.2 各組海馬中caspase-3的表達
如圖2所示。與對照組比,模型組海馬中caspase-3的表達明顯增高,差異有顯著性(3.287±0.682 vs 0.523±0.131,P
3 討論
本實驗模型組大鼠的WME,TE的錯誤次數均明顯增加,而RME增加不明顯??梢姡缘脱醺叨趸寄P痛笫笥锌臻g學習記憶和工作記憶能力受損,且以短時記憶受損為著,與臨床上COPD患者的表現相似。
既往研究[4]發現,施普善具有類似神經生長因子樣作用,可重建皮層微管相關蛋白水平,恢復神經元正常細胞骨架,增加海馬和皮層樹突分支和突觸密度,影響血腦屏障葡萄糖載體的表達,增加大腦葡萄糖運輸,改善神經元的能量代謝,從而發揮其神經營養活性。切除海馬穹隆傘造成學習記憶功能障礙的大鼠,給予施普善治療后,不僅改善記憶能力,而且改善獲得新信息的能力[5]。本實驗顯示,施普善干預組大鼠的TE,WME,RME錯誤次數較模型組明顯減少,認知功能明顯改善,提示1 mL/kg和2.5 mL/kg兩種劑量施普善具有快速改善慢性低氧高二氧化碳引起的認知功能障礙的作用。
動物實驗證實,慢性低氧可導致腦組織結構和功能的損害,細胞凋亡在其中起著重要作用。喻林升等[6]研究發現,與對照組相比,慢性低氧高二氧化碳模型大鼠腦微血管和神經元的超微結構發生改變,神經元變性、壞死和凋亡,海馬神經元的凋亡尤為明顯。徐浩等[7]實驗進一步證明,慢性低氧高二氧化碳可誘發大鼠海馬神經細胞凋亡。已有研究報道,大鼠學習記憶功能受損與海馬神經元的凋亡有密切關系[8]。Barhwal等[9]發現低氧環境中雄性Sprague Dawley大鼠水迷宮測試中工作記憶能力下降,海馬中凋亡蛋白如caspase-3表達明顯增高。本試驗發現模型組大鼠海馬的凋亡因子caspase-3表達顯著增強,而1 mL/kg和2.5 mL/kg兩種劑量施普善干預組大鼠海馬組織中caspase-3表達明顯下降??梢?,慢性低氧高二氧化碳增加了大鼠海馬組織的細胞凋亡,而施普善的干預抑制了大鼠海馬組織的細胞凋亡,從而減輕海馬組織的損害。
Hartbauer等[10]采用低血清(2%胎牛血清)培養基的雞胚端腦神經元細胞應激模型,觀察施普善對神經元活性和程序性細胞死亡的影響,發現施普善治療后的培養基中神經元,凋亡相關的染色質改變顯著減少,證實腦施普善的肽類成分具有抗凋亡作用,從而發揮長期的神經保護效應。Yuan等[11]等研究表明,施普善可能通過調節細胞凋亡級聯反應,尤其通過caspase等因子的激活,從而引起細胞色素C釋放、Apaf-1復合體形成等發揮作用。當然,施普善對于海馬神經元抗凋亡的保護機制目前仍不清楚,有待進一步的研究證實。
參考文獻
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關鍵詞:
新生兒缺血缺氧性腦病 血清 腦脊液
Observation on the Expression Change of Serum and Cerebrospinal Fluid Nerve Function and Interleukins of Newborns with Hypoxic Ischemic Encephalopathy
QIAO Yang-yang
Department of Pediatrics, The First Affiliated Hospital of Henan University of science and Technology;
Abstract:
Objective To investigate the expression change situation of serum and cerebrospinal fluid nerve function and interleukins of newborns with hypoxic ischemic encephalopathy, in order to provide evidence for the diagnosis and treatment of disease.Methods 68 newborns with hypoxic ischemic encephalopathy in Zhumadian central hospital during the time of January 2016 to March 2018 were chosen as the observation group, 68 newborns without encephalopathy at the same time were chosen as the control group.Then the expression levels of serum and cerebrospinal fluid nerve function and interleukins of control group and observation group at different stages were compared, and the expression levels of serum and cerebrospinal fluid nerve function and interleukins of observation group with different severity at acute stage were compared too.Results The expression levels of serum and cerebrospinal fluid nerve function and interleukins of observation group at different stages were all higher than those of control group, the expression levels of serum and cerebrospinal fluid nerve function and interleukins of with different severity at acute stage were compared, the differences were all statistically significant(P<0.05).Conclusion The serum and cerebrospinal fluid nerve function and interleukins of newborns with hypoxic ischemic encephalopathy show the satte of higher expression, and the expression differences of newborns at different stages and with different severity are obvious, so they have guided significance for the diagnosis and treatment of these newborns.
