時間：2022-12-10 23:54:34
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我們學生會的就是為大家提供服務的，為了更好的服務于每一位同學，為了更好的完成辦公室的每一項任務，為了讓自己的大學生活過得更充實更加有意義，為了以后更好的服務社會，為了適應這個充滿競爭的社會，我將踐行“爭取想做的，做到該做的，做好在做的”這一座右銘，對自己嚴格要求，認認真真，踏踏實實的完成領導交給的每一項任務。經過接下來的努力學習及工作生活總結，努力使自己成為一名優秀的學生會辦公室委員。
二 主要工作任務
1、對每周一次的例會做好通知、記錄，做好上傳下達的工作，并且落實例會的決定
2、多學、多看、多思，多悟，在例會中有不懂的地方，及時請教主任和同事。
3、在課余時間，積極主動地到辦公室，輔助老師的工作，做一些力所能及的事情，認真履行自己的職責。
4、 協助各部門開展工作，協調部門之間的關系。
5、定期了解各部門工作進程，期末交學生會主席團，由此形成學生會工作總結，并以此作為部門考核內容之一。
6、負責文件處理。接收、傳閱、督辦上級團，學習組織文件、外來信函材料等;起草、印發學生會文件、總結匯報材料和對外信函等;做好文件管理、檔案(含電子檔案)和信息工作，對檔案資料等文件，做到不遺失，查閱方便、迅速。
7、認真完成主席團交給的其它工作任務。
8、對辦公室的重新布置與美化，處理辦公室日常事務。
9、及時申請系團委學生會的辦公用品，并且在最短時間內發放到各部。
10、對每次活動進行考勤，建立起一套完整的檔案管理機制，建立起每個學生會部門、每個干事的考勤檔案制度，確保學生會的各項評優、評獎活動有據可依。
11、對系團委學生會內部成員的檔案管理將進行調整。
12、收集各部門的工作計劃與工作總結，交于團委老師，審查后存檔。
13、妥善保管好各部門、各項活動的計劃、總結以及相關系團委學生會的所有資料，做好期末存檔工作。
14、做好學生會各項活動的記錄。
三常規工作
1：在工作的過程中，在做好我們的基本職能的前提下，我們應該更堅守我們的原則，規范自身，以身作則，認真的對待工作，我們需要加強仔細程度，及時上傳下達，將信息傳遞給每個人，這是我們的工作與責任。
2：在辦公室舉行的活動中，我們需要具體動作創新，在保持傳統活動精神的前提下，對活動的內容、形式、運作要有所創新，有所突破，很多活動如果再這樣發展下去將毫無生命力，每個活動都包括前、中、后三個階段：前期活動的策劃;中期活動的舉行，后期活動的總結。在活動前期一定要認真的做好詳細的活動調查，調查對象主要包括校內大學生、學校黨政機關和校外社會企業，并對活動的可行性進行評估分析。抓好活動精髓，提高活動立意，在我們本著為同學們創造學習環境、建設鍛煉平臺，提供表現機會的同時，更有必要在活動精髓及活動立意深思熟慮。要真正做到舉辦活動有意義，有收獲，體現廣大學生的需求，實實在在的為同學們提供服務，體現活動真正的價值，總而言之，價值體現在需求。整合現有資源的同時，可以根據實際情況，擴大活動規模，提高活動的意義。
四、學習管理理念
1、社會高速發展，為了趕上發展，學校管理制度也在迅速發展。所以作為系學生會咽喉部門的辦公室會本著“一切服務于學生”為宗旨，做到快速的服務，確保學生工作的順利進行。
2、“友情是人生的一次寶貴的財富”它將使我們的工作更加順利，使我們之間更加團結和統一。
主辦單位：**師范大學團委
承辦單位：**師范大學青年志愿者指導中心
活動主題：用筆尖肆意揮灑，盡顯當代大學生風采
活動目的：通過征文的形式，為熱愛文學的同學們提供一個學習交流、展現自我風采的大舞臺，讓自信青春的同學們來傳播精彩。
活動準備：
1、宣傳部聯系校廣播站、師大報、傳播人等校內影響力較大的媒體，協助我們共同宣傳此次征文活動。
2、下發“‘托起夢想，激揚青春’系列征文比賽”文件給各個學院，由班級宣傳委員通知到每位同學。
活動排期：
獎項設置：
獎品設置：
1、所有獎項均有獎狀，金、銀、銅獎全場大獎均有獎金，優秀獎均有紀念品。
2、金獎獎金300元、銀獎獎金200元、銅獎獎金100元。
注獎勵辦法依據本期策略單，若有調整，解釋權歸廣告社所有。
注意事項：
1、參賽作品必須原創，不得抄襲，一經發現抄襲現象，立即取消比賽資格，并在學校內通告批評。
3、所有參賽作品概不退還。主辦單位有權對參賽作品巡展、結集出版、。
4、最后附有報名表。
活動經費預算：
獎金：1000元
紀念品：50元
獎狀：10元
總計：1060元。
**師范大學青年志愿者指導中心策劃部
附二心理咨詢活動策劃
活動時間：11月16日至11月18日
活動地點：青年文化廣場
活動對象：**師大在校大學生
主辦單位：**師范大學團委
承辦單位：**師范大學青年志愿者指導中心
活動背景：
文章編號：1009-5519（2008）07-0954-03 中圖分類號：R33 文獻標識碼：A
Study of soybean isoflavones on antioxidative effect and improving the ability of study and memory in climacteric rats
WANG Ai-mei1，ZHOU Jian-hui2，OUYANG Jing-ping1
（1.Medical College of Wuhan University，Hubei 430000，China；2.Nanyang Medical College of Henan，Henan 473058，China）
【Abstract】Objective：To investigate the influence of soybean isoflavones on the antioxidative effect and improving the ability of study and memory in climacteric rats.Methods：Forty-eight female SD climacteric rats were randomly divided into 4 groups with one control group and the other low，medium and high dose groups，which were given soybean isoflavones 0 mg/kg.bw，42 mg/kg.bw，83 mg/kg.bw and 249 mg/kg.bw by superalimentation daily for 60 days respectively.The levels of SOD，GSH-Px and MDA in serum were measured，and the ability of study and memory in each group was deterimined by adopting the law of diving platform.Results：The content of serum MDA in medium and high dose groups was lower than that in control group.The activity of serum GSH-Px im medium and high dose groups was significantly increased，so was the activity of serum SOD in low，medium and high dose groups.Conclusion：Soybean isoflavones do have the obvious effect of antioxidation，and improve the ability of study and memory effectively in female SD climacteric rats.
【Key words】Soybean isoflavon；Climacteric rat；Antioxidation；Study and memory
近年來國內外對大豆成分進行了廣泛的研究，發現大豆皂甙具有抗氧化、降血脂等作用[1，2]；大豆異黃酮能有效預防癌癥、骨質疏松等多種疾病的發生[3]。大豆異黃酮對更年期雌性大鼠抗氧化作用及學習記憶的影響少見報道，本研究采用更年期雌性大鼠，觀察大豆異黃酮的抗氧化作用及對學習記憶能力的影響，為進一步開發利用提供科學依據。
1 材料和方法
1.1 樣品：大豆異黃酮由西施蘭聯合企業有限公司生產、送檢，樣品為淡黃色粉末，膠囊，鋁塑板裝0.5 g/粒，每日1粒，按60kg體重計人體推薦量為8. 3 mg/(d?kg)，取膠囊內容物為樣品受試物。
1.2 試驗動物及飼料：清潔級雌性SD大鼠48只，12月齡，體重300～500 g由河南省實驗動物中心提供（合格證號：4104035）；清潔級飼料由河南省實驗動物中心提供（合格證號：4104042）。
1.3 主要試劑及儀器：SOD、MDA、GSH-PX試劑盒由南京建成生物工程研究所提供、美國產SPACE全自動生化分析儀、大鼠跳臺系中國醫學科學院藥物研究所研制。
1.4 動物分組及劑量設計
1.4.1 劑量：根據大鼠血清中丙二醛(MDA)的含量的多少隨機將更年期雌性SD大鼠分為分成4組，分別為空白對照組，低、中、高劑量3個實驗組。低、中、高3個劑量組，分別為人體推薦量的5倍、10倍、30倍，即42 mg/kg、83 mg/kg、249 mg/kg，受試物采用灌胃法給予，分別取樣品42 mg、83 mg、249 mg加蒸餾水至100 ml作為低劑量組、中劑量組和高劑量組的灌胃液。另設1個對照組僅給予蒸餾水，連續給予受試物2個月，灌胃量為l0ml/kg。
1.5 實驗方法和觀察指標：連續給予大鼠受試物2個月后，采血并分離血清，測定MDA含量、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽過氧化物酶(GSH－PX)的活力。
