時間：2023-01-12 14:42:56
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Abstract Objective： To evaluate the primary function of 3 kinds of hematology analyzers( SYSMEXKX-21N，ABBOTT CD-3200 and BEKMAN-COULTER AC.T 5diff) by examining anticoagulation blood samples from randomized patients. Methods: 3 kinds of hematology analyzers were employed to measure total variation coefficient and the precision of WBC，RBC，HBG and PLT with quality appraisal specimens from Clinical laboratory of the Ministry of Health and anticoagulation blood samples from randomized inpatients . Results: There was no remarkable difference in total variation coefficient of WBC， RBC and HBG from three kinds of Hematology Analyzers. But total variation coefficient of PLT(4.85 %) from CD-3200 is higher than those from others. Conclusion: SYSMEXKX-21N，ABBOTT CD-3200 and BEKMAN-COULTER AC.T 5diff， three kinds of hematology analyzers， can be applied to clinical laboratory determination， with much attention paid to the platelet count of Abbott CD-3200 Hematology Analyzer in clinical practice.
Key words Hematology analyzer; Evaluation; Total coefficient of variation
血常規是臨床工作中常用的一種檢測手段，為臨床診斷和治療提供有價值的參考數據，越來越受到醫療工作者的重視。使用血細胞分析儀進行血常規分析是目前臨床最常用的手段，具有操作簡便、檢測速度快、精確度高的優勢。其檢測值直接指導著臨床工作，是病人進行治療的重要參考指標[1];對疾病的診斷與治療有著重要的意義。而血細胞分析儀的質量直接關系到血細胞數值的準確，為此對我科采用的三種血細胞分析儀進行了比較分析，以期為今后的血細胞分析、檢測、血細胞分析儀的選擇提供一定的參考。
1 材料與方法
1.1 材料 采用120例我院隨機住院病人抗凝全血的標本和衛生部提供的臨檢室血細胞質量評比液，批號：2008221、2008222、2008223、2008224、2008225。每日對評比液測定1次，連續1月，然后對各臺儀器測定結果進行統計學分析。
1.2 儀器類型 SYSMEXKX-21N(日本SYSMEX公司生產)、雅培CD-3200(美國ABBOTT公司生產)、BEKMAN-COULTER AC.T 5diff(美國BEKMAN-COULTER公司生產)。
1.3 試劑 均為廠家生產的配套試劑。
1.4 操作方法 嚴格按照按說明書操作程序進行，測定前用質控校正儀器。
1.5 統計學方法 采用SPSS13.0軟件隨機資料方差分析法，P
2 結果
2.1 總變異系數測定 采用衛生部提供的臨檢室血細胞質量評比液，批號同上。按下列公式求出其總變異系數(TCV)[2)。設標本數為u，各標本測定次數為n，標本間的離均差平方和為SSQ，則：TCV=SSQ/u(n-1)X×100 %。
血細胞分析儀SYSMEXKX-21N、雅培CD-3200、BEKMAN-COULTER AC.T 5diff的總變異系數結果表明：白細胞(WBC)總變異系數在三種儀器分別為1.34 %、1.16 %、1.33 %;紅細胞(RBC)總變異系數分別為0.57 %、0.57 %、0.77 %;血紅蛋白(HBG)總變異系數分別為0.59 %、0.46 %、0.60 %;血小板(PLT)的總變異系數分別為1.29 %、4.85 %、1.65 %。
2.2 標本測定 120例我院隨機住院病人抗凝全血標本，分別于三種血細胞分析儀進行標本檢測，并運用SPSS13.0版隨機資料方差分析(ANOVA)，對檢測結果進行統計學分析，所有實驗數據用均值±標準差(x±s)表示。三種分析儀檢測結果差異無統計學意義(P>0.05)，詳見表1。表1 WBC、PLT、RBC、HBG三種儀器檢測結果(26.54.31±1.17131.2±29.1CD-32001206.33±3.76207.8±122.64.07±1.08133.3±30.3AC.T 5diff1206.65±4.02202.1±131.14.33±1.18128.7±29.6F值0.06120.02170.04090.0320
注：各組均P>0.05
3 討論
SYSMEXKX-21N血細胞分析儀是三分群電阻式血細胞原理，根據細胞體積分布直方圖進行分析和計算。ABBOTT CD-3200是細胞五項分類多角度偏振光散射法(MAPSS)原理，根據標本在水動力聚焦系統的作用下進入檢測部，在激光束的照射下，細胞在多個角度都產生散射光，根據計算將結果分類得到。AC.T 5diff血細胞分析儀運用細胞化學光吸收和體積分布技術(Absorbance cytochemistry and Volume，AcV)進行細胞五項分類[2]。
隨著醫療市場的變革，臨床和患者對檢驗科提出了更高的要求，需要更多的診斷指標，更快的檢測速度，更低的檢測費用，最重要的是更準確的數據，在臨床工作中運用更快速、更準確、重復性好且成本合理的血細胞分析儀是大勢所趨，滿足臨床不同標本檢測要求，而每臺儀器的質量高低，所檢測標本的準確性對臨床工作影響甚大。為此我們對SYSMEXKX-21N、ABBOTT CD-3200、BEKMAN-COULTER AC.T 5diff三種血細胞分析儀測試結果進行分析。
為了保證檢測結果的準確性、權威性，我們采用衛生部提供的臨檢室血細胞質量評比液，計算WBC、RBC、HBG、PLT的總變異系數(TCV)，結果WBC、RBC、HGB總變異系數相差不大;PLT的總變異系數分別為1.29 %、4.85 %、1.65 %。顯示雅培CD-3200血細胞分析儀在血小板(PLT)的測試中，其總變異系數(4.85 %)較大，與已報道文獻(4.92 %)[3]相近，在我們臨床工作和血細胞分析儀的選擇中值得注意。因SYSMEXKX-21N、雅培CD-3200、BEKMAN-COULTER AC.T 5diff相關性、線性、交叉污染率、重復性等已有報道[4-6]，故在此不進行分析。
120例我院隨機住院病人抗凝全血標本，其檢測結果值有高有低，數據具有一定的代表性，可以反映基本的臨床情況;WBC、RBC、HBG、PLT隨機資料方差分析，三種分析儀檢測結果差異無統計學意義。表明SYSMEXKX-21N、ABBOTT CD-3200、BEKMAN-COULTER AC.T 5diff血細胞分析儀均可運用于臨床檢測中，可為臨床服務。
參考文獻
[1] 熊立凡.臨床檢驗基礎[M].3版.北京：人民衛生出版社，2003:80-81.