Keyword:
newborns with hypoxic ischemic encephalopathy;
新生兒缺血缺氧性腦病是新生兒的嚴重疾病之一,也是導致新生兒殘疾及死亡的重要疾病之一,其主要為由于宮內窒息及分娩過程中的窒息對腦部的氧供不足而導致,因此患兒的腦損傷表現明顯,主要表現為腦水腫及腦壞死等情況,因此臨床對于本類新生兒進行神經功能狀態相關指標表達的變化研究意義極為重要[1,2]。另外,機體損傷過程中,炎性應激及神經毒性作用等方面也是研究的重點,而白細胞介素中的較多指標在此方面的反應價值較高[3],因此對白細胞介素在本類新生兒中的表達研究也十分必要。本研究就新生兒缺血缺氧性腦病血清及腦脊液神經功能及白細胞介素表達變化情況進行觀察與探究,以疾病的診斷與治療提供參考依據,現將報道如下。
1 資料與方法
1.1 一般資料
選取醫院2016年1月至2018年3月期間治療的68例缺血缺氧性腦病新生兒為觀察組,同時期的68例無腦病新生兒為對照組。對照組中包括男童38例,女童30例;胎齡為(37.0~42.2)周,平均為(40.1±0.8)周;出生體重為(2 512~4 658)g, 平均為(3 045.8±310.7)g。觀察組中包括男童37例,女童31例;胎齡為(37.0~42.1)周,平均為(40.3±0.7)周;出生體重為(2 510~4 668)g, 平均為(3 050.1±312.3)g; 嚴重程度:輕度者28例,中度者22例,重度者18例。兩組新生兒的性別、胎齡與出生體重等方面比較,差異無統計學意義(P>0.05)。兩組新生兒之間具有可比性。
1.2 選取標準
納入標準:胎齡≥37周者;單胎者;家長對研究知情同意者。排除標準:合并其他先天性疾病者;合并其他腦部或神經系統疾病者;合并產傷者;合并感染者;合并代謝性疾病者。
1.3 檢測方法
采集對照組和觀察組的靜脈血標本與腦脊液標本,其中觀察組分別于急性期和恢復期各采集1次,然后將血標本離心,以醫用離心機進行離心,3 000 r/min(離心半徑15 cm)離心5.0 min, 取血清進行檢測。其中神經功能指標為神經元特異性烯醇酶(neuron-specific enolase, NSE)、S100B蛋白(S-100B protein, S100B)及髓鞘堿性蛋白(myelin basic protein, MBP),白細胞介素指標為IL-6、IL-8及IL-1β,分別以上述6項檢測指標對應的酶聯免疫法(ELISA法)試劑盒進行定量檢測。比較兩組不同分期的血清及腦脊液神經功能及白細胞介素表達水平,同時比較觀察組急性期時不同嚴重程度者的血清及腦脊液神經功能及白細胞介素表達水平。
1.4 統計學方法
研究中的數據檢驗軟件為SPSS 23.0,計數資料以χ2檢驗處理,計量資料以t檢驗處理,重復測量的計量資料則以方差分析處理, P<0.05為差異有統計學意義。
2 結 果
2.1 兩組的血清神經功能指標表達比較
觀察組不同分期的血清神經功能指標表達水平均高于對照組,觀察組急性期時不同嚴重程度者的血清神經功能指標表達水平比較,差異具有統計學意義(P<0.05),見表1、2。
表1 兩組血清神經功能指標表達比較 (xˉ±s)
2.2 兩組腦脊液神經功能指標表達比較
觀察組不同分期的腦脊液神經功能指標表達水平均高于對照組,觀察組急性期時不同嚴重程度者的腦脊液神經功能指標表達水平比較,差異有統計學意義(P<0.05),見表3、4。
表2 觀察組中不同嚴重程度者的血清神經功能指標表達比較(±s)
表3 兩組腦脊液神經功能指標表達比較 (xˉ±s)
表4 觀察組中不同嚴重程度者腦脊液神經 功能指標表達比較(xˉ±s)
2.3 兩組的血清白細胞介素表達比較
觀察組不同分期的血清白細胞介素指標表達水平均高于對照組,觀察組急性期時不同嚴重程度者的血清白細胞介素指標表達水平比較,差異具有統計學意義(P<0.05),見表5、6。
表5 兩組血清白細胞介素指標表達比較 (xˉ±s)
2.4 兩組的腦脊液白細胞介素表達比較
觀察組不同分期的腦脊液白細胞介素指標表達水平均高于對照組,觀察組急性期時不同嚴重程度者的腦脊液指標表達水平比較,差異有統計學意義(P<0.05),見表7、8。
表6 觀察組中不同嚴重程度者的血清白細胞 介素指標表達比較(xˉ±s)