1.6 大鼠學習記憶能力測定（跳臺法）：跳臺裝置為80 cm×16 cm×40 cm的被動回避反應箱，箱底鋪有銅柵作為刺激電極，內設高4.5 cm，直徑6.5 cm的橡皮墊作為大鼠回避電擊的安全平臺。先放入大鼠適應5 min，隨后通以36 V交流電，大鼠遭到電擊后跳上安全平臺，如從臺上跳下，雙足接觸銅柵為錯誤反應，記錄3 min內出現的錯誤反應數，作為學習測試成績，24 h后重復上述試驗，記錄每只大鼠第一次跳下安全區的時間(潛伏期) 和錯誤次數，作為記憶測試成績。
1．7 數據處理：實驗數據用x±s表示，采用t檢驗判定組間差別。
2 結果
2.1 大豆異黃酮對大鼠體重的影響，見表1。
由表1可見，各劑量組大鼠在實驗初期、中期和最后的體重分別與對照組比較，差異無顯著意義(P>0.05)。說明大豆異黃酮在本試驗條件下對動物的體重無明顯影響。
2.2 大豆異黃酮對大鼠抗氧化作用的影響，見表2。
由表2可見，3個劑量組血清中的MDA含量均低于對照組，低、中、高劑量組與對照組比較差異有顯著意義(P
2.3 大豆異黃酮對大鼠學習記憶能力的影響，見表3。
由表3可見，在跳臺實驗學習記憶測試中，低、中、高劑量組與對照組比較均能使更年期雌性大鼠的潛伏期延長，錯誤次數減少(P
3 討論
自由基是指含有未配對電子的原子、分子或基團，由于自由基中含有未成對電子、具有強烈的配對傾向、高度活躍、很不穩定，具有極強的攻擊性和破壞性。在正常情況下，體內不斷產生自由基，但并未對身體造成嚴重后果，原因是機體的氧化和抗氧化系統存在著一種動態平衡。當機體受到損傷時，體內活性氧自由基增多，脂質過氧化反應加劇；當體內抗氧化能力增強，抗氧化酶活性增高時，可阻止脂質過氧化或降低脂質過氧化產物的含量。正常機體抗氧化系統的抗氧化酶類有SOD、GSH-Px等，SOD能將組織細胞中的超氧陰離子自由基歧化生成過氧化氫，從而減少氧自由基對細胞的損傷； GSH-Px是機體存在的一種含硒清除自由基和抑制自由基反應的酶系統，可將過氧化氫分解，并可清除 MDA和其它過氧化產物，阻止體內自由基引起的膜脂質過氧化。體內大量活性氧自由基若不能及時清除，使活性氧水平發生改變，可促發脂質過氧化反應。脂質過氧化產物（如MDA）可損傷組織細胞的膜性結構，影響膜的功能，從而導致組織細胞功能的損傷，作為脂質過氧化反應的產物，MDA能直接反映體內自由基損傷情況[4]。現已明確許多疾病或癥狀，如腫瘤、炎癥、心腦缺血、動脈粥樣硬化等，都與自由基有關[5]。
本實驗結果顯示: 大豆異黃酮明顯降低更年期雌性大鼠血清MDA含量，提高血清SOD和GSH－PX活性， 并有效提高更年期雌性大鼠的學習記憶能力。提示大豆異黃酮能促進機體內源性抗氧化物質的產生，抑制MDA生成，具有明顯的抗氧化作用。其抗氧化機制主要通過清除活性氧自由基，阻止脂質過氧化物的產生，提高抗氧化酶活性而發揮抗氧化作用。
更年期婦女隨著卵巢功能的衰退、促性腺水平紊亂以及雌激素水平下降，導致脂質過氧化作用增強，自由基清除酶活性下降從而引起心血管疾病、老年癡呆等一系列的疾病[6]。更年期女性因雌激素水平低下而引起的一系列癥狀過去用傳統的雌激素替代療法（ERT）來治療，但ERT會增加患雌激素相關疾病、特別是乳腺癌的風險[7]。大豆異黃酮是從大豆中提取一種天然植物雌激素，具有天然性和安全性，既可替代合成雌激素，又能避免因長期服用合成雌激素而導致的多種不良作用，因此大豆異黃酮一定具有良好的應用前景。
參考文獻：
[1] Aoki H，Otake Y，Igaraquat K，et al.Soy protein reducesparaquat induced oxidative stress in rats[J].J Nutr，2002，132(8): 2258.
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[3] 劉 麗，金 宏.大豆異黃酮抗氧化作用的研究進展[J].中華放射醫學與防護雜志，2003，23(2):132.
[4] 李國莉.大豆異黃酮抗氧化效能的研究[J].食品科學，2005，26（10）：211.
[5] 鄭靈芝，李素霞，袁勤生.大豆異黃酮抗氧化性質的研究[J].食品與藥品，2006，8（2）：48.
在我國能源發展“十一五”規劃中明確指出，要優化發展火電，具有更高參數、更高效率的超臨界、超超臨界機組如雨后春筍一般發展開來，依據電力行業標準《火力發電廠鍋爐化學清洗導則》（DL/T794-2012）的相關要求，這些鍋爐在基建時及運行一定年限后都應進行化學清洗。文章將介紹鍋爐化學清洗的必要性，并重點闡述大容量、高參數機組鍋爐化學清洗中應該注意的幾個問題，提升化學清洗質量。
1 鍋爐化學清洗的目的和必要性
鍋爐的化學清洗，就是用某些化學藥品的水溶液來清除鍋爐水汽系統中的各種沉積物，并使金屬表面形成一層良好的耐蝕防腐保護層。
隨著鍋爐參數和容量的日益增高，對受熱面清潔度和鍋內水質的要求更加嚴格。在現代鍋爐機組中，機械去垢已不可能，加之近年來化學清洗工藝也日益完善，是使受熱面內表面清潔、防止受熱面因腐蝕和結垢引起事故的必要措施，同時也是節能降耗、提高鍋爐熱效率、改善機組水汽品質的有效措施之一。其直接或間接的重要意義在于如下幾個方面：
1.1 提高換熱效率，節能降耗
通過化學清洗，可有效地去除沉積在鍋爐熱力設備表面的導熱系數很低的垢層，極大地提高了鍋爐的換熱效率，從而達到節約能源、降低煤耗的目的。
1.2 延長鍋爐的使用壽命
由于結垢使導熱性能下降，管壁溫度升高，局部過熱可產生爆裂、爆炸，導致事故，對鍋爐進行化學清洗可降低管壁溫度，有效避免爆管事故，延長設備使用壽命。另外，沉積物下的金屬容易進一步腐蝕，清除沉積可減緩設備機體的腐蝕，延長使用壽命。
1.3 減少經濟損失，取得更大效益
無論是提高換熱效率，節能降耗，還是延長設備使用壽命，化學清洗的最終目的都是為了取得更大的經濟效益。
2 針對大容量、高參數機組自身的特點，化學清洗過程中應注意問題的探討
2.1 化學清洗各部位流速控制
由于超臨界、超超臨界機組鍋爐各部位通流面積相差大，導致各部位清洗流速不一致。如某電廠鍋爐為北京巴布科克?威爾科克斯有限公司生產的超超臨界參數、變壓運行直流爐，一次中間再熱、單爐膛平衡通風、露天布置、固態排渣、全鋼構架、全懸吊結構Π型鍋爐，其省煤器、水冷壁規格、通流面積如表1：
從表1可以看出：該鍋爐省煤器通流面積為水冷壁的3倍多，為確保各部位的清洗流速滿足清洗要求，在清洗泵的選擇上要兼顧各個部位，在確保省煤器流速滿足要求的同時也要防止水冷壁流速過高。
2.2 重點關注后墻水冷壁化學清洗期間溫度，防止偏流現象發生
由于一些超臨界、超超臨界機組鍋爐水冷壁垂直段后墻結構復雜，如某電廠鍋爐為超臨界參數變壓直流爐，其后墻水冷壁就包括了后水冷壁前屏和水平煙道前部側包墻等，大大增加了后墻的流通阻力，如圖1。
在化學清洗過程中，由于清洗流速較運行時低很多，從而導致后墻容易發生偏流，因此要求我們在清洗過程中應加強后墻溫度監測，必要時采取臨時措施，優化系統設計，單獨接一路臨時管至后墻水冷壁集箱，加大后墻流量，確保后墻清洗流速滿足要求。
2.3 選取垢量最大的管樣進行小型試驗，確定最佳化學清洗工藝
工藝選擇時應有針對性，特別是對運行爐，其結垢致密、成分復雜，清洗前應進行小型實驗，確定最佳清洗工藝?；瘜W清洗前應根據鍋爐實際燃燒情況和水冷壁發生故障的歷史記錄，選擇多個部位割管，并比較垢量。以垢量最大的管樣進行小型試驗，確定清洗方案。
現大型鍋爐化學清洗常用的清洗介質有EDTA、檸檬酸、羥基乙酸和甲酸等。EDTA清洗系統簡單，對金屬的腐蝕性較小，清洗液能在金屬表面生成良好的防腐保護膜，可以清洗和鈍化一步完成，清洗水量及廢液量少，但不宜清洗含硅量高的水垢。檸檬酸對Fe3+有良好的絡合性能，但酸洗液中鐵含量過高和溶液pH值>4時，易產生檸檬酸鐵垢的沉淀，影響酸洗效果。
【Abstract】 Objective To investigate the Tetramethylpyrazine (TMP)mediating antiproliferation effect，and define its molecular mechanism in cultured rat aortic vascular smooth muscle cells (VSMC). Methods Cultured cells proliferating model of rats VSMC were established by plateletderived growth factor (PDGF). Cultured cells were randomly pided into three groups: control， PDGF (20 ng/ml)and TMP treatment (20， 40， 80 μmol/L) groups. The number of VSMC were accounted under microscope. The expression of intercellular adhesion molecular1 (ICAM1) and integrinlinked kinase (ILK) were analyzed by Western blotting respectively. Results The proliferation of rat VSMC induced by PDGF could be inhibited by TMP significantly in a dosedependent manner. A remarkable decrease of ICAM1 and ILK expression were demonstrated in the TMP group compared with the PDGF group.Conclusions The antiproliferation effect of TMP associates with suppression of adhesive molecules.