[2] 徐孝倫，秦育濱，劉雁翔.CD1200血細胞分析儀的應用評價[J].中國熱帶醫學雜志，2006，25(3)：140-142.
[3] Ehrmeyer SS，Laessig RH.Has compliance with CLIA requirements really improved quality in US clinical laboratories[J].Clin Chim Acta，2004，34(6):37-43.
1 材料與方法
1.1 儀器:采用的儀器是日本Sysmex公司生產的KX-21型全自動血細胞分析儀。
1.2 試劑 ① 儀器用的稀釋液、清洗液、溶血劑均由日本Sysmex公司提供。② 顯微鏡計數用的血小板稀釋液按《全國臨床檢驗操作規程》（第二版）配制，冰箱保存。 ③EDTA-K2抗凝劑
1.3 標本來源 選自2008年1月-2008年12月本院門診及住院的血小板結果異常的血標本共207例，另挑選血小板結果正常的血100作對照。
1.4 用EDTA-K2抗凝全血2ml，充分混勻后，2小時內KX-21型全自動血細胞分析儀檢測，取血小板檢測結果異常的血標本，同時用顯微鏡手工計數，另取血小板檢測結果正常的血標本100例同時用顯微鏡手工計數，比較兩法結果。
2 結果
血小板少于100×109／L的血標本121例，為A組；血小板大于300×109／L的血標本86例，為B組；lind板在100~300×109／L的血標本100例，為C組，其兩法測定結果如表1所示。
3 討論
3.1 在Sysmex X-21型全自動血細胞分析儀檢測中，由于紅細胞和血小板的計數是在同一通道中進行，且它們之間僅以體積大小來區別，因此，血小板的計數易受小紅細胞數量或紅細胞碎片的影響，由于血液中小紅細胞的數量遠大于血小板數量，即使有少量的小紅細胞混入血小板計數范圍內，也會對血小板計數造成很大的影響。在血小板直方圖右側下降后繼而抬高呈駝峰樣改變，血片油鏡檢查顯示紅細胞較小或紅細胞碎片較多，兩種方法血小板計數結果比較，差異有統計學意義（P＜0.01）.
3.2 由于血小板的特點易于粘附、聚集。李永紅等認為采血是否順利是造成血小板偏低的的一個重要原因。采血過程中因操作緩慢，穿刺不順且組織受損后，組織凝血因子易混入血標本，混勻不及時等均可促成血小板聚集，從而產生肉眼看不見的小凝塊，這是血細胞分析儀測定血小板結果偏低的常見原因之一。這時血片鏡檢可見血小板聚集成堆。遇到這種情況應重新采血測定。
3.3 某些血液病可造成血小板數真正減少，如骨髓巨核細胞生成不良（如障）；血小板破壞增加（如DIC、IPT）;血小板分布異常（如脾大）等。
3.4 標本放置時間過長、試劑質量、地線、電源和藥物等因素均能對血小板的計數造成一定程度的影響，因此檢測過程中應盡可能排除各種因素的干擾，以使血小板計數可靠，為臨床診斷治療提供有參考意義的數據。
參考文獻
［1］ 趙紅燕.血液細胞儀測定血小板計數結果的分析.上海醫學檢驗雜志，1998.1.3（2）：27
［2］ 陳夢珍。血細胞分析儀測定血小板影響因素的探討。江西醫學學報，2005,23（3）:243-244
［3］ 詹靈凌，秦雪、林發全等。血細胞分析儀計數血小板的影響因素分析與糾正，廣西醫科大學學報，2004.21（5）:763-764。
1.1 每日保養
日常工作完畢，應進行一次“清洗設備”。如果標本量大時，可設置100次自動清洗一次儀器；可在主界面點擊“設置”“自動清洗設備”，當儀器測試到設定的次數，儀器會自動執行清洗設備。
1.2 每周保養
每周進行一次“清洗液浸泡”白細胞池、紅細胞池、DIFF池。
1.3 每月保養 為了避免采樣部件受到污染而干擾計數結果，用蘸有酒精的棉簽擦拭吸樣針及拭子上的污漬。血液的采集為真空采血，樣本在測試時采樣針穿透管蓋時碎的皮塞會出現管道堵塞，要清洗反沖配合灼燒防止堵孔故障。
2 實驗室室內環境與衛生的保持
由于BF-6800血細胞分析儀具有激光流式細胞技術稱鞘流系統：細胞經鞘流稀釋液作用，單個排列在流式通道中央，激光進行細胞的光散及光吸收的測定，分析細胞的內部結構，迪瑞DIFF通道實現了對大量細胞進行依次、準確、快速的測定，其獨特的設計能夠保證每個細胞依次通過鞘流微孔，檢測細胞體積的測定，在200μs內細胞內容物的分析，此檢測裝置能夠有效防止氣泡及靜電的干擾，保證獲得高精度的白細胞的分類結果。BF-6800血細胞分析儀的這種分析原理和特點決定了其對實驗室環境和衛生條件要求較高，否則將對實驗結果造成不良影響。為此，BF-6800血細胞分析儀所在實驗室應保持清潔，地面無塵，無雜物，所有的桌椅工作臺面應用消毒液擦拭，并且室溫保持在15℃～30℃之間。
doi:10.3969/j.issn.1674-4985.2012.03.096