表7 兩組腦脊液白細胞介素指標表達比較 (xˉ±s)
表8 觀察組中不同嚴重程度者的腦脊液白細胞 介素指標表達比較(xˉ±s)
3 討 論
新生兒缺血缺氧性腦病是由于胎兒宮內窒息及分娩過程中缺氧而導致的一類腦部損傷,腦組織因缺血缺氧而出現相應的損害,因此與神經功能相關的指標變化一直較為突出[4,5]。臨床中與神經損害指標相關的研究顯示,NSE、S100B及MBP等指標在神經損害發生發展中的變化研究意義較高[6,7],其中NSE是神經元軸突損傷的重要反應指標,S100B則具有神經生長與損傷的重要反應指標,維持神經髓鞘結構和功能的穩定,對神經組織的損傷特異性具有較高的反映價值。當神經系統受損時,神經細胞受損崩解,其被釋放入血的同時,神經修復方面被激活,故表達明顯異常。并且研究指標在神經元壞死后被釋放出來,進入腦脊液中,而血腦屏障及通透性的變化進一步導致其滲透至血液中,因此血液中的表達水平隨之升高[8,9]。另外,白細胞介素指標中的IL-6、IL-8及IL-1β等在機體損傷,包括神經損傷過程中,應激性變化,除與炎性應激反應有關外,其神經毒性及神經元損傷保護機制等也表現突出,且有研究[10~12]認為,其炎性損傷也是其表達檢測的一個重要因素。臨床中關于上述指標在缺血缺氧性腦病新生兒的血清及腦脊液中的變化研究可見,但是對于其在本類新生兒疾病不同時期與嚴重程度者中的變化研究差異較大。
本研究就新生兒缺血缺氧性腦病血清及腦脊液神經功能及白細胞介素表達變化情況進行觀察,結果顯示,缺血缺氧性腦病新生兒在急性期與恢復期血清及腦脊液神經功能及白細胞介素表達水平均高于非腦病新生兒,且急性期時缺血缺氧性腦病新生兒中重度患兒的血清及腦脊液神經功能及白細胞介素表達水平高于輕度及中度患兒,而中度患兒則高于輕度患兒,說明急性期的神經損傷發生后其被釋放入腦脊液中的量增加,而隨著時間的推移[13,14],其表達降低,且神經受損越為嚴重,其釋放量越大,在腦脊液與血液中的表達水平也越高[15,16]。洪菲等[6]及杜逸亭等[12]研究則顯示S100B及NSE變化在此類患兒中較為顯著,呈現升高的趨勢,但是在輕度、中度及重度患兒中呈現差異不顯著,尤其是輕度患兒中的差異不明顯。盛紅玲等[15]研究顯示,IL-6在缺血缺氧性腦病新生兒中呈現動態變化,且變化對治療效果及預后具有一定反映價值,但是其對于不同嚴重程度患兒的差異研究不足,Moon CJ等[16]研究則肯定了其對于嚴重程度的反映價值,與本研究基本一致。
綜上所述,我們認為新生兒缺血缺氧性腦病血清及腦脊液神經功能及白細胞介素呈現高表達狀態,且不同分期與嚴重程度患兒的表達差異明顯,因此認為對缺血缺氧性腦病新生兒進行上述指標的檢測價值較高。
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[中圖分類號] R725.6 [文獻標識碼] A [文章編號] 1674-4721(2015)09(b)-0085-03
Expreesion of endogenous hydrogen sulfide in serum in children with bronchial asthma and its correlativity with respiratory function
TANG Dan1 XIA Wan-min2
1.Department of Pediatrics,the Second Clinical College of Chengdu University of Traditional Chinese Medicine,Chengdu 611137,China;2.Department of Respiration,Women and Children′s Central Hospital of Chengdu City,Chengdu 610017,China