【Key words】 TMP;Adhesive molecules;Signal transduction;Vascular smooth muscle cells (VSMC);Rat
川芎嗪是從具有活血化瘀作用的中藥川芎中分離得到的一種生物堿，化學組分為四甲基吡嗪，目前已在臨床上廣泛用于心腦血管疾病的治療。我們前期研究證明，川芎嗪通過作用于血管平滑肌細胞(VSMC)而發揮活血化瘀的作用〔1〕，但缺乏在分子水平上闡明其機制的研究。細胞間黏附分子(ICAM)是一類介導細胞與細胞間或細胞與細胞外基質間相互作用的膜表面糖蛋白，在單核細胞及血小板的黏附聚集過程中發揮著重要的作用，與細胞增殖密切相關〔2〕。本研究用血小板源性生長因子(PDGF)刺激體外培養的大鼠VSMC復制細胞異常增殖模型，從抑制黏附分子信號傳遞角度探討川芎嗪抗VSMC增殖的機制，為從分子水平上闡明其活血化瘀作用機制提供實驗依據，明確其作用靶點。
1 材料與方法
1.1 材料 健康雄性5周齡SD大鼠，體重(100±10)g，由河北省實驗動物中心提供。川芎嗪注射液 (40 mg/2 ml)由北京第四制藥廠提供。DMEM培養基、胎牛血清FBS由Gibco公司提供。PDGF、小鼠抗ICAM1單克隆抗體、小鼠抗整合素耦聯激酶(ILK)單克隆抗體、兔抗GAPDH單克隆抗體、HRP標記的羊抗小鼠IgG二抗、發光試劑等均購自美國Santa Cruz公司。其他化學試劑均為進口或國產分析純。
1.2 VSMC的培養 5周齡雄性SD大鼠用25%烏拉坦按照0.4 ml/100 g體重進行腹腔注射麻醉，于無菌條件下取大鼠的胸腹主動脈。用0.01 mol/L PBS洗凈管腔內血液并剝脫血管外膜后，按貼塊法分離培養VSMC。待細胞爬滿培養瓶底后，用0.25%胰蛋白酶消化傳代。倒置顯微鏡下觀察細胞形態及生長情況，用光鏡及免疫組化的方法進行細胞鑒定。取3～6代細胞進行實驗。
1.3 細胞分組 取傳代培養的VSMC接種于細胞培養瓶中。待VSMC在含10%胎牛血清的DMEM培養液中生長至60%～70%融合時，換無血清培養基饑餓培養24 h，使細胞同步化于靜止期。實驗隨機分為對照組、PDGF刺激組和川芎嗪組。對照組單純加入培養液5 ml;PDGF刺激組添加PDGF使其終濃度為20 ng/ml;川芎嗪組先用不同濃度 (20、40、80 μmol/L) 的川芎嗪注射液預孵育1 h，然后再加PDGF(20 ng/ml) 刺激24 h。收集各組細胞進行實驗。
1.4 Western印跡分析 提取各組細胞的蛋白，用改良的Lowry法測定濃度。取各組等量蛋白提取液經8% SDSPAGE電泳分離后，半干式電轉至PVDF膜上，5%脫脂奶粉封閉，分別與鼠抗ICAM1單克隆抗體 (1∶300)、ILK單克隆抗體(1∶400) 在4℃條件下封閉反應過夜。用HRP標記的羊抗兔IgG二抗(1∶10 000) 室溫反應2 h，經TTBS、TBS充分洗滌后采用化學發光法顯影。用美國Kodark公司ID數碼成像分析系統分析結果。
1.5 統計學處理 采用SPSS10.0 統計軟件包處理，數據以x±s表示，多樣本均數比較采用單因素方差分析，組間均數比較采用t檢驗。
2 結 果
2.1 川芎嗪呈劑量依賴性抑制VSMC的增殖 細胞計數后發現，與對照組比較，PDGF刺激組細胞數量顯著增多，增加約3.8倍。20 μmol/L川芎嗪實驗組對細胞數目增加的抑制作用不明顯，40 μmol/L川芎嗪組具有抑制細胞數量的作用，此時細胞數量約為PDGF刺激組的48%(P
2.2 川芎嗪抑制ICAM1的表達 Western印跡結果經過灰度值對比處理后發現，正常對照組ICAM1的灰度值表達量很小，PDGF刺激組ICAM1的表達量顯著增加。川芎嗪組ICAM1的表達量與刺激組相比明顯減少，僅相當于其的44%(P
2.3 川芎嗪抑制ILK的表達 Western印跡結果顯示，對照組僅有少量ILK表達;PDGF刺激組ILK的表達量明顯增加。川芎嗪組ILK的表達量雖然仍舊比對照組多，但與PDGF刺激組相比降低明顯，僅相當于其62%(P
3 討 論
川芎嗪是傘形科植物川芎的主要成分，具有活血化瘀的作用，因可與其他中藥組成方劑，故廣泛應用于心腦血管疾病的救治。大量研究表明川芎嗪可抑制VSMC的異常增殖，但對其確切的分子機制目前尚不很清楚?，F已明確，動脈粥樣硬化等血管增殖性疾病的主要病變特征是血管平滑肌細胞向內膜下遷移與增殖、血小板的黏附聚集、單核/巨噬細胞浸潤等，黏附分子及其受體的相互作用是引發這一系列慢性炎癥過程的主要生物學機制。因此，如何抑制黏附分子的表達或阻斷其功能已經成為研制抗血管增殖性疾病的新靶標〔3〕。
單核細胞在血管內皮黏附并向內皮下遷移和泡沫化被認為是動脈粥樣硬化的早期病理過程。ICAM1是單鏈跨膜糖蛋白，屬免疫球蛋白超家族成員，分子量為80～110 kD，其受體為整合素家族的黏附分子白細胞功能相關抗原1(LFA1)。已經發現ICAM1/LFA1的相互作用在淋巴細胞與內皮細胞的相互作用、淋巴細胞介導的細胞毒反應過程中具有至關重要的作用〔4〕。ICAM1可分布于白細胞、內皮細胞、平滑肌細胞及某些腫瘤細胞上，正常情況下很少或不表達，在炎癥、內皮損傷等病理生理條件下表達增加，從而促進炎癥的發生與發展〔5〕。所以阻斷黏附分子的作用可能會抑制細胞的遷移與增殖。本研究結果顯示，對照組ICAM1很少表達，這可能是由于此時 VSMC 正處于分化狀態不具有增殖活性，PDGF刺激組由于細胞異常增生活躍，故 ICAM1 的表達量明顯增多，川芎嗪組 ICAM1 的表達量與比PDGF刺激組相比顯著減少，提示川芎嗪可能通過抑制ICAM1的表達而發揮抗VSMC增殖的作用。
ILK是1996年Hannigan等〔6〕用酵母雙雜交的方法研究整合素β1結合蛋白的過程中被發現的。它具有Ser/Thr蛋白激酶結構，是一個59 kD的細胞內信號蛋白，廣泛分布于多種細胞中，對黏附分子信號跨膜轉導至細胞內起者關鍵性的介導作用。ILK可以與整合素β1、β2、β3亞基胞漿區域及細胞骨架相關蛋白結合，以依賴于PI3K的方式被激活。活化后的ILK可以磷酸化蛋白激酶B (PKB) 的Ser473和糖原合成酶激酶3 (GSK3)，進而發揮生物學效應。ILK在調節細胞黏附與生長、腫瘤形成等過程中均起重要作用，是保證黏附信號進一步向下游傳遞的重要調節分子。為了探討川芎嗪抑制ICAM1表達的生物學意義，本研究進一步觀察了ILK在增殖細胞中的表達變化。Western印跡結果顯示，作為黏附分子信號傳遞關鍵性調節激酶的ILK在各個實驗組中的變化趨勢與ICAM1的改變基本相同。以上結果提示，川芎嗪可能通過下調ILK的表達得以阻斷細胞黏附與遷移的信號在VSMC內的傳遞;通過減少ICAM1的表達減弱炎細胞的黏附與聚集，從而削弱局部的炎癥反應，起到抑制細胞異常增殖的作用。
總之，本研究結果提示川芎嗪可逆轉由PDGF刺激導致的VSMC異常增殖，其分子機制與阻斷黏附分子信號傳遞、抑制黏附分子表達有關。由于中藥具有多層次多靶點作用的特點，川芎嗪是否還通過其他途徑抑制VSMC異常增殖還需做進一步的探討。
參考文獻
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中圖分類號：G40文獻標識碼：A文章編號：1674-2117（2014）12-00-01
1 新技術的引入
目前，對網頁上數學公式的編輯問題通常采用以下解決方案：通過圖片顯示和通過（數學公式標記語言）顯示數學公式。需要在符合要求的瀏覽器中才可以顯示，但占市場主流的IE瀏覽器等都不具備符合的條件。這幾種技術對于數學類網絡答疑和考試系統來說都不太方便。筆者使用的網絡在線公式編輯工具和網絡在線圖形編輯工具全面支持公式和圖形的在線輸入與編輯，支撐在線復制、粘貼與修改數學公式和所編圖形的強大功能；并且客戶端不需要安裝相應插件，突破了網絡輔導答疑系統中數學公式輸入的技術瓶頸，界面如下圖所示。
由于這種新技術剛剛出現不久，尚未在各種答疑系統和考試系統中得到廣泛的應用。本文旨在借助這兩種先進的技術對我校的數學課程網絡輔導答疑與考試系統進行一體化設計與應用。更好地為教師和學生服務，為國家精品資源共享課建設奠定基礎。
2 建立實用性強的網絡輔導答疑系統模塊
我們已經對該系統做了初步的研究，如下圖所示。
目前該系統的功能還不是十分完善。在后續研究中，本系統將增加章節索引功能和搜索功能：章節索引功能可以使學生快速定位自己的問題所在，實現先學習再提問的目的；搜索功能將幫助學生快速查找本系統是不是已經存在和自己相似的問題，且該搜索功能將全面支持公式的搜索。我們力爭引入和推廣MathQ學習交互的軟件，MathQ軟件就像我們的QQ一樣，能夠實現在線交流功能，包括點對點的和群組之間的。
3 建立功能齊全的在線考試系統模塊
我校輕工學院已經試用了一套在線考試平臺，如右圖所示。該系統已經成功實現了在線考試和成績收集功能。在此基礎上進一步完善功能，使該系統支持課程在線作業、訓練測試與在線考試模式，支持成績統計分析與試卷分析，在線測試包含考點設置、試題建設等測試題庫建設功能，同時支持從網絡試題庫的試卷庫中導入試卷來測試。通過在線測試系統，教師根據學生的每次測試成績，可以給出其一個發展性的評價，及時掌握學生的學習動態，并調整教學計劃與安排，最終能夠獲得一個良好的教學效果。