SYSMEX KX -21是日本東亞公司生產的三分類血液分析儀，比起以往的手工法血細胞分析，這種血液細胞分析儀性能優越，每小時可以檢測60個標本，WBC線性范圍：0～99×109/L。每個標本可提供18個分析參數以及細胞直方圖[1]，極大地提高了臨床血液學檢驗的質量和工作效率，同時給臨床鑒別診斷提供了足夠的指標。但由于分類計數原理等因素，對于血液病的診斷只能起到過篩作用?，F將比對結果報告如下。
1 儀器與方法
1.1 儀器 （1）日本原裝SYSMEX KX-21自動全血細胞分析儀，配套原裝試劑。（2）對照儀器：SYSMEX XS-1000i全血細胞分析儀以及配套原裝試劑。（3）OLYMPUS顯微鏡：白細胞分類計數。（4）標本：EDTA-K2抗凝血。（5）質控品：原裝配套質控品。
1.2 方法 按正常開機方式開機，預熱穩定后，依據ICSH推薦方法[2]將原裝質控品和新制備的新鮮抗凝血標本在3 h內進行兩臺全血細胞分析儀分別上機測試[3]。
1.3 統計學處理 使用Excel軟件進行數據處理。
2 評價指標與結果分析
2.1 精密度 依據ICSH推薦的血液分析儀評價方案進行精密度分析，取EDTA-K2抗凝新鮮全血樣本1份用SYSMEX KX-21和SYSMEX XS-1000i血液分析儀做全血模式分別測量11次，取2～10次（第1次棄去）測定值，獲得5項血細胞參數，分別計算精密度（CV值）。見表1。
【摘要】 目的 目前在縣以下地區使用三分類全血細胞分析儀的醫院很多，現就校對后的SYSMEX KX-21全血細胞分析儀其中WBC總數進行主要的性能評價。方法 對SYSMEX KX-21分別進行精密度、總重復性、線性范圍、儀器與人工白細胞分類比較，并與SYSMEX XS-1000i全血細胞分析儀作可比性測定。結果 精密度：RBC、HGB、WBC、PLT、HCT的CV均
【關鍵詞】 全血細胞分析儀精密度； 總重復性； 線性范圍； 分類計數
doi:10.3969/j.issn.1674-4985.2012.03.096
SYSMEX KX -21是日本東亞公司生產的三分類血液分析儀，比起以往的手工法血細胞分析，這種血液細胞分析儀性能優越，每小時可以檢測60個標本，WBC線性范圍：0～99×109/L。每個標本可提供18個分析參數以及細胞直方圖[1]，極大地提高了臨床血液學檢驗的質量和工作效率，同時給臨床鑒別診斷提供了足夠的指標。但由于分類計數原理等因素，對于血液病的診斷只能起到過篩作用?，F將比對結果報告如下。
1 儀器與方法
1.1 儀器 （1）日本原裝SYSMEX KX-21自動全血細胞分析儀，配套原裝試劑。（2）對照儀器：SYSMEX XS-1000i全血細胞分析儀以及配套原裝試劑。（3）OLYMPUS顯微鏡：白細胞分類計數。（4）標本：EDTA-K2抗凝血。（5）質控品：原裝配套質控品。
1.2 方法 按正常開機方式開機，預熱穩定后，依據ICSH推薦方法[2]將原裝質控品和新制備的新鮮抗凝血標本在3 h內進行兩臺全血細胞分析儀分別上機測試[3]。
1.3 統計學處理 使用Excel軟件進行數據處理。
2 評價指標與結果分析
2.1 精密度 依據ICSH推薦的血液分析儀評價方案進行精密度分析，取EDTA-K2抗凝新鮮全血樣本1份用SYSMEX KX-21和SYSMEX XS-1000i血液分析儀做全血模式分別測量11次，取2～10次（第1次棄去）測定值，獲得5項血細胞參數，分別計算精密度（CV值）。
2.2 總重復性 取EDTA-K2抗凝新鮮全血樣本1份標本（與精密度測定為同一標本），按正常操作在SYSMEX KX-21分析儀上機連續測定10次，然后在室溫下放置1 h、3 h，分別再連續同樣的測試。將均值列表計算結果。見表2。
2.3 線性范圍 取WBC在線性范圍內標本1份，WBC超線性范圍1份分別上機檢測，線性范圍內標本再用稀釋液將其80%、60%、40%、20%分別測定2次，SYSMEX KX-21血液分析儀的線性相關系數分別為WBC 0.993，RBC 0.990，HGB 0.999，HCT 0.989，PLT 0.991。WBC在線性范圍外的分別1∶100、1∶200、1∶300倍稀釋分別測定3次，其WBC相關系數為0.844。
2.4 儀器白細胞分類和人工分類比較 選50份標本，其中WBC總數>100×109/L3例，其中WBC總數
3 討論
SYSMEX KX-21是日本東亞公司生產的三分類血液分析儀，其基本性能測試結果表明：計數精密度高，RBC、HGB、WBC、PLT、HCT的CV均
SYSMEX KX-21儀器在線性范圍內的計數結果準確、可靠，但此種儀器的白細胞分類，只能起到過篩作用。該儀器是一種基層較理想的全血細胞分析儀。
參 考 文 獻
［1］ 戴澤寧,金紅,謝鑫友.血細胞分析儀應用中鏡檢標本篩選條件的探討［J］.檢驗醫學,2004,19（4）:366-367.
［2］ 李影林.中華醫學檢驗全書［M］.北京:人民衛生出版社,1996:276-293.