[Abstract] Objective To explore expressive level of endogenous hydrogen sulfide (H2S) in serum in children with bronchial asthma and its correlativity with respiratory function. Methods 50 children with bronchial asthma in acute attack stage from December 2013 to December 2014 in our hospital was selected as the acute attack group,50 children with bronchial asthma in remission stage were selected as the remission group and 50 cases of healthy children were selected as the control group during the same period.Endogenous H2S was detected with sensitive sulphur electrode and respiratory function was detected with lung function diagnostic system in every groups.The expression level of endogenous H2S,the index of forced vital capacity(FVC),forced expiratory volume in 1 second (FEV1%),maximal mid-expiratory flow (MMEF) among three groups was compared respectiveiy,and relativity of H2S with FVC,FEV1% and MMEF was analyzed in acute attack group. Results The level of H2S in the acute attack group and the remission group was lower than that in the control groups,with significant difference(P
[Key words] Endogenous hydrogen sulfide;Bronchial asthma;Forced vital capacity;Forced expiratory volume in 1 second;Maximal mid-expiratory flow
支氣管哮喘是兒童期最常見的呼吸系統疾病之一,全球每年大約有670萬兒童被診斷為哮喘,我國近年來的調查資料也顯示[1],國內小兒哮喘發病率呈上升趨勢,哮喘已成為影響全球兒童健康的主要疾病之一。內源性硫化氫(H2S)是近年來發現的氣體信號分子。有研究顯示[2],在急、慢性肺病發病過程中,H2S可能參與肺功能損傷的過程,在小兒支氣管哮喘的發病過程中,H2S是否參與其肺功能損傷以及對H2S進行檢測是否具有臨床意義目前尚缺乏研究。本研究就支氣管哮喘患兒H2S的表達情況以及其對呼吸功能的影響進行研究,旨在探討H2S在小兒支氣管哮喘發病中的作用。
1 資料與方法
1.1 一般資料
選取2014年1月~2014年12月成都市婦女兒童中心醫院呼吸科收治的50例支氣管哮喘急性發作期患兒作為急性發作組,其中男29例,女21例;年齡6~11歲,平均(8.9±3.2)歲。選取同期的50例支氣管哮喘臨床緩解期患兒作為緩解組,其中男30例,女20例;年齡6~12歲,平均(8.6±2.8)歲。支氣管哮喘急性發作期及臨床緩解期診斷符合中華醫學會兒科學會呼吸學組2008年修訂的小兒支氣管哮喘診斷和防治指南標準。選取同期體檢的正常健康兒童50例作為對照組,其中男28例,女22例;年齡6~12歲,平均(8.4±3.1)歲。排除合并先天性心血管疾病患兒、胸廓病變患兒、免疫系統疾病患兒。3組的性別、年齡等一般資料比較,差異無統計學意義(P>0.05),具有可比性。所有患兒監護人對研究內容知情同意,且經院倫理委員會批準。
1.2 標本采集
各組患兒入選后,次日清晨采集空腹靜脈血1 ml,立即在4℃條件下低溫離心10 min,離心機轉速3000 r/min,獲得血清后深低溫冰箱-70℃密封保存,用于測定H2S含量。