本研究將新技術應用到數學課程網絡輔導答疑與考試系統中，由于系統內集成基于Web的公式編輯和圖形編輯器，從而支持各數學專業學科知識的在線交互、在線答疑和在線考試，完成了數學學科知識的在線交互。網絡輔導答疑系統徹底地解決了公式和圖形的在線編輯問題，提高了答疑工作的便捷性與及時性，增加了師生之間和學生之間的互動性，激發了學生的學習興趣，提高了教學質量。在實際教學中，在線考試系統完善了教學模式的轉變，使其總結性評價的教學模式向發展性評價的教學模式順利過渡。網絡輔導答疑系統不僅減輕了教師負擔，讓其有更多的時間用于對學生的輔導和答疑，而且加強了學生的學習效果與自主學習能力，更加科學、公平、合理地評價學生。
參考文獻:
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[中圖分類號] r-33 [文獻標識碼] a [文章編號] 1674-4721（2013）05（c）-0016-03
老年性癡呆亦稱阿爾茨海默?。╝lzheimer' s disease，ad），它是一種極其常見的中樞神經系統退行性疾病，由于病因及發病機制至今不清，發病以后很難治愈，給患者的日常生活也帶來了很大的不便。ad患者腦內含有大量的以異常過度磷酸化的tau蛋白為主要成分的神經元纖維纏結（nfts）[1]，有研究[2]發現ad患者的癡呆程度與神經原纖維的纏結數目具有密切的關系，而神經原纖維增粗扭曲形成纏結正意味著神經元趨于死亡，因此也可以驗證出ad患者的癡呆程度與神經原纖維的纏結數目是呈正相關[3]趨勢增長的說法。所以可以大膽地推斷海馬tau蛋白的過度磷酸化其實就是ad的核心原因。而電針治療通過電流微弱的刺激大鼠海馬區域，以此來增強其活性，通過激活磷酸酯酶活性，來限制ad患者腦tau蛋白異常過度磷酸化，從而進一步改善ad的發病癥狀。此實驗初步探究電針刺激大鼠海馬區，旨在證明電針能改善ad大鼠的記憶能力，抑制tau蛋白異常過度磷酸化，進而延緩ad的發展并改善其癥狀。
1 材料與方法
1.1 實驗動物
健康的sd雄性大鼠60只，體重180～200 g，由黑龍江中醫藥大學實驗動物中心提供（批號：2010002）。在實驗室穩定條件下飼養1周。
1.2 主要試劑及儀器
戊巴比妥鈉（上海索萊寶生物科技有限公司）；ab25-35（美國chemicon公司）；tau-5單克隆抗體、tau-1單克隆抗體、p-tau（s396）多克隆抗體（biosource公司）；腦立體定位儀（narishige sn-2型）；morris水迷宮（北京碩林苑科技有限公司）；全能脈沖電療儀（6805-c型）（汕頭市醫用設備廠有限公司）；無菌針灸針（北京健樂康醫療器械有限公司）。
1.3 動物造模
將大鼠稱重并用4%戊巴比妥鈉進行腹腔麻醉注射之后，將大鼠固定在大鼠腦立體定位儀上，并且可以參照《大鼠腦立體定位圖譜》先對大鼠進行最常規的消毒，然后切口于顱頂正中矢狀，將骨膜分離，用錐顱器快速鉆開顱骨，使硬腦膜完全暴露出來。于前囟1.3 mm，矢狀縫左右旁開1.6 mm，垂直3.5 mm，用微量注射器對每側側腦室各注射aβ25-35（實驗前將其溶于0.9%氯化鈉溶液中，配置成濃度10%）。用微量注射器將aβ25-35在3 min內緩慢注入，留針5 min，充分浸潤局部組織，緩慢拔出微量注射器。第3天重復注射試劑，劑量相同，正常組不用注射藥品。
1.4 分組和治療
將雄性sd大鼠30只隨機分成正常組、模型組和電針組，每組10只。電針組：第2次水迷宮測試結束后，用毫針針刺“百會”穴，平刺約2.5 mm，“大椎”穴，直刺約4 mm?！鞍贂毖?、“大椎”穴連接6805-c型全能脈沖電療儀，頻率為30 hz，電壓為2 v，強度是以肢體輕微抖動為宜，用針刺大鼠雙側“太溪”穴，雙側“腎俞”穴，直刺進針5 mm，雙側 “足三里”穴，直刺進針4 mm，間歇5 min捻轉一次，每日1次，時間40 min。7 d為1個療程，間歇1 d，治療3個療程后進行行為學測試。正常組：給予正規的飼養，模型組：造模后常規飼養。
1.5 morris水迷宮測試
迷宮水池中的平臺位于東北象限正中，水面高出平臺100 cm，將大鼠面向池壁分別從4個入水點放入水中，記錄其在2 min內尋找到并爬上平臺的時間即逃避潛伏期。潛伏期最長時間120 s。分別在治療前后進行游泳實驗
，大鼠每次在2 min內尋找到并爬上平臺的時間為大鼠的記憶成績，每日2次，連續5 d，然后計算出測試結果的平均成績。
1.6 檢測大鼠海馬tau蛋白含量
第2次大鼠進行水迷宮試驗結束后，將其斷頭取腦，分離雙側海馬，放入冰箱中冷凍保存，用western blot法來檢測大鼠海馬區tau蛋白的含量。在1 ml組織裂解液勻漿中加入雙側海馬，等待離心5 min后提取上層清液，并利用考馬斯亮藍法進行蛋白濃度的測定，將各組所得蛋白調整成等濃度的溶液樣品。等量蛋白樣品經過10% sds-聚丙烯酰胺凝膠電泳分離后，轉移到pvdf膜封閉2個小時，加入一抗（tau-5檢測tau蛋白總量，tau-1檢測198位點非磷酸化tau蛋白，s396 tau檢測404位點磷酸化tau蛋白），孵育過夜，洗膜3次，加入二抗室溫孵育2 h，洗膜13次。凝膠成像儀拍攝圖像，image j軟件測定平均光密度（od）值。
1.7 統計學分析
采用spss 17.0統計軟件分析包，進行單因素方差分析，組間比較用t檢驗，統計結果以x±s表示，p < 0.05為差異有統計學意義。
2.1 各組大鼠morris水迷宮試驗逃避潛伏期比較
治療前模型組和電針組的時間延長與正常組比較差異有統計學意義（均p < 0.05），治療后模型組大鼠的逃避潛伏期的平均值相對于正常組和電針組的時間長，差異有統計學意義（均p < 0.05）。見表1。
2.2 各組大鼠海馬tau蛋白含量比較
tau-5蛋白3組間的含量差異無統計學意義，與模型組相比電針組海馬tau-1含量明顯偏高，但是s396 tau蛋白的含量卻明顯比模型組（均p < 0.05）低很多，s396 tau蛋白含量及電針組海馬tau-1的含量與正常組相比，它們之間的差異無統計學意義。見表2。
3 討論
老年性癡呆又稱阿爾茨海默?。╝lzheimer's disease，ad），是中樞神經系統（cns）退行性疾病。患者中最具特征性的神經病理改變就是神經元內出現大量的神經原纖維纏結，神經原纖維纏結（nft）多出現在海馬、皮質以及基底前腦的神經元中，其病理特征為大腦皮質及海馬等處的老年斑（sp）和nft[4]。在ad患者中，其病理條件下，tau蛋白會不斷的發生異常過度磷酸化的改變，因此會喪失與微管相互結合的能力，而且這些磷酸化的蛋白會聚集在一起并形成 nft（也就是說會使大量的神經元纖維纏結），結果會導致微管解聚，破壞了細胞的正常骨架，更會損壞正常軸突的轉運系統，由此導致了突觸丟失并引發退行性的病理改變。而神經原纖維纏結主要是由雙股螺旋纖維構成的，tau蛋白過度磷酸化會形成各種各樣的同分異構體，這些異構體正是雙股螺旋纖維的主要成分，細胞之中tau蛋白過度磷酸化是ad最早出現的病理改變之一[5]。有關的最新研究表明[6-8]，關于aβ所導致的失憶和生理行為的缺陷，其實都是依賴于tau蛋白分子所具有的獨特功能。因此，怎樣預防并改善tau蛋白過度磷酸化是現代化科學對ad病理學研究的關鍵性所在。
tau蛋白是在1975年weingarten等在采用豬腦分離純化微管蛋白的同時，被首次分離出來的一種與微管的組裝具有密切關系的含磷糖蛋白。它能使微管的功能和結構維持正常穩定的基礎，而且它的功能也受到磷酸化水平調節，tau蛋白構象改變的主要原因之一就是其過度磷酸化所導致的，它也會因此喪失促微管組裝的生物學活性及功能，而且對蛋白水解酶的抗性增加，會產生神經毒性[9-11]，進而危害機體健康。tau蛋白在ad患者腦內磷酸化程度高出正常人3～4倍。在ad患者的大腦內存在3種tau蛋白，一是細胞質正常tau蛋白（c-tau），二是過度磷酸化易溶型tau蛋白（adp-tau），第三種是聚集成phf的tau蛋白（phf-tau）。到目前為止，在phf-tau中已經鑒定出45個磷酸化位點[12]，其中主要是蘇氨酸和絲氨酸殘基發生過度磷酸化，本實驗是在絲氨酸的198和404位點展開進行的。電針通過對大鼠海馬區的刺激，來增強細胞活性，通過激活磷酸酯酶活性，來限制ad患者腦tau蛋白異常過度磷酸化，從而進一步改善ad的發病癥狀。
祖國醫學認為，腦為髓海、精明之府，腎藏精，生髓，通于腦，髓由腎中精氣化生?！端貑枴ば魑鍤馄吩唬骸澳I藏志。”志，即為記憶、學習能力。清·林佩琴《類證治裁》曰：“夫人之神宅于心，心之精根于腎，而腦為元神之府，精髓之海，實記憶之所憑也?！闭f明腎中如若精氣充盈，則神清氣朗，耳聰目明。由此用“百會”“大椎”“太溪”“腎俞”“足三里”組成針灸治
療，通過影響中樞神經系統，能抗氧化，以及改善突觸形態可塑性及長時程增強效應，來直接或間接提高ad大鼠的學習記憶能力[13-15]。本實驗結果顯示，針能減低aβ所致的tau蛋白在198和404位點磷酸化水平，提示電針治療有一定的抑制tau蛋白磷酸化的作用，這將有助于神經元微管系統的穩定，起到保護神經元的作用。
[參考文獻]
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中圖分類號：G42 文獻標識碼：A 文章編號：1005-5312（2012）05-0238-01