1.材料與方法
1.1儀器
深圳邁瑞公司生產的BC-5500血液分析儀。
1.2試劑
BC-5500專用配套試劑（溶血劑、稀釋液、清洗液）。
1.3其他
校準物與質控液，全血校準液（由深圳邁瑞公司提供），全血質控物（由青海省臨檢中心提供）。
1.4方法
1.4.1按儀器維護保養要求，對儀器進行全面的維護，經常保持微孔的清潔，以保證BC-500在正常條件下批內重復測定變異數（RCV）在規定范圍內，每次實驗前血液分析儀用全血校準物校準儀器后，嚴格按儀器操作步驟進行測試。
1.4.2用含EDTA-K抗凝管，采集120例健康人靜脈血2ml，輕輕混勻后，立即在血液分析儀BC-500上測定3次，然后分別于5、10、20、30、60min各測3次，并用全血質控物質同步監測儀器，分別計算其均值，按時間分組，分別利用多樣本均數間顯著性檢驗與配對t檢驗進行統計學分析。
2.結果
2.1標本自身因素的影響
由于采血過程不順利，過分擠壓或未充分與抗凝劑混勻等因素人為造成血小板的凝集，是造成血小板計數不準確的首要原因。
2.2標本放置時間的影響
WBC在采血后0―30min內隨時間延長其數量不規則遞減，組與組之間差異有顯著性（P
2.3血小板聚集分可逆聚集和不可逆聚集
當新鮮靜脈血加入EDTA―K2：抗凝瓶混勻后血小板即發生聚集反應，此時立即進行全血細胞測定，可逆聚集的血小板還沒有解聚，會造成全血細胞分析結果誤差。白細胞不同程度假性升高，直方圖的小細胞群會出現一個很高的截距，血小板不同程度的假性降低，直方圖就會出現鋸齒波或尾部抬高。但抗凝血靜置30min后，再進行測定，即可消除上述假性結果。100例靜脈血放置不同時間各參數的均值比較可看出60min與30min測定值差異無顯著性（P>0.05），30min與20min測定值差異有顯著性（P
3.討論
BC-5500型血細胞分析儀計數血小板的原理是直接計數2―20fl范圍內的血小板，根據正態分布理論，用電子擬合線擬合0―70fl范圍內的血小板數量作最終報告結果，具有雙曲線的血小板直方圖是它的標準結果，只具有單曲線的血小板直方圖，只要成正態對數分布，曲線在20fl范圍內有明顯的主峰，其儀器計數法與顯微鏡計數法較一致，與臨床基本吻合[1]。血小板膜分內膜和外膜，外膜圍繞胞質形成漿膜，并延伸到胞質內部并折疊形成開放微小管系統，它是血小板攝取和釋放的通道。質膜內側附著許多微絲，其主要成分為肌動蛋白的肌凝蛋白，與微管環周束共同支持偽足的形成。當新鮮靜脈血離體加入EDTA―K抗凝瓶內，管壁周圍的全血外環境及溫度發生改變，使血小板形態發生變化[2]。由于血小板發生聚集，在阻抗法做血小板計數時，聚集體所產生的脈沖大于儀器預設的單一血小板脈沖值，因而就不會計數血小板結果內，從而使血小板數量減少。
故血小板聚集的原因可能有：
（1）抗凝劑EDTA―K2：能使血小板形態發生改變。由盤狀變成球狀，從而使可逆聚集血小板的偽足回縮到血小板胞質內，血小板相互纏繞的偽足就可解除。
（2）可逆聚集的血小板由于形態有所改變及偽足的形成，增大了血小板表面積，其表面負電荷相應增大，同性電荷的排斥力也就相應增強。
（3）溫度升高，分子運動速度越快，溫度對可逆聚集血小板解聚的影響尤其在用預稀釋方法作全血細胞測定中更為明顯。
（4）溶血劑的加入量、溶血時間和儀器檢測的清潔度有關，因此必須保持微孔的清潔，才能保證儀器測定的可靠性。原因：經EDTA―K2抗凝的全血標本，在采血30min后進行全血細胞分析，可提高結果的準確性。但需排除化療、血小板減少性紫癜、白血病及造血系統異常等疾病。血小板形態不規則且細小，任何灰塵和斑點都會影響計數。反復使用的測定管極易引起雜質吸附，造成殘余溶血素污染，從而引起PLT計數偏高。血細胞分析儀檢測血小板的準確性取決于很多因素，環境、溫度、抗凝劑混合情況以及所有影響電脈沖大小及數目的因素都會影響正確計數。因此，只有正確操作，排除各種干擾，才能使血小板的計數結果準確靠。
1．1方法
1．1．1儀器精密度測定取正常EDTA-K2抗凝新鮮全血一份，分別在每一臺儀器上連續重復測定20次，計算RBC、WBC、HGB、HCT、PLT的均值、標準差(SD)、變異系數(CV)。
1．1．2比對試驗以CD-3700血細胞分析儀為參考比對儀器(X)。每日檢測8份血清標本，將新鮮抗凝全血標本按18，81的順序分別在三臺血細胞分析儀上進行連續測定，2h內完成。連續測定5d，記錄檢測結果。
1．2統計學處理采用MicrosoftExcel2003和SPSS16．0進行數據處理和相關性統計分析，以P＜0．05為差異有統計學意義，并給出線性回歸方程Y=bX+a。精密度評價根據美國臨床實驗室改進方案(CLIA＇88)允許誤差的1/4作為允許誤差，各比對項目的CV值必須滿足:RBC≤1．5%、WBC≤3．5%、HGB≤1．75%、HCT≤1．5%、PLT≤6．25%。以美國臨床實驗室改進方案(CLIA''''88)能力比對檢驗質量要求范圍的1/2作為各項目檢測結果的允許誤差:RBC≤3．0%、WBC≤7．0%、HGB≤3．5%、HCT≤3．0%、PLT≤12．5%［3］。
2結果
2．1精密度評價RBC、WBC、HGB、HCT、PLT五個檢測項目在三臺血細胞分析儀上精密度均符合要求。見表1。
2．2相關性和回歸分析試驗儀器(Y)與比對儀器(X)測定結果相關性見表2。
2．3偏倚評估將各檢測項目的靶值代入相應的回歸方程，計算比較方法與試驗方法測定結果的預期偏倚和相對偏倚，以CLIA''''88能力比對檢驗質量要求范圍的1/2為臨床可接受性能的判斷標準，結果見表3。
3討論
隨著檢驗醫學的發展，越來越多的臨床實驗室引進不同檢測儀器，構建多種檢測系統，以提高患者標本的檢測速度。臨床實驗室內同時擁有2種或2種以上相同或不同的檢測系統已經十分普遍。為確保不同儀器檢測同一檢測項目的結果具有一致性，CAP認證標準中要求，試驗室每年需要進行至少2次儀器比對［4］。另外，考慮到實驗成本的因素，每個實驗室每年參加室間質量評價的儀器往往選擇其中一臺常用儀器，其他儀器做好室內質量控制，通過與參加室間質評的儀器做比對，以保證同一標本在不同系統檢測時得到具有可比性的結果。
1 資料與方法