1.3 H2S檢測
內源性H2S檢測采用敏感硫電極法,配制標準S2-溶液,梯度稀釋,敏感硫電極及參比電極(上海雷磁公司)采用去離子水沖洗3次,一同浸入標本中,檢測S2-濃度,依據S2-濃度繪制標準曲線,血清標本解融后,加入抗氧化液后,敏感硫電極及參比電極一同浸入標本中,讀數穩定后記錄,依據標準曲線計算檢測標本內源性H2S濃度。
1.4 呼吸功能檢測
氣道功能檢測采用德國耶格Masterscope Apspro肺功能檢測儀,由專業醫師進行檢測,檢測前對受檢小兒進行指導,采用坐立位進行檢測,重復檢測3次,檢測指標包括用力肺活量(FVC)、第一秒最大呼氣率(FEV1%)、最大呼氣中期流速(MMEF)。
1.5 統計學處理
采用SPSS 17.0統計學軟件對數據進行分析,計量資料以x±s表示,采用t檢驗,組間比較采用SLN-q檢驗,相關性檢驗采用線性相關分析,以P
2 結果
2.1 3組血清H2S水平及呼吸功能的比較
急性發作組和緩解組的血清H2S水平顯著低于對照組,急性發作組的血清H2S水平顯著低于緩解組,差異有統計學意義(P
表1 3組血清H2S水平及呼吸功能的比較(x±s)
與緩解組比較,*P
2.2 急性發作期血清H2S與呼吸功能參數的相關性分析
相關性分析結果顯示,急性發作組的血清H2S水平與FVC呈正相關(r=0.302,P=0.008),H2S水平與FEV1%呈正相關(r=0.349,P=0.004),H2S水平與MMEF水平呈正相關(r=0.446,P=0.001)。
3 討論
支氣管哮喘是兒童期最常見的呼吸系統疾病之一,其發病機制復雜,是由多種炎性細胞和細胞組分共同參與的氣道慢性炎癥,氣道高反應性是發病的中心環節,在感染,接觸物理、化學、生物等刺激因素的作用下發生廣泛多變的可逆性氣道受限,引起急性發作,導致氣道功能急劇下降,進而引起呼吸功能障礙。近年來的研究顯示[4-5],支氣管哮喘患者體內氣體信號分子在疾病進展中具有重要作用,如一氧化氮等,對其進行檢測對于預測患者肺功能和疾病嚴重程度具有重要意義
H2S是近年來發現的新的氣體信號分子,在體內以L-半胱氨酸為底物,在CBS和CSE兩種酶的催化下生成[5-6]。CBS和CSE廣泛分布于體內,尤其在血管組織、肺組織及肝組織等表達水平較高。近年來的研究發現[7-8],H2S在呼吸系統疾病的發病中具有重要作用,其能夠調節氣道平滑肌功能,而且能夠作為炎性介質參與氣道炎癥的發展過程,在支氣管哮喘患者中,其表達水平同炎性細胞在氣道的趨化作用及激活具有密切關系[9-10]。在對支氣管哮喘患兒的檢測中發現,H2S在支氣管哮喘患兒的血清中表達水平明顯降低,而且在急性發作期降低的水平更為明顯;對呼吸功能的檢測也證實,FVC、FEV1%和MMEF水平在支氣管哮喘患兒明顯降低。FVC、FEV1%能夠反映大氣道功能,MMEF能夠反映小氣道功能,提示在支氣管哮喘患兒中,大氣道和小氣道功能同時受損。進一步的研究顯示,在急性發作期的支氣管哮喘患兒中,H2S水平同患兒FVC、FEV1%和MMEF水平呈現正相關,提示H2S表達降低同患兒大氣道及小氣道的功能受損具有密切關系,可能參與氣道功能受損的過程。有研究顯示[11-12],在肺動脈高壓時,H2S能夠參與對氣道平滑肌功能的調節,而且參與氣道組織的重塑過程,而采用外源性H2S,能夠改善氣道平滑肌功能,舒張氣道,改善呼吸功能,因此推測患兒FVC、FEV1%大氣道功能指標的下降,可能與患兒內源性H2S水平下降,對氣道平滑肌調節功能降低有關。此外,有研究顯示[13-15],支氣管哮喘患者內源性硫化氫與氣道炎癥及炎性介質的表達密切相關,內源性H2S能夠抑制氣道吞噬細胞、中性粒細胞等炎癥細胞的表達,同時能夠降低白細胞介素等炎癥因子的表達,從而降低氣道炎癥及其激發的氣道痙攣等,在支氣管哮喘患兒中,小氣道功能的降低可能與H2S水平降低對氣道炎癥抑制作用的下降有關。
H2S在支氣管哮喘患兒血清中的表達水平降低,而且與大氣道及小氣道功能密切相關,提示H2S參與小兒支氣管哮喘呼吸功能受損的過程,H2S水平檢測對小兒支氣管哮喘活動度及病情嚴重程度具有一定的預測價值。
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