教育的根本任務在于“育人”。所謂“育人”就是要促進個體的身心發展，實現個體的社會化。不論是基礎教育還是高等教育，都應把全面提高青年一代的文化素質作為首要目標。而作為文化搖籃的高等學府，更應把構建人文修養和人文精神作為最基本的職能。
加強文化素質教育的探索與實踐，是我國高等教育教育思想和觀念改革的“催化劑”。在提高人才的整體素質的過程中具有重要的基礎性的地位和作用。藝術教育作為人文教育之中堅,其發揮的作用不可低估。但遺憾的是，很多高校都陷入了“智育第一”的誤區，長期忽視學生全面素質，特別是人文素質的培養，藝術教育依然只是專業教育的“點綴”。大家普遍認為，藝術教育只適合藝術類或文科學生，學理工的去學藝術沒有任何意義，這是教育的功力傾向和實用主義不斷蔓延泛濫的結果。事實上，專業教育只是全面發展教育的一項內容，它雖然對拓寬人的認識、啟迪人的智慧等方面有重要作用，但主要功能還是使學生獲得專門的知識和技能。如果大學生只重視可以帶來實際效益的專業知識的學習，而輕視藝術修養方面的教育和熏陶，學校只重視智育不重視人文教育，教師只教書不教人，這種情況，長此以往，將會造成人類素質和文明的倒退，必將引發很嚴重的社會問題。
所以，藝術教育應該是面向全體學生的審美教育,它通過情感、形象、審美等教育活動,引導學生進行藝術鑒賞與表現,提升自己的文化品位與創新思維能力，而創新思維能力，就是理工科學生應具備的必不可少的能力之一。理工科學生主要運用抽象思維，忽略了人的情感作用，而藝術范疇則側重形象思維。如果能把抽象思維與形象思維完美的結合起來，便可如虎添翼。從古至今，許多科學家不僅在自己的學科領域卓有成就，而且在人文科學、藝術方面也具有良好的修養。說“音樂成就了愛因斯坦”這話一點不為過。 讀過愛因斯坦傳記的人，也許都不會輕易忘記這位科學巨匠的另一種生活：他常常陶醉在美妙的旋律中，并在美的和諧中觸摸宇宙的“神經”。當他體驗到演奏莫扎特的奏鳴曲所帶來的那種無法言喻的快樂時，音樂就成為他一生的至愛。用莫斯考夫斯基的話說，扶搖直上的巴赫音樂使愛因斯坦不僅聯想到聳入云端的哥特式教堂的結構形狀，而且還聯想到數學結構的嚴密邏輯。彈鋼琴，是愛因斯坦工作之后的消遣，亦是他工作之前的娛樂或激勵。當然，愛因斯坦不是為娛樂而娛樂，而是借助音樂深入那個“廣漠無垠的宇宙”，獲得超個人的體驗。有時，一支樂曲進行到途中，愛因斯坦會突然停下，也許是一段優美的旋律觸動了靈感，愛因斯坦又開始了他的科學獨白。量子論創始人普朗克家也彈得一手好鋼琴，他常與愛因斯坦一起演奏貝多芬的作品。這兩位理論物理學大師心心相印，無論在科學領域，還是在藝術領域，他們都用親密的“語言”互相交流，共同描繪一幅壯麗的藍圖。還有我國著名的地質學家李四光，他年少時就喜歡音樂，小提琴也拉的很不錯，并且他還是中國第一首小提琴的作曲者，早在1920年，他在巴黎的時候就創作了小提琴獨奏曲《行路難》，全曲有頭有尾，層次清晰，最難能可貴的是樂曲立意深邃。毫無疑問，音樂是他們心靈的天堂，他們可以隨時摒棄人世間的一切喧囂，自由自在地漫步于美妙的音樂王國，沉浸于浪漫的遐思和深邃的思想之中。
可以說，音樂是作為一種精神催化劑，悄然滲透到這些科學家的思維中去的。他們對事物有著卓越的直覺能力，這種令人嘆為觀止的直覺能力，實則與藝術家的想象有異曲同工之妙,所以他們可以被稱之為“科學的藝術家”。 誠如郭沫若對科技工作者的忠告：“科學也需要創造，需要幻想，有了幻想才能打破傳統的束縛，才能發展科學”。所以在大學生文化素質提高與完善的重要時期，盡管學生所學專業不同，都應有選擇地開設藝術課，讓他們接受良好的藝術教育。
The expression and intervention of medicion of heme oxygenase．1/CO in idiopathic pulmonary fibrosis of rats BAO Wen．hua，SHI Feng，XING Ji．qiang.Department of Pulmonary Medicine， The First Affiliated Hospital of Jiamusi University．Jiamusi，Heilongjiang Province 154002，China
【Abstract】 Objective To investigate the expression and intervention of medicion of heme oxygenase．1/CO in idiopathic pulmonary fibrosis.To offer new method for early diagmosis and therapy of idiopathic pulmonary fibrosis.Methods 60healty wistar rats was divided into four groups randormly.Discern for:nornal control group、idiopathic pulmonary fibrosis group、the group of specific stimulator of HO．1,the group of specific inhibitorof HO．1．Measured the levels of HO．1 activity and COHb in blood and lung tissues of each group，to analyze effection of HO．1/CO，and influence of medinces in idiopathic pulmonary fibrosis.Results HO．1and COHb was expressd very lowly in blood and lung tissues,and there was not association between HO．1 expression and COHb expression(P>0．05).In idiopathic pulmonary fibrosis group，group of specific stimulator and the group of specific inhibitor，HO．1 expression and COHb expression in blood and lung tissues was higher than the goup of control， and there was significant association between HO．1 expression and COHb expression(P
【Key words】 Idiopathic pulmonary fibrosis；Bleomycin；Hemin； SnPP； HO．1；CO
肺纖維化(pulmonary fibrosis,PF)是由于過多的成纖維細胞聚集和細胞外的基質成分沉積而導致正常的肺組織結構改變和功能喪失的一類疾病。血紅素氧合酶(heme oxygenase,HO)是哺乳動物組織細胞微粒體的一種蛋白酶,催化血紅素產生膽綠素、一氧化碳(CO)和亞鐵，研究[1]提示氣道平滑肌中存在HO．1和HO．2,HO．1主要是被一些因素誘導產生,包括缺氧、應激等。Prabhakar[2]等的研究表明，通常HO．1的表達很低甚至缺乏,但在應激和缺氧情況下明顯提高，肺纖維化可使機體處于缺氧狀態，故推測可使HO．1的表達增加，體內COHb生成增多，利用大鼠肺纖維化模型和應用HO．1的特異性激動劑和抑制劑，研究HO．1/CO在肺纖維化大鼠中的表達及藥物干預的影響，為臨床肺纖維化治療提供一種新方法。
1 材料與方法
1．1 材料 應用佳木斯大學動物實驗中心提供健康Wistar大鼠(黑動第99102001)60只,雌雄各半,體質量170~200 g,正鐵血紅素購自美國Sigma公司，錫原卟啉(SnPP)購自美國Sigma公司，博萊霉素(BLM．A5)購自黑龍江省哈爾濱博萊制藥有限公司，UV．756MC型紫外可見分光光度計購自上海精密化學有限公司。
1．2 方法
1．2．1 模型制備 參考文獻方法略做改進[3．4]，將大鼠麻醉，氣管內注射博來霉素(BLM．A 5．5 mg/kg)0．2~0．3 ml，建立肺纖維化組模型，氣管內注射等量的生理鹽水建立對照組模型，在肺纖維化模型組基礎上分別腹腔注射血晶素或錫原卟啉(125 μmol/kg)注射液0．5 ml/d，建立加強組與抑制組模型。
1．2．2 評價 病理學檢查:在大鼠肺纖維化造模后第7、14、28 d,在每個實驗組隨機處死5只動物,分離肺臟,注入10%(體積分數)福爾馬林液1．5 ml保持30 min后,投入Bouins液固定24 h,常規脫水,石蠟包埋后,切片(3 μm)，行蘇木精．伊紅(HE)和Mallorys三色染色。光鏡下觀察有無炎性反應及纖維化發生。評價是采取Szapiel等[5]定量或半定量方法。
1．2．3 觀察指標
1．2．3．1 肺組織與血清中HO．1活性測定 將肺均漿上清液和血清各20 μl中加入2 mmol/L正鐵血紅素40 μl，4．5 mmol/L還原性輔酶Ⅱ40 μl，同一只健康豚鼠的肝組織勻漿上清液20 μl,0．1 mol/L的KH2PO4緩沖液(pH 7．4)1．8 ml，避光置37℃恒溫水浴箱中，10 min后，將反應物棕色小瓶置于冰上終止反應。不含NADPH的樣品做空白對照，在分光光度計上用464 nm和530 nm雙波長測定膽紅素生成量[2]