1.1 臨床資料 2006—2007年用五分類血細胞分析儀對門診、病房約6萬例進行查血液常規檢查，發現有異常的做顯微鏡復查，發現血液系統疾病136 例。其中急性非淋巴細胞白血病23 例，急性淋巴細胞白血病8 例，慢性粒細胞白血病4 例，多發性骨髓瘤4 例，巨幼細胞性貧血35 例，缺鐵型貧血32 例，骨髓增殖性疾病25 例，再生障礙性貧血5 例，他們均為初診患者，并經骨髓形態學或經上級醫院檢查證實。其中男63 例，女73 例，年齡15～81歲。
1.2 檢驗方法
1.2.1 儀器 COULTER——HmX血細胞分析儀及配套試劑，全血質控液COULTER公司提供。
1.2.2 方法 常規消毒法采集靜脈血2 mL(嚴格按儀器操作規程進行，每天隨機質控)。對白細胞數量及直方圖異常者涂片做瑞-吉染色，計數分類200個白細胞，并作形態觀察。
2 結
果
結果見表1。表1 136例血液病的種類和構成比血液病名稱ANLLALLCMLMMMgAIDAMDSAA病例數
3 討
論
五分類自動血液分析儀具有方便、高精度。它是在一個流式通道內，對單個白細胞進行直接、同時、三重測量，然后再進行三維分析。顯微鏡下觀察的細胞形態是細胞的內部結構，包括細胞質的顏色、細胞質內有無顆粒及顆粒的性質、核的形狀、有無核仁等。異常白細胞直方圖粗略地顯示各類白細胞細胞比例或有無明顯異常細胞出現，手工顯微鏡復查時注意這些變化的真正病理意義，而不能僅從白細胞直方圖的變化來進行臨床診斷。堅決反對單位使用血細胞分析儀后，就一律不再作鏡下復查和分類的錯誤傾向［1］。血液分析儀只對典型的血液病作出提示診斷，以便作進一步的檢查。如果對儀器的計數原理，異常報警掌握不夠，特別是用不配套的稀釋液、溶血素，造成直方圖不典型，往往忽視血涂片檢查，造成誤診和漏診，而血細胞的質和量異常恰恰是血液病的重要表現。所以，對一些直方圖有異常的患者，一定要鏡檢。本文報道的136 例血液系統疾病，是從約6 萬例標本中篩查出來的，并結合手工復檢，經骨髓細胞形態學證實。其中血液惡性疾病占陽性比例28.5%，各種類型的貧血占49.3%。骨髓增殖性疾病占18.4%，再障占3.8%，各種貧血接近占一半，可能與人們的飲食習慣、疾病的本身有關。惡性白血病的比例也很大，可能與飲食、居住環境、工作環境、自身免疫有很大關系。但如若大意，定會漏診和誤診。血液病特別是白血病的診斷主要依靠MICM(形態學、免疫學、細胞遺傳學、分子生物學)［2］。但在基層工作中，血細胞分析儀加上形態學復檢和重要的臨床癥狀(出血發熱、貧血)，可以為血液系統疾病患者做出初步的診斷，使患者得到及時的治療。
doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2012.28.043
隨著科學技術的高速發展，血細胞分析儀在臨床上得到了普遍應用。其速度快、易操作、功能強為臨床提供了不同層次有效的血細胞參數，為血細胞計數的篩查方法。但由于其檢測原理的局限性，使結果易受多種因素影響，血小板結果偏高是常見的問題。SYSMEX XT-1800i血細胞分析儀應用庫爾特原理，采用電阻抗法進行細胞計數。當體積大小不等的血細胞通過儀器計數小孔時，引起小孔內、外電流和電壓的變化，形成與血細胞數量相當，體積大小相應的脈沖變化，從而間接地區分出血細胞。血小板與紅細胞計數區域常有交叉，體積偏小的紅細胞其脈沖信號可能被視為血小板信號，造成血小板計數假性增高[1]。為了解電阻抗法小紅細胞對血小板計數的影響，筆者按紅細胞平均體積的大小分類，比較電阻抗法與顯微鏡法血小板計數的差異，現將結果報告如下。
1 資料與方法
1.1 一般資料 選擇2011年5-11月本院門診及住院的180例患者。按MCV大小進行分組，第一組MCV 70~81.9 fl，第二組MCV 60~69.9 fl，第三組MCV
1.2 儀器與試劑 血細胞分析儀：采用日本SYSMEX XT1800i全自動分析儀及原裝配套試劑與質控物。手工法：雙目顯微鏡，改良牛鮑計數板，試劑為1%草酸銨稀釋液，按全國臨床檢驗技術操作規程第3版配置[2]。
1.3 檢測方法 在空腹狀態下，抽取患者靜脈血2 ml，加入含EDTA-K2抗凝劑的真空試管中，輕輕搖勻，在2 h內檢測完畢。檢測標本前，每日用儀器原裝質控物做質控，保證儀器在控的前提下檢測患者標本。儀器檢測標本的同時進行顯微鏡計數，用毛細吸管抽取20 μl靜脈血加入0.38 ml草酸銨稀釋液中，搖勻后滴入計數板，室溫靜置后，經有經驗的工作人員計數兩次取平均值。
1.4 統計學處理 采用SPSS 10.0軟件進行統計學處理，計量資料以(x±s)表示，采用t檢驗，以P
2 結果
MCV 70~81.9 fl時，儀器法與手工法比較差異無統計學意義(P>0.05)。MCV 60~69.9 fl時，儀器法與手工法比較差異有統計學意義(P
3 討論
血小板檢測是研究凝血與止血功能的重要指標之一，也是手術前必要檢查的項目。臨床上很多疾病都能引起血小板的增高，如慢性粒細胞性白血病、原發性血小板增多癥、真性紅細胞增多癥。一些疾病還可引起血小板反應性增高，如急性化膿性感染、大出血、急性溶血、腫瘤等。因此，血小板檢測結果的可靠性至關重要。
SYSMEX XT-1800i全自動血細胞分析儀采用電阻抗原理，根據顆粒的大小來區別細胞，與顆粒的性質無關。紅細胞和血小板同在一個檢測通道，儀器把2~30 fl范圍的細胞判定為血小板，而將25~250 fl范圍的細胞判定為紅細胞，因而紅細胞與血小板之間存在計數的交叉區域。當紅細胞體積正常時，與血小板體積懸殊很大，不會干擾血小板計數。紅細胞體積偏小時，儀器會將小紅細胞誤認為血小板，使血小板假性升高。而且MCV越小，對血小板計數影響越大，血小板計數假性增高就越多[3]。臨床上最常見的小細胞性貧血有缺鐵性貧血、地中海性貧血。紅細胞分布寬度(RDW)是紅細胞體積異質性參數，反應紅細胞體積大小不一致的程度。MCV 70~81.9 fl，RDW異常時，小紅細胞比例增加，血小板假性升高。當患者標本中的小紅細胞增多時，血小板相應參數PDW、P-LCR、PCT不出結果，儀器報警提示血小板分布異常，直方圖右側抬高，不與橫坐標重合甚至平行，呈拖尾狀，這是因為小紅細胞的脈沖被誤認為血小板，而體積又比血小板大的原因[4]。
綜上所述，電阻抗法檢測血小板時，容易受小紅細胞干擾。在實際操作過程中，檢驗人員應掌握儀器的原理，觀察圖形及報警，出現MCV小于70 fl或MCV在70~81.9 fl之間而RDW大于14.5%時，應及時顯微鏡復檢，減少血小板計數誤差，提高檢驗結果的準確性和可靠性。
參考文獻