1．2．3．2 全血COHb含量測定：參照樂宏元等[6]的方法，新鮮血中加入保險粉(Na2S2O4)250 mg，使樣品中多組分的血紅蛋白轉化為Hb和COHb兩個組分，在UV．756MC型紫外可見分光光度計上用420 nm和432 nm兩個波長測定吸光度，依比爾定律建立綜合方程式求出全血COHb的百分含量。
1．3 統計學處理 實驗數據以均數加標準差(x±s)表示，計數資料采用SPSS13．0軟件進行t檢驗、相關性分析，計量資料采用秩和檢驗。
2 結果
2．1 大鼠肺組織形態學及病理學觀察 在對照組中，第7、14、28天肺組織成淡紅色，表面光滑，未見明顯出血點，無明顯炎性反應及纖維化的發生，且各時間段無明顯變化。在肺纖維化組中，肺組織出現明顯的出血水腫，并逐漸融合成片，形成斑片狀、結節狀纖維化，并隨時間延長，肺纖維化組中炎性反應程度逐漸減輕，纖維化程度逐漸加重；加強組中，僅出現炎性反應性改變，無肺纖維化發生；抑制組中，肺纖維化程度較對照組、肺纖維化組及加強組最重，出現廣泛的肺纖維化。
2．2 大鼠肺組織肺泡炎及纖維化程度 在正常對照組中僅可見少量輕度肺泡炎；在肺纖維化組中，造模后的第7天，出現廣泛的肺泡炎，在第14天、28天組中，隨著時間的延長，炎性反應逐漸減輕，肺纖維化程度逐漸加重，形成廣泛的肺纖維化；激動劑組中，肺泡出現較輕的炎癥改變，無肺纖維化形成；在抑制劑組中，肺纖維化程度最重，出現廣泛的肺纖維化。
2．3 大鼠血清COHb水平變化 在激動劑組與纖維化組中，血清COHb水平隨時間逐漸增加；在抑制劑組中血清COHb水平逐漸減少，各組比較見表1。
3 討論
3．1 關于博來霉素致大鼠肺纖維化的動物模型 肺纖維化是一種慢性炎癥性間質性肺疾病，主要表現為彌漫性肺泡炎、肺泡單位結構紊亂和肺纖維化病變，從起始癥狀到病情逐漸惡化，進而導致呼吸功能不全而死亡一般為3~5年，其病因尚不清楚，發病機制仍不明了。為了探討HO．1/CO體系在大鼠肺纖維化中的表達及血晶素及錫原卟啉對其的干預，復制穩定的動物模型是本試驗的根本保證。本試驗對博來霉素導致大鼠肺纖維化進行了28 d的動態觀察，包括整體病情、精神、飲食、活動能力、一般反應、體質量的變化以及肺組織病理學觀察，結果顯示本試驗采用博來霉素致肺纖維化模型是成功而穩定的，與文獻結果一致。
3．2 血紅素氧合酶．1/一氧化碳與肺纖維化 血紅素氧合酶(heme oxygenase,HO)是哺乳動物體內與亞鐵血紅素代謝相關的,一族具有多種功能的微粒體氧化酶，是血紅素分解代謝的限速酶，由HO．1、HO．2和HO．3三種同工酶構成，其中HO．1為誘導型的血紅素氧合酶，它廣泛分布于全身組織細胞的微粒體內，其活性在多種因素的誘導下，約可提高100倍，是目前已知最易受誘導的酶之一。一氧化碳(CO)與一氧化氮(NO)一樣，都是雙原子、小分子氣態物質，20世紀90年代初期CO受到廣泛關注，研究結果證實，CO是一種重要的細胞信使分子，在細胞功能和通訊的調節中發揮信號轉導作用，其在心血管、呼吸、神經、免疫和內分泌等系統中發揮著重要的生物學效應。
通過本實驗研究發現，對照組肺組織與血清中HO．1含量與血清中COHb的含量均很少，且兩者無明顯相關性，在單純肺纖維化組中其兩者的含量明顯增加，并成正相關發展(P
參考文獻
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中圖分類號：R54文獻標識碼：A文章編號：1009_816X（2016）02_0104_05
doi：103969/jissn1009_816x20160208Inhibition on Homocysteine_induced_transformation of Rat Aortic Vascular Smooth Muscle Cells Phenotype by Yellow Rice Wine Polyphenols WU Qiu_de， GUO Hang_yuan， MENG Li_ping， et al Xidian Township Hostipal of Ninghai Country， Zhejiang 315600， China
[Abstract] Objective To verify the inhibition of yellow wine polyphenols on homocysteine（Hcy）_induced_transformation of rat aortic vascular smooth muscle cells（VSMCs） phenotype Methods Rat VSMCs in primary culture were identificated， and VSMCs in passage 4_7 were used for the following experiments The VSMCs were divided into 5 groups： control group， Hcy （100umol/L ） modulation group， Hcy+polyphenols modulation group， Hcy+alcohol modulation group， Hcy + yellow wine modulation group MTT were used to investigate the proliferation of VSMCs Transwell chambers and wound healing were employed to test the migratory ability of VSMCs ICC were used to detect the VSMCs’ morphology structure Western blotting were used to investigate the expressions of SM_actin， SM_MHC， Calponin and OPN in VSMCs of every group Results Compared with control group， the proliferation and migration ability of VSMCs were significantly increased in the Hcy modulation group （P
[Key words] Yellow wine polyphenol； Hcy； VSMCs； Smooth muscle cell phenotype transformation
血管平滑肌細胞（vascular smooth muscle cells，VSMCs）的增殖和遷移是動脈粥樣硬化（AS）發展過程中重要的病理基礎，也是造成支架植入或冠狀動脈搭橋術后血管再狹窄的重要原因。最近研究顯示血管平滑肌細胞在不同的分化階段有不同的細胞表型，不同表型之間的平滑肌細胞生理特性相差巨大，并且在外界因素發生變化時，VSMCs不同表型之間可以相互轉化。正常血管中的VSMCs一般是已分化的“收縮型”平滑肌細胞，在血管受到損傷時，一些已分化的“收縮型”VSMCs可以去分化成為“分泌型”細胞?！笆湛s型”VSMCs低增殖，低分泌，特異性表達平滑肌肌動蛋白（SMA）、calponin、平滑肌肌動蛋白主要組織相容性復合體（SM_MHC）等具有標志意義的特征性蛋白，“分泌型”VSMCs增殖加快，細胞外基質分泌增加，表達“收縮型”細胞所沒有的骨橋蛋白（osteopontin，OPN）。現在大量的研究結果顯示在粥樣斑塊中，“收縮型”的VSMCs減少，“分泌型”的VSMCs增多。同型半胱氨酸（Homocysteine，Hcy）是目前公認的冠狀動脈粥樣硬化的獨立危險因素，我們前期的實驗已經證實Hcy可以增強VSMCs的增殖和遷移，誘導VSMCs大量分泌基質金屬蛋白酶（matrix Metalloproteinases，MMPs）等影響細胞外基質動態平衡的蛋白酶。國內王生蘭等也通過試驗證實Hcy可以促進大鼠血管平滑肌細胞的增殖和表型轉化。過去的研究結果顯示少量引用低濃度的黃酒可以顯著減少LDLR-/-小鼠主動脈內粥樣硬化斑塊的面積，低濃度的黃酒還可以抑制大鼠血管內皮細胞和血管平滑肌細胞分泌MMP2。國外的大量研究已經證實紅酒中主要是多酚類物質具有AS的作用，所以我們推測黃酒中的多酚類物質也具有抗AS的作用。
1材料與方法
11材料：（1）實驗動物：SPF級SD大鼠，雌雄不限，50天左右，體重150g～180g（購自浙江省醫學科學院實驗動物中心）。（2）實驗試劑：黃酒多酚（上海中藥制藥技術有限公司，國家中藥制藥工程技術研究中心），乙醚、甲醇、75%乙醇、95%乙醇、無水乙醇、甲醇（杭州化學試劑有限公司）、DMEM高糖培養基、PBS、025%胰蛋白酶_EDTA、青霉素和鏈霉素（杭州吉諾公司）、同型半胱氨酸（Sigma公司）、胎牛血清（GIBCO公司）、MTT（Emresco公司）、DAPI（Rcohe公司）、兔抗大鼠SM_actin單克隆抗體、兔抗Calponin、SM_MHC、OPN多克隆抗體（ABCOM公司）、辣根過氧化酶標記的山羊抗兔或者抗鼠二抗、FITC、FRITC標記的山羊抗兔IGg（jackson公司）、蛋白免疫印跡以及明膠酶譜相關試劑（江蘇碧云天生物技術研究所）。