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doi：10.3969/j.issn.1004-7484（s）.2013.09.769 文章編號：1004-7484（2013）-09-5415-02
腦脊液細胞學檢查一直以來采用牛鮑氏計數板手工法進行紅細胞計數、白細胞計數和分類，該方法要求操作者具有豐富的操作經驗，易受個人主觀因素影響，操作繁瑣耗時，無法滿足臨床大批量標本的要求，而且結果的可靠性和重復性低，影響臨床醫師對患者真實病情的分析。本實驗利用XT-4000i全自動血細胞分析儀在一般血液分析模式的基礎上增加的體液分析模式對154份腦脊液標本進行紅細胞計數、白細胞計數和白細胞分類檢測，并與手工法檢測結果進行相關性分析，以探討XT-4000i全自動血細胞分析儀在腦脊液標本檢測中的應用。
1 資料與方法
1.1 標本來源 本研究，腦脊液標本154份均來自住院病人，標本采集完畢后及時送檢，以防細菌滋生和細胞自溶等現象，也為避免標本凝固，細胞學檢測項目統一使用EDTA-K2抗凝真空采血管采集標本，同時采集血常規標本，跟腦脊液標本逐一對應，也共計154份。
1.2 儀器與試劑 SysmexXT-4000i血細胞分析儀及原裝配套試劑、Sysmex質控品，OLYMPUSCX22顯微鏡，標準牛鮑氏計數板。
1.3 方法
1.3.1 XT-4000i血細胞分析儀檢測 每天先使用Sysmex質控品高、中、低樣品檢測XT-4000i血細胞分析儀質控是否在控，儀器在控的情況下先對血常規標本進行檢測，然后進入體液檢測模式，待空白檢測合格后取已使用EDTA-K2抗凝混勻的腦脊液標本按照XT-4000i全自動血細胞分析儀說明檢測腦脊液標本，分別得出紅細胞計數、白細胞計數和白細胞分類，白細胞計數須扣除采集腦脊液因穿插出血增加的白細胞數=外周血白細胞數×腦脊液紅細胞數/外周血紅細胞數。
1.3.2 手工法檢測 按照第三版《全國臨床檢驗操作規程》有關腦脊液的檢查方法，使用標準牛鮑氏計數板計數腦脊液標本的紅細胞數、白細胞數和白細胞分類，并扣除采集腦脊液因穿插出血增加的白細胞數=外周血白細胞數×腦脊液紅細胞數/外周血紅細胞數。
1.4 統計學分析 采用SPSS10.0統計學軟件分別計算兩種檢測方法得出的紅細胞計數、白細胞計數、白細胞分類的相關系數r。
2 結果
采用SPSS10.0統計軟件對兩種方法檢測154份腦脊液標本進行比較，其結果紅細胞計數、白細胞計數和白細胞分類的相關性r分別為0.969、0.972、0.941，都具有較高的相關性。
3 討論
Clinical Comparative Study on Abnormal Analysis Results of Blood Cell Analyzer and Blood Smear/YU Wen-hui，LIU Feng-ling，XIA Jun.//Medical Innovation of China，2016，13（18）：058-061
【Abstract】 Objective：The specimen smears were stained by the blood cell analyzer，and the number，form and classification of blood cells were compared to those results of blood cell analyzer to verify if the results of the blood cell analyzer are reliable and accurate.Method：Two thousand specimens of patients showing abnormal blood cell analysis results via the blood cell analyzer admitted from June 2013 to June 2015 were subjected to research and analysis，and such results were subject to analysis and comparison to results determined via blood smear microscope.Result：The number of platelets of patients were higher than that of normal specimen smears，being the same to results of the blood cell analyzer，but the number of partial platelets didn’t coincided with normally lower part，pseudo thrombocytopenia resulted from the aggregation of platelets must be subjected to blood smear detection.The results of RBC volume tested via blood smear microscope were the same to those via blood cell analyzer.Abnormal WBC specimens classified or unclassified were required to subject to blood smear microscopy.Conclusion：Testing results by using of blood cell analyzer are abnormal and not completely reliable，only the comparison of smear staining microscope test results can the disadvantage of the blood cell analyzer failing to correctly identify abnormal cell compositions，accurate and scientific results are obtained finally，decreasing the misdiagnosis probability of patients.
【Key words】 Blood cell analyzer； Blood smear； Clinical comparison
First-author’s address：Liujiang County People’s Hospital，Liujiang 545100，China
doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2016.18.017
隨著醫院血細胞分析的標本逐漸增多，與傳統手工檢測方法比較，血細胞分析儀由于其操作方便、高效、提供參數較多及準確，并能夠對某些血液性疾病診斷與臨床療效提供依據，因此被臨床廣泛應用。最后出現檢驗人員對血細胞分析儀太過依賴，從而對血涂片鏡檢測的忽視，發生誤診、漏診的現象，對患者診斷治療造成了延誤[1-4]。筆者為探究血細胞分析儀分析結果異常和血涂片進行對比血涂片鏡檢測的重要性，選取本院2000例涂片標本作為研究資料，取得較好效果，現報道如下。
1 資料與方法
1.1 一般資料 將本院2013年6月-2015年6月接收的通過血細胞分析儀實施血細胞分析結果出現異常的患者標本2000例進行研究分析，其中男性標本1100例，女性標本900例，年齡6～67歲，平均（42.62±1.64）歲。貧血標本1200例，即女性血紅蛋白不超過110 g/L，男性不超過120g/L，白細胞總數異常、散點圖異常、儀器不分類、分類顯著異常標本350例，血小板的數量有異標本450例。
1.2 檢測儀器 儀器：希森美康XN-1000，試劑：XN-1000配套原裝試劑，質控品：煙臺卓越，顯微鏡：OLYMPUS（型號：BX51）。
1.3 方法 血細胞分析儀檢測出現結果異常的標本均與將其血涂片鏡檢測結果選出兩組進行對比分析[5]。其中血細胞涂片制定嚴格按《全國臨床檢驗操作規程》中相關操作規程實行。
2 結果
2.1 貧血患者標本 其中大細胞性貧血150例，小細胞低色素性貧血600例，正細胞性貧血450例。大細胞性貧血：紅細胞的總數與正常值相比明顯較低，其體積大部分在105～130 fL；其中男女比例無差異，部分患者的血小板數量比正常值較低，其白細胞總數正?；蛘咻^低，在分類之中，其中性分葉核分葉較多。小細胞低色素性貧血：紅細胞體積為55～75 fL與正常值82～95 fL比較明顯較低，其紅細胞數量正常。小細胞低色素性貧血主要的人群多為幼兒與中青年，其中幼兒330例，中青年男性150例，女性120例。白細胞分類與總數不定，血小板的數量未減少，大部分有增高。大細胞性貧血150例與小細胞低色素性貧血，其紅細胞體積與其血涂片鏡下檢查的紅細胞體積均無明顯差異，可不進行涂片鏡下檢測。正細胞性貧血：450例正細胞性貧血患者標本中，其紅細胞的數量均較少，體積正常，白細胞分類與總數正常，但血小板的數量未定，涂片染色鏡檢測發現，紅細胞3例緡錢狀排列，通過臨床醫師實施骨髓穿刺檢測明確診斷為多發性骨髓瘤。因此對未明原因的貧血標本需通過血涂片鏡下檢測，對其紅細胞形態鏡下觀察。
2.2 白細胞分類、總數異常 在2000例標本中，其中350例白細胞分類、總數異常。白細胞總計數
6歲患兒1例：其臨床主要表現為上呼吸道感染、發熱、肺炎支原體檢測呈陽性，紅細胞體積較小、數量正常，Hb 100 g/L，血小板100×109/L，淋巴比例約占89%左右，白細胞總數處于正常值，通過血涂片檢測大部分是幼稚細胞，經骨髓穿刺診斷為急性淋巴白血??；1例為中年女性：其血小板數量較低，有輕度貧血，白細胞的總數分類正常，單核細胞有42%，骨髓穿刺明確診斷為急性骨髓白血?。黄渲?例血細胞分析儀未分類，白細胞總數降低，有輕度的貧血出現，其血小板的數量明顯減少，經骨髓穿刺檢測，明確診斷為白血病。
2.3 血小板異常 450例血小板數量異常標本中，血細胞儀器分析顯示，血小板的總數均低于80×109/L，其中直方圖有所異常為300例，血涂片鏡檢測的結果顯示有50例血小板聚集，散點圖表現為聚集者43例，散點圖7例表現正常，患者均采集末梢血，利用血小板稀釋液進行稀釋，與顯微鏡給予計數，顯示血小板數量正常。因此應用血細胞分析儀分析結果即使散點圖正常、血小板數量與正常值對比較低，血涂片鏡下檢測也顯示有聚集標本，無論散點圖正常與否，只要血小板數量偏低，則需要給予涂片鏡檢。剩余的標本涂片鏡檢顯示結果均為血小板減少，與血細胞分析儀分析的結果一致。血細胞分析顯示血小板總數>500×109/L有150例，與涂片鏡檢顯示結果符合，可不實施血涂片鏡檢分析。
3 討論
隨著近年來醫療技術的不斷發展，在血液檢測中血細胞分析儀已經成為常規且必不可少的檢測方法，但由于很多疾病在發生與發展的過程中會造成白細胞數量與形態的改善，因此自動化分析技術在白細胞數據計算中，其準確性相對較差，并且血細胞分析儀對異常細胞的形態無法進行判斷，如核左移、核右移、中毒顆粒等，且對異常細胞、周期細胞也無法進行判斷，如幼稚白細胞等[6-12]。在血小板的檢測中，血細胞分析儀還會被血小板自身功能狀況所影響，對血小板凝聚出現時，血細胞分析儀還會將血小板判斷成其他的細胞種類，影響正確的檢驗結果[12-14]。所以，臨床檢驗工作中，血細胞分析儀并不能將血涂片鏡檢測全部代替，少數血液標本通過血細胞分析儀的檢測后，再次給予血涂片分析十分必要[15-17]。