12VSMC原代細胞培養以及鑒定：采用組織貼塊法培育大鼠胸主動脈VSMCs，采用形態學觀察和細胞免疫熒光檢測SMA鑒定VSMCs，通過SMA與DAPI核染之間的關系鑒定VSMCs的純度。取第4～7代細胞用于后續實驗，實驗中細胞加干預因素時用含25%胎牛血清的培養基。
13分組及干預：細胞實驗分為5組，分別為空白組（不加任何干預因素），Hcy組（濃度為100μmol/L，以001%DMSO為溶劑），黃酒多酚組（100μmol/L Hcy+50mg/L黃酒多酚，以001%DMSO為溶劑），酒精組（100μmol/L Hcy+15%酒精），黃酒組（100μmol/L Hcy+黃酒）。國內外文獻報道DMSO終濃度
14MTT法測VSMCs增殖：取4～7代培養細胞，025%胰蛋白酶消化單層VSMCs，用含10%胎牛血清的DMEM高糖培養基配成細胞懸液并計數，以每孔6×103個細胞接種于96孔培養板中。待細胞貼壁后，無血清培養基培養24小時使細胞同步化。各組細胞按上述分組加入對應濃度的干預因子，每組設3個復孔，2個不加細胞的空白對照孔。細胞于37℃、5% CO2孵箱培養24小時、48小時和72小時。培養結束，每孔加入MTT液20μL，37℃繼續孵育4～6小時，終止培養，小心棄去培養上清，每孔加入150μL DMSO，震蕩10分鐘，選擇490nm波長于酶聯免疫檢測儀測定各孔吸光值并記錄。以時間為橫軸，吸光值為縱軸繪制VSMCs生長表。
15細胞劃痕實驗測VSMCs遷移：取4～7代培養細胞，025%胰蛋白酶消化單層VSMCs，用含10%胎牛血清的DMEM高糖培養基配成細胞懸液并計數，以每孔105個細胞接種于6孔培養板中，每孔體積2mL。細胞鋪滿板底后，無血清培養基培養24小時使細胞同步化，加入18mmol/L羥基脲作用12h抑制細胞增殖，用100μl黃色槍頭垂直于孔板制造細胞劃痕，吸去細胞培養液，用PBS沖洗孔板三次，洗去劃痕產生的細胞碎片。加入各組相應的干預因子，拍照記錄0、12、24、48、72、96小時圖片，用image pro plus60分析計算出細胞遷移的面積（劃痕面積減去遷移后細胞之間剩余面積），細胞遷移的面積與最開始的劃痕面積之間的比值來表示遷移的多少。
16Transwell法測VSMCs遷移：取4～7代VSMCs，血清饑餓使細胞同步化，加入18mmol/L羥基脲作用12h抑制細胞增殖，025%胰蛋白酶消化單層VSMCs，用含有各組干預因子的DMEM高糖培養基（無血清）配成細胞懸液并計數（3×104個/ml）。各組24孔板配套的Transwell小室（08μm）上室加入200μl細胞懸液，下室加入含有10%胎牛血清的DMEM高糖培養基500μl，分別培養4小時、8小時、12小時、24小時、48小時。干預結束后以棉簽輕輕擦去上層未穿透膜的VSMCs，取下Transwell半透膜，TBS洗滌3次，37%多聚甲醛室溫固定5min，流水沖洗后，用2μg/ml的DAPI染核，PBS沖洗后，熒光顯微鏡下隨機每組取5個視野計數穿膜細胞數并記錄。
17細胞免疫熒光法檢測各組中SM_actin在細胞中的分布及表達：將第4～7代細胞接種于96孔板，每孔3000～5000個細胞，待細胞貼壁后加入各組干預因子，在細胞融合之前進行檢測。先PBS洗三遍，用4%多聚甲醛固定，025%Triton X 100穿破細胞膜，山羊血清室溫封閉1h，加入稀釋了250倍的anti_SMA抗體，4℃過夜，PBST清洗三遍之后加入結合有FICT或者FRICT的山羊抗兔二抗，室溫孵育一小時后PBST清洗三遍，熒光顯微鏡拍照后圖片用iamge pro plus 60分析。
18Western blot測定VSMCs中SM_actin、calponin、OPN的表達：各個干預因子干預48小時之后，裂解VSMCs提取蛋白，BCA法蛋白定量，SDS_PAGE膠每孔加入20μl樣品，80V 30min進行蛋白濃聚，120V 2小時進行凝膠電泳，并用孔徑045μm硝酸纖維素膜250mA 90min進行轉膜。轉膜完畢經常溫下TBST洗膜x3、脫脂奶粉封閉2小時后，以1：1000濃度加入兔抗鼠SM_actin一抗（或抗calponin、SM_MHC、OPN、β_actin一抗），4℃孵育過夜，常溫下TBST洗膜x3，辣根過氧化物酶標記的羊抗兔二抗孵育后ECL化學發光法檢測目標蛋白和內參。暗室柯達膠片顯影，Quantity one軟件定量分析。
19統計學處理：用SPSS200統計軟件分析數據。實驗數據以（x-±s）表示，多組均數比較用單因素方差分析，組間比較采用LSD法，P
2結果
21VSMCs原代培養及鑒定：用組織貼塊法培養大鼠胸主動脈VSMCs，大概8天左右組織塊周圍有細胞爬出，兩周左右細胞融合可以傳代。傳代后細胞呈典型“峰谷”狀排列生長，用SM_actin細胞免疫熒光鑒定VSMCs，DAPI核染之后確定細胞純度在99%以上，見圖1。圖1大鼠主動脈VSMCs形態學（×100）以及細胞免疫熒光鑒定（×400）22黃酒多酚和黃酒抑制Hcy誘導的VSMCs增殖：在加入各組干預因素后，12小時和24小時時各組OD值沒有明顯區別。相比于空白對照組，48小時之后Hcy組OD值明顯升高（P
26Western blot檢測各組細胞中SM_actin、calponin、SM_MHC、OPN的表達情況：各組VSMCs中SM_actin的表達量沒有顯著差異，相比于空白組，Hcy組VSMCs中OPN表達增加（P
在不同的外界因素影響下，VSMCs具有不同的細胞表型，具有很強的可塑性。在正常血管中膜中的VSMCs是一種高分化的細胞，細胞呈梭形，主要起維持血管形狀和收縮血管的作用，具有低增殖、低遷移、低蛋白分泌等特征；當發生動脈粥樣硬化等血管疾病時，VSMCs可以去分化為未分化的細胞，形態變圓，細胞收縮性能下降，表現出高增殖、高遷移、高蛋白分泌等特征。過去的觀點是將VSMCs細胞表型單純的分為“收縮型”和“分泌型”兩種表型，現在大量的研究已經證實，在不同強度的外界因素作用下，VSMCs去分化的程度不同，可表現出各種介于“收縮”型與“分泌”型之間的細胞表型特征，從而在很多血管疾病的發生發展中發揮重要的作用。
自從1979年Chamley等第一次發現平滑肌細胞具有不同的細胞表型以來，目前已經發現了一大批特異性比較高的可以作為已分化成熟VSMCs標志的蛋白，比如與細胞收縮密切相關的SM_actin、calponin、SM_MHC、SM22α、smoothelin等蛋白以及參與細胞骨架構成的h_caldesmon、β_vinculin、telokin、metavinculin、desmin等蛋白。這些蛋白在分化成熟的VSMCs中表達，其表達量隨著平滑肌細胞的去分化而逐漸減少，相反，最近的研究發現OPN和糖基質蛋白在去分化的VSMCs中開始表達，并且表達量跟細胞的去分化程度呈正相關。通過檢測SMα_actin、SM_MHC、calponin、OPN等蛋白的表達情況是近幾年來國內外研究者常用的鑒別VSMCs不同細胞表型的方法。
隨著“法國悖論”以及“地中海飲食”等概念的提出，國內外大量的研究都證實規律適量的飲用紅酒具有心血管保護作用并且已經闡明紅酒的心血管保護作用主要是由于其中的多酚類成分。紅酒多酚主要由兒茶素、花青素、白藜蘆醇等組成，通過改善血管功能、調節血脂、調節特異性Micro RNA、抑制VSMCs增殖和遷移等作用而發揮心血管保護作用。紹興黃酒由糯米發酵而成，也富含兒茶素、沒食子酸等多酚類物質，我們前期的動物試驗已經證實黃酒多酚具有抑制高脂飲食小鼠AS的作用和抑制Hcy誘導的VSMCs高表達MMPs等影響細胞外基質平衡的蛋白。在本實驗中，我們進一步證明黃酒多酚具有抑制Hcy誘導的VSMCs表型轉化的作用，這可能是多酚具有抗動脈粥樣硬化作用的另一機制。
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[中圖分類號] R574.62 [文獻標識碼] A [文章編號] 1673-7210（2013）07（a）-0037-03
感染性疾病在兒童疾病譜中仍占首要位置，在胃腸道感染疾病中，EPEC在發展中國家兒童中的發病率較高[1-2]，尤其是3歲以下的幼兒，且疾病的危害性大。在兒童胃腸感染性疾病中，近年來有關輪狀病毒性腹瀉疾病中CD4+T淋巴細胞亞群及其代表因子的研究較多，細菌性腹瀉病例散發、不易收集，國內外文獻關于細菌性腹瀉病例的CD4+ T淋巴細胞亞群代表因子研究少有報道。Th1、Th2、Th17淋巴細胞是CD4+T淋巴細胞的三個亞群，在感染性疾病和免疫相關等疾病中發揮著重要作用。本研究以小鼠細菌感染性腹瀉為疾病模型，探索小鼠經口感染EPEC后外周血漿中的Th1、Th2、Th17淋巴細胞代表因子水平的變化以了解小鼠的免疫反應特點。
1 材料與方法
1.1 材料
1.1.1 實驗動物 普通健康昆明小鼠40只，雌雄各半，體重18～22 g（5～6周齡，購自軍事醫學科學院實驗動物中心，檢驗檢疫合格），于軍事醫學科學院實驗動物中心屏障實驗室進行實驗。將40只昆明小鼠隨機分成生理鹽水對照組（20只）和實驗組（20只）。
1.1.2 主要實驗試劑與儀器 致病性大腸桿菌（EPEC-E2348/69）（軍事醫學科學院實驗動物中心惠贈），小鼠T淋巴細胞因子CBA組合試劑盒（BD美國），血細胞分析儀（NIHON KOHDEN日本），離心機（德國KENDRO公司），-80℃冰箱，渦旋混勻器（IKA公司），流式細胞儀（美國BD公司）。
1.2 感染性腹瀉小鼠模型制備
1.2.1 實驗組 所有小鼠均單籠飼養，實驗前禁食24 h、禁水1 h。①實驗開始前對每只小鼠進行眼眶靜脈采血，放置于經EDTA鉀鹽溶液浸潤過的容器中，留作血細胞分析。②給每只小鼠灌胃3%碳酸氫鈉溶液0.3 mL。③配制濃度為5×108 cfu/mL的致病性大腸桿菌混懸液，灌胃碳酸氫鈉溶液半小時后，對實驗組每只小鼠灌入細菌混懸液0.5 mL；4.8 h后更換空鼠籠，不添加墊料，觀察小鼠的大便性狀。
1.2.2 對照組 對照組不作血常規檢測，處理因素將致病性大腸桿菌混懸液更換為生理鹽水0.5 mL，余處理過程同實驗組。
1.2.3 實驗中觀察及檢測指標 ①灌胃8 h后，觀察小鼠的大便性狀、精神狀態、行動動作。②灌胃后第24小時，對實驗組所有小鼠采血進行血細胞分析。小鼠精神萎靡、少動或激惹躁動，大便性狀為黏液、稀便，血細胞分析白細胞計數結果差異有統計意義則視為造模成功。
1.3 感染性腹瀉小鼠外周血T淋巴細胞因子檢測
1.3.1 外周血采集及血漿分離 在第24小時對實驗組、對照組小鼠行摘眼球法取血，取部分血行血細胞分析，余下經過離心10 min（3000 r/min，離心半徑16.5 cm），收集血漿，凍存于-80℃冰箱中以備統一檢測。
1.3.2 T淋巴細胞因子檢測 上述血漿在37℃孵化箱中解凍， 細胞因子檢測具體步驟按試劑盒說明書進行，經過流式細胞儀上機處理后可獲得各細胞因子的熒光強度值，通過標準曲線換算成相應濃度（自動換算），結果以ng/L表示。
1.4 統計學方法
采用SPSS 18.0軟件進行統計學分析，非正態分布及未知分布形態總體采用秩和檢驗Wilcoxon W檢驗，數據以M（P25，P75）中位數、四分位間距表示。以P < 0.05表示差異有統計學意義。
2 結果
2.1 感染性腹瀉小鼠模型的建立
細菌灌胃后約6 h小鼠出現倦怠、精神萎靡、行動遲緩，部分小鼠出現黏液便、稀便，部分小鼠出現松軟大便（較正常糞便含水多）。灌胃前后分別取小鼠血液進行血細胞分析，結果表明實驗組小鼠灌胃前后白細胞計數（WBC）水平差異有統計學意義（P < 0.05），中性粒細胞百分比（N%）、淋巴細胞百分比（L%）雖有改變，但差異無統計學意義（P = 0.076 > 0.05，P = 0.086 > 0.05）。見表1。
2.2 血漿中Th1、Th2、Th17淋巴細胞因子水平檢測
實驗組小鼠在胃腸感染后外周血漿中淋巴細胞因子：IL-2、IL-6、IL-10、IL-4、IL-17A較對照組水平升高，與對照組比較有統計學差異（P < 0.05）。TNF、IFN-γ兩細胞因子水平與對照組比較差異無統計學意義（P > 0.05）。見表2。
3 討論
有關動物細菌性腹瀉模型的報道較少，主要是大腸桿菌誘導動物腹瀉模型，且多為經腹腔注射誘導動物腹瀉，但此類方式與傳統的人類經口感染方式不同。本實驗采用經口灌喂細菌感染小鼠，與傳統的運用中草藥及腹腔注射制作小鼠腹瀉模型原理不同，模仿人類胃腸感染主要誘發途徑（經口感染）。通過主觀的觀察指標（大便性狀、行動動作）和客觀實驗數據（血細胞分析結果）分析判定小鼠感染，更能模擬人類腸道感染時狀態。本次實驗開始前采取禁食水以及灌胃碳酸氫鈉溶液，目的是為了減少腸內容物及營養物、減少胃酸分泌 ，降低胃腸的屏障功能使得細菌得以存活繼而繁殖、黏附，造成腸道組織損傷及其免疫反應以達到腹瀉的效果。人類細菌感染一般情況下白細胞計數是升高的，但實驗過程中小鼠白細胞計數表現為降低（重復兩次），或許是重度感染所致，中性粒細胞及淋巴細胞百分比變化符合人類細菌感染時情況但差異無統計學意義，具體有待進一步研究（但考慮為唯一處理因素，且處理后有統計意義，處理有效）。
細菌腸道感染后，鼠模型的腸黏膜完整性及上皮細胞受損、細菌毒素侵入及局部體液分泌使小鼠出現黏液稀便、精神萎靡等炎性反應的表現，血細胞的組成比例也發生變化。腸道黏膜免疫系統和全身的免疫系統產生應答，有多個細胞因子參與，其中包括Th1類淋巴細胞代表因子：IL-2、TNF、IFN-γ，Th2類淋巴細胞代表因子：IL-6、IL-10、IL-4，Th17類淋巴細胞代表因子：IL-17A，它們在適應性免疫應答過程中起著重要作用。
有研究指出兒童感染性腹瀉病發病時體內IL-6水平升高[3-4]，包括細菌性和病毒性腹瀉，本實驗小鼠在細菌感染后血液中IL-6水平也呈升高趨勢。IL-6是多功能炎癥細胞因子，升高后可促進B細胞增殖分化和分泌抗體，促進抗體與抗原（病原）結合進而清除病原。
IL-2在T細胞介導的細胞免疫應答中起到促進、維持T細胞活化增殖的重要作用，促進所有亞型T淋巴細胞活化增殖及產生細胞因子。IL-4促使活化的B淋巴細胞分泌IgE和IgG1，促進IgG向IgE類型轉換，以自分泌方式促進Th2細胞分化但抑制Th1細胞增殖及其應答等，在變態反應疾病發病過程中有重要作用。關于IL-2、IL-4這兩個因子在感染性腹瀉病（尤其是細菌性）中少有報道，在一項旅行者腹瀉研究中[5]諾瓦克病毒感染組IL-2、IFN-γ升高，主要由Th1細胞介導免疫反應，諾瓦克病毒和產毒性大腸桿菌混合組呈現Th1/Th2雙重免疫反應。本研究提示IL-2、IL-4都高于正常對照組，IL-2在疾病過程中促進了各亞型T細胞活化，促進炎癥的發展，IL-4的升高一定程度上抑制了Th1介導的免疫反應，同時也促進了Th2介導的免疫反應。
IL-10是一類重要的抑制性細胞因子，抑制IL-2、IFN-γ等促炎細胞因子產生，抑制Th1細胞應答。IL-10作為抗炎介質對膿毒癥有一定保護作用，Florquin等[6-7]報道BALB/C小鼠經注射葡萄球菌腸毒素（SEB）4 h后血液中IL-10水平明顯高于對照組，IL-10單抗可將SEB攻擊小鼠的死亡率提高30%，該作用可被IFN-γ抗體抑制，IL-10是黏膜免疫應答的重要調節因子。本實驗提示EPEC腸道感染小鼠血中IL-10水平升高，與上述研究結果類似，對炎癥的放大和擴散起到限制作用，避免了炎性連鎖反應及無限擴大，具有抑制全身炎性反應綜合征、膿毒癥的發生發展的作用。
IL-17A主要由Th17淋巴細胞產生，是重要的促炎因子，誘導炎癥因子和趨化因子釋放，如IL-6、IL-8等，募集、活化中性粒細胞并抑制其凋亡。在兒童感染性腹瀉病研究中[8-9]，IL-17A參與疾病的免疫反應，且在遷延性感染中IL-17A水平高于急性期組和正常對照組。本次實驗小鼠急性期出現感染性腹瀉后IL-17A水平與對照組相比升高且有明顯統計學差異，與報道不完全相同。IL-17A在急性期促進炎癥反應，使機體產生免疫應答，但若長期高于正常水平存在將導致機體的慢性炎癥或相關免疫性疾病發生。動物實驗顯示[10]，Th17細胞在腸道慢性炎癥的維持中發揮重要作用，中和IL-17A后模型小鼠腸道炎癥明顯減輕。
本研究顯示EPEC腸道感染模型中外周血TNF、IFN-γ水平均有不同程度升高，但與對照組比較無統計學差異。IL-2、IL-6、IL-17、TNF、IFN-γ為促炎因子，IL-4、IL-10為抗炎因子，但多個因子同時具有抗炎和促炎兩種作用。本研究顯示在出現胃腸道感染后，小鼠體內炎性反應并非單純的促炎或抗炎細胞因子水平升高，也不是表現為單純Th1類細胞因子或單純Th2類細胞因子水平升高，呈現Th1/Th2混合免疫狀態。雖然Th1細胞因子有一定程度升高，但IL-4以及IL-6、IL-10的明顯升高表明在急性期以Th2細胞介導的體液免疫應答占優勢，Th1/Th2下降，失衡的Th1/Th2是否能恢復、何時恢復、如何恢復有待進一步研究。如果調高的Th2、Th17細胞因子水平持續存在，那么推測EPEC腸道感染存在誘導慢性免疫性疾病的可能。
促炎因子反應過強則造成機體組織損傷加重，抗炎因子反應過強則對機體抗病原體免疫反應產生一定程度抑制效應，這種抑制效應在一定程度上能夠減少或避免組織更大的損傷，但同時可造成慢性遷延性感染及相關免疫疾病的發生。促炎反應、抗炎反應、Th1/Th2細胞介導的反應是一個動態平衡過程，一旦失衡將導致相關疾病的產生如慢性炎癥或免疫相關疾病。多種免疫相關性疾病與感染相關，可由感染直接或間接誘發，本研究表明EPEC腸道感染小鼠模型體內Th2、Th17細胞相關性淋巴因子增高為主，Th1/Th2降低，提示腸道細菌感染可能與某些病原體呼吸道感染[11]（合胞病毒等）一樣，有增加變應性疾病發生的傾向。有關于非致病性大腸桿菌（Nonpathogenic E. coli ATCC 25922）抑制小鼠氣道過敏疾病動物模型體內的特異性IgE、IL-4的水平的報道，且呈時間和劑量依賴性[12]，但本研究使用的是致病性大腸桿菌和健康小鼠，結果和研究方式有所不同。鑒于Th2、Th17細胞在變態反應性疾病發病機制中的重要作用，兒童感染性腹瀉病（細菌感染）與變態反應疾病是否有一定相關性尚需進一步深入研究。
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