通過以上對比分析顯示，在貧血標本中大細胞性貧血、小細胞低色素性貧血，通過血涂片鏡檢后其結果與血細胞分析儀分析的結果相同，其中大細胞性貧血150例，小細胞低色素性貧血600例（主要的人群多為幼兒與中青年，其中幼兒330例，中青年男性150例，女性120例），正細胞性貧血450例。未有不相符的情況發生，貧血標本中均屬于良性貧血，可將血涂片鏡下檢測省略[17]。其正細胞性貧血，涂片鏡檢顯示可見紅細胞3例緡錢狀排列，合并有不同程度的血小板減少，通過骨髓穿刺明確確診多發性骨髓瘤，因此正細胞性貧血需進行血涂片鏡檢測，對紅細胞的排列與形態進行觀察。關于血小板數量減少，450例血小板數量異常標本中，血細胞儀器分析顯示，血小板的總數均低于80×109/L，其中直方圖有所異常為300例，血涂片鏡檢測的結果顯示有50例血小板聚集，散點圖表現為聚集者43例，散點圖7例表現正常。少數血小板減少是假性減少，應用血涂片鏡檢可發現血小板聚集的現象，將末梢血重新采集實施血小板計數，最后結果顯示正常，散點圖顯示正常血小板數量比正常值較低，但血涂片鏡檢測也能夠發現存在聚集的情況，因此不論散點圖正常與否只要血小板數量低，均必須給予血涂片鏡檢測。導致假性血小板的減少原因較多，其中包括抗凝劑量與質，混勻充分與否、采血通暢與否、采血的量等，造成聚集情況占一定的比例，因此在血小板比正常值低的情況下必須給予血涂片鏡檢測。對于白細胞總數不高、或低于正常值或明顯高于正常值的標本，本次研究中，2000例標本中，其中350例白細胞分類、總數異常。白細胞計數
綜上所述，應用血細胞分析儀對標本進行分析，雖然能夠準確而又快速地對細胞進行計數，但其檢測結果在異常情況下并不完全可靠，需要給予血涂片復檢，與其比較分析，結合患者具體的臨床表現，再參照復檢血涂片的結果進行準確分析。通過血涂片鏡檢可對血細胞分析儀分析的結果是否可靠、準確進行驗證，可避免不必要的誤診、漏診等情況，確保為醫師提供更準確、安全的分析結果。
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1 環境溫度的干擾
實驗室環境溫度決定了儀器、試劑以及標本的溫度,計數時稀釋液的溫度應為( 22±4) ℃ 。當稀釋液的溫度低時,紅細胞溶解后的膜碎片聚集, 粒度分布曲線的平坦段變短,當試劑溫度低于18 ℃時需加熱使用。有些溶血劑在低溫時可出現結晶, 并不容易被察覺,很難引起操作者的注意,但在顯微鏡下, 可見到其中懸浮著許多細小的結晶,這樣的溶血劑滴入血液中,白細胞計數必然增高。我們基層醫院地處北方，這種情況在實際操作中時有發生,尤其是在冬季。血細胞分析儀分析不出稀釋液在低溫時產生的聚合結晶，常使分析結果出現異常。在臨床中可以將溶血劑或稀釋液進行加熱，以升高溫度, 消除結晶。還可加入適量的非離子表面活性劑,從而減輕溶血劑結晶的發生。低溫也易激活血小板,引起血小板凝集, 造成血小板計數假性降低。
2 抗凝劑的影響
ABX60血液細胞分析儀檢測EDTA-K2 含量不同的靜脈血,臨床結果表明EDTA-K2 有效抗凝劑量在1.5~ 6. 0mg/ mL時,不影響分析結果。自制抗凝瓶EDTA-K2 用量1.5~ 2.2mg/ mL為宜。低于1. 5mg/mL時抗凝效果欠佳, 出現肉眼不易發現的凝集,可表現為血小板降低。在采血時，一般2mL的采血量,其誤差在± 0. 5mL范圍內的話比較適宜。血量過多或過少都會對結果造成影響,血量過多抗凝不充分,會出現凝塊;血量過少, 會導致抗凝劑過濃。筆者分析認為，由于血細胞遇抗凝劑先有一個短暫的(1~ 2min) 收縮過程, 這是因為鉀離子進入血漿以后,改變了滲透壓,導致水從細胞內流出所致。隨后細胞將鉀離子泵進膜內,細胞又恢復原態。絕大部分患者的標本這一時間只需要幾分鐘, 但也有人需要20~ 30 min?？鼓齽┻^濃會延長這個平衡時間。
3 標本放置時間的影響
筆者通過觀察總結，發現標本存放3~ 6 h對多數血液分析參數均有不同程度的影響, 主要影響WBC和PLT 結果。但有部分標本在放置的8h內大部分參數沒有顯著改變， 而平均血小板體積、血小板分布寬度、大血小板比率和血小板壓積在2h內卻有明顯增高。筆者認為，標本放置時間過長會導致細胞分層, 分層的細胞會產生不同的代謝物,形成微環境,此時, 細胞的體積與其周圍的微環境相適應, 重新混勻后需重新建立平衡, 最初的1~ 2min收縮,達到平衡約需30min。這一現象對血脂較高的標本影響更為顯著。
測定時間對血小板的影響更為顯著,在一定的時間段內, 隨著時間的延長, 抗凝劑與血液充分溶融, 松散聚集的血小板逐步解聚,血小板數值逐步升高。實際操作中, 由于急需報告結果(尤其是急診標本) 而使待測時間縮短, 往往導致血小板計數結果偏低。
4 生理和病理因素的干擾
在臨床實踐中,筆者有時會發現應用血細胞儀對新生兒血液進行分析時,使用正常量溶血劑計數白細胞, 各項結果與實際有差異。筆者認為, 由于新生兒處于特殊的生理缺氧狀態,其紅細胞數和血紅蛋白都高( Hb> 200g/ L)。常規溶血劑用量不能將紅細胞完全破壞, 加大溶血劑用量, 可以使白細胞正確分類, 計數準確。因此, 在新生兒血液分析中掌握好溶血劑用量是獲得可靠結果的關鍵。
病理因素也可影響血液分析的結果, 在某些疾病的影響下,當平均紅細胞體積小于70fL時,血小板計數假性升高, 這時需用顯微鏡人工計數才能得到準確的結果